王永芳
- 作品数：27 被引量：27H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学环境科学与工程更多>>
- 单纯性浅表皮肤感染小鼠模型的建立及有效性验证
- 建立与临床上单纯性浅表皮肤感染较为接近的小鼠模型,便于致病机制和外用抗菌药物筛选及疗效观察研究.选用BALB/c小鼠,采用胶带反复粘贴法破坏局部皮肤屏障,通过TEWL值标定皮肤屏障破坏程度,然后在其创面接种金葡菌(7.5...
- 王永芳李新宇宋莎莎高纪伟徐兰芳
- 关键词：病理机制疗效评价
- 文献传递
- 表没食子儿茶素没食子酸酯对HPV11早期基因E6、E7mRNA表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的利用人工构建的含人乳头瘤病毒（HPV）11型基因组的HaCaT细胞（简称为HPVll．HaCaT细胞），研究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对该细胞生长的抑制作用，以及受试物对HPVll早期基因E6和E7mRNA表达的影响。方法在HaCaT及HPVll．HaCaT细胞培养基中添加不同浓度的EGCG后，应用MTT比色法检测受试物对细胞生长增殖的影响；用相对荧光定量PCR法检测HPVll．HaCaT细胞中HPVllE6、E7mRNA表达的改变。结果EGCG能抑制HaCaT和HPVll．HaCaT细胞的生长，不同浓度EGCG作用下，细胞生存率为52％-95％、64％～90％，呈浓度和时间依赖趋势。EGCG作用于细胞12h和24h后，HPVll．HaCaT细胞中HPVllE6、E7基因的mRNA表达水平明显下降（P〈0．05）。结论EGCG在体外能抑制含HPVll基因组的HaCaT细胞生长，并能抑制HPVll功能基因E6、E7表达。
- 孙洋李新宇宋莎莎王永芳顾恒
- 关键词：人乳头瘤病毒11型表没食子儿茶素没食子酸酯E6E7
- 积雪草提取物对人外周血白细胞趋化以及成纤维细胞胶原合成的影响
- 目的:体外研究积雪草提取物对人白细胞趋化功能及人成纤维细胞胶原合成的影响,以获得积雪草预防和治疗病理性疤痕形成的药理学基础.
方法:体外分离和培养人外周血白细胞,采用甲酰三肽诱引入外周血白细胞迁移,通过48孔微...
- 王永芳李新宇宋莎莎徐兰芳高纪伟
- 关键词：成纤维细胞胶原合成
- 姜黄素对THP-1细胞NF-κB、TNF-α、IL-1βmRNA表达的影响及体内抗炎作用的研究
- 目的:现己知银屑病等炎症性皮肤病存在免疫方面异常,许多细胞因子直接参与银屑病皮损的形成。NF-κB是免疫反应比较关键的中介因子,与银屑病等炎症性皮肤病的发病机理密切相关。此外,树突状细胞以及巨噬细胞在银屑病炎症反应过程中...
- 彭立新李新宇宋莎莎王永芳
- 文献传递
- 磷酸二酯酶4抑制剂Hemay005对人白细胞趋化活性的影响
- 目的：体外研究磷酸二酯酶4抑制剂Hemay005对人白细胞趋化活性的影响.方法：体外分离和培养人外周血白细胞,用甲酰三肽(fMLP)作诱引剂,通过48孔微量趋化小室检测Hemay005人白细胞趋化功能的影响.结果：Hem...
- 王永芳李新宇朱菁宋莎莎黄俊哲徐兰芳张和胜
- 关键词：银屑病磷酸二酯酶4抑制剂人白细胞趋化活性疗效评价
- 壬二酸和水杨酸对痤疮丙酸杆菌诱导的细胞炎症因子及TLR4蛋白表达的影响
- 2024年
- 目的探讨壬二酸和水杨酸对痤疮丙酸杆菌Propionibacterium acnes诱导的炎症因子及Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法采用CCK-8法检测药物对人角质形成细胞HaCaT和人单核细胞THP-1增殖活力的影响,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清中白细胞介素(IL)-8、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,利用分子对接技术分析壬二酸、水杨酸与TLR4蛋白的分子间相互作用,并通过细胞免疫荧光和荧光强度分析验证其对Ha Ca T细胞表面TLR4蛋白表达的影响。结果经不同浓度的壬二酸或水杨酸处理48 h后,在Ha CaT细胞实验中,壬二酸的最大实验质量浓度为62.50μg/mL,水杨酸为31.25μg/mL;THP-1细胞实验中壬二酸的最大实验质量浓度为1000.00μg/m L,水杨酸为500.00μg/m L。壬二酸和水杨酸对P.acnes胞壁成分肽聚糖(PGN)+脂磷壁酸(LTA)或热灭活P.acnes诱导后HaCaT细胞产生IL-8以及对佛波酯(PMA)+细菌脂多糖(LPS)或热灭活P.acnes诱导后的THP-1细胞产生IL-1β和TNF-α均表现出一定的抑制作用,呈剂量相关性。分子对接结果表明,壬二酸、水杨酸均能与TLR4蛋白受体有效地结合。与对照组相比,PGN+LTA或热灭活P.acnes刺激后HaCaT细胞表面TLR4荧光强度明显增高(P<0.01),经62.50μg/mL壬二酸预处理后PGN+LTA刺激的HaCaT细胞表面TLR4蛋白表达明显降低(P<0.01),31.25μg/mL水杨酸预处理后能明显降低热灭活P.acnes诱导的细胞表面TLR4蛋白表达(P<0.05)。结论壬二酸和水杨酸能抑制P.acnes引起的角质形成细胞和单核巨噬细胞中促炎因子的产生,同时还能减少角质形成细胞表面TLR4蛋白的表达,从而发挥治疗痤疮的作用。
- 宋莎莎王永芳陈毅李新宇
- 关键词：壬二酸水杨酸痤疮丙酸杆菌炎症因子TOLL样受体4
- HB-13和HP-13对HaCaT细胞NF-κB活化和p38MAPK磷酸化的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨盐酸13-己基小檗碱（HB-13）和盐酸13-己基巴马汀（HP-13）对肿瘤坏死因子α（TNF-α）信号刺激HaCaT细胞后核因子-κB（NF-κB）活化和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）磷酸化的影响。方法在HaCaT细胞培养体系中，用30ng／mL外源性重组人TNF-α（rhTNF-α）分别刺激120min和15min，用免疫印迹法检测磷酸化-I κB—α（p-I κB-α）和磷酸化-p38MAPK（p-p38）的表达，并观察HB-13和HP-13对p—I κB—α和p-p38表达的影响。结果HB-13和HP-13在0．39～1．56μg／mL实验浓度范围内抑制rhTNF-α信号刺激下p—I κB—α表达（n=3，P〈0．05），抑制作用具有剂量依赖趋势，IC50值分别约为0．441μg／mL（r=-0．990，n=3，P〉0．05）和0．832μg／mL（r=-0．992，n=3，P〉0．05）。HB-13和HP-13在0．39～1．56μg／mL实验浓度范围内对rhTNF-α信号刺激下p-p38的表达均无明显抑制作用（n=3，P〉0．05）。结论HB-13和HP-13在实验浓度范围内对TNF-α信号引起的NF—κB活化均有抑制作用，对TNF—α信号引起的p38MAPK磷酸化均无抑制作用。
- 姜辉李新宇涂红琴王永芳宋莎莎徐兰芳
- 关键词：NF-ΚBP38丝裂原活化蛋白激酶类小檗碱
- 利用人工构建的含HPV11基因组HaCaT细胞检测表没食子儿茶素没食子酸酯以及姜黄素对HPV11早期基因E6、E7mRNA表达的影响
- 目的：利用人工构建的含人乳头瘤病毒(HPV)11型基因组的HaCaT细胞(简称为HPV11.HaCaT细胞),检测表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)及姜黄素对该细胞生长的抑制作用,以及受试物对HPV11 早期基因E6和...
- 孙洋宋莎莎王永芳李新宇顾恒
- 关键词：人乳头瘤病毒11型表没食子儿茶素没食子酸酯姜黄素E6E7
- 贝壳杉烷型二萜类化合物PV006对THP-1源性巨噬细胞M1型极化的调节作用被引量：2
- 2018年
- 目的利用体外诱导巨噬细胞向M1型极化的模式,初探贝壳杉烷型二萜类化合物PV006对M1型极化的影响。方法用佛波酯(PMA)联合脂多糖(LPS)及重组人干扰素-γ(rh IFN-γ)刺激人单核细胞株THP-1细胞,促使其向M1型巨噬细胞分化。通过显微镜观察细胞形态学变化,qRT-PCR法检测诱导后的细胞内IL-1β、TNF-α、IL-6以及IL-8 mRNA表达水平,Western blot法检测核转录因子-κB磷酸化P65蛋白(NF-κB p-P65)和磷酸化信号转导与转录激活物1(p-STAT1)蛋白的表达,确认THP-1细胞向M1型极化,同时检测PV006处理后对上述指标的影响。结果经PMA联合LPS及rh IFN-γ诱导后,THP-1细胞形态由圆形转变为特征的长梭形或纺锤形,IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8 mRNA表达升高,NF-κB p-P65和p-STAT1蛋白表达增强。不同浓度PV006同步处理后,作M1型极化诱导的THP-1细胞未出现特征性的长梭形或纺锤形,大部分细胞仍为圆形。IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8 mRNA表达水平下调(P<0.05),NF-κB p-P65和p-STAT1蛋白表达减弱。结论 PMA联合LPS及rh IFN-γ可诱导THP-1源性巨噬细胞向M1型极化,PV006有抑制巨噬细胞向M1型分化的作用。
- 张加芬李新宇宋莎莎王永芳
- 关键词：P65
- 携带HPV11型基因组细胞三维培养模型的建立及其衣壳蛋白L1的表达被引量：5
- 2010年
- 目的用携带人乳头瘤病毒11型(HPV11)基因组的角质形成细胞(HPV11.HaCaT细胞),在体外建立皮肤类似培养物三维模型,观察HPV11衣壳蛋白L1是否表达,为进一步建立体外病毒复制系统和药效筛选模型奠定基础。方法用人成纤维细胞和I型鼠尾胶原制备真皮类似物凝胶,接种HPV11.HaCaT细胞进行三维培养。同时以正常HaCaT细胞作对照。15天时取皮肤类似物进行冰冻切片,HE染色进行组织结构检查,免疫组化法检查角蛋白10、泛角蛋白以及HPV11L1蛋白表达。结果HE染色显示,HPV11.HaCaT细胞和正常HaCaT细胞的层数明显增多。免疫组化显示,两种细胞的皮肤类似物角蛋白10、泛角蛋白表达全部阳性。HPV11.HaCaT细胞表达L1蛋白阳性,而正常HaCaT表达L1蛋白阴性。结论三维培养方式可诱导HPV11.HaCaT细胞分化,皮肤类似培养物出现细胞分化标志,并且表达HPV11型衣壳蛋白L1。
- 王永芳李新宇宋莎莎徐兰芳高纪伟
- 关键词：人乳头瘤病毒角质形成细胞衣壳蛋白
