王玉琳
- 作品数：32 被引量：212H指数：8
- 供职机构：兰州生物制品研究所更多>>
- 发文基金：甘肃省科技重大专项计划甘肃省科技攻关计划“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 结核分枝杆菌耐吡嗪酰胺分子机制研究被引量：13
- 2007年
- 吡嗪酰胺(PZA)是结核病短程化疗中的一线抗结核药物,由吡嗪酰胺酶转换成为活性形式吡嗪酸而生效。吡嗪酰胺酶由pncA基因编码,pncA基因突变会导致该酶活性丧失,与PZA耐药性产生有关。为了进一步明确PZA耐药性产生的基因学基础和PZA耐药株的pncA基因突变率,对中国100株结核分枝杆菌临床分离株进行了DNA序列测定,其中85株为PZA耐药株,15株为PZA敏感株。PZA耐药株有27%(23/85)发生了pncA基因突变,从而导致吡嗪酰胺酶基本氨基酸序列的改变,突变分布在pncA基因开读框架17-546位的核苷酸。其中有一株突变位于pncA基因的调节区域-11位处。同时发现20%(3/15)pncA敏感株也发生了pncA基因突变。敏感株发生突变可能是由于PZA敏感性实验不准确或存在其它耐药机制。实验表明,pncA基因突变是PZA耐药的主要机制之一,中国PZA耐药临床分离株尚存在其它耐药分子机制。
- 姜英彭俊平杨帆余黎王玉琳金奇
- 关键词：结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药DNA序列分析
- 不同代次牛肾原代细胞培养轮状病毒的比较研究被引量：15
- 2007年
- 口服轮状病毒活疫苗(LLR株)生产用细胞基质为新生小牛肾原代细胞.原始的初代细胞(P0)产量小,一对牛肾平均生产7瓶细胞.将原始的初代细胞传代可使细胞产量显著增加,传代后(P2代)细胞产量可由7瓶增加为96～112瓶,细胞核型检查传至P5代的细胞染色体数目与初代细胞一致.细胞培养物均一性提高.P0代与P2代细胞病毒培养物滴度分别在6.2±1.5和6.5±0.51gCCID50/ml,使用P2代细胞培养病毒,产量增加10～15倍.提高了疫苗生产的可控性和质量,生产规模显著放大,经济效益明显.
- 鱼轲魏至栋庞兴刘晓凡刘溯谢澎王玉琳
- 关键词：传代培养轮状病毒疫苗
- 病毒活疫苗冻干保护剂筛选研究被引量：17
- 1996年
- 为提高冻干病毒性活疫苗的成品滴度和稳定性及提高疫苗生产的出品率，本研究通过对多种保护剂成分如明胶、山梨醇、蔗糖、乳糖、右旋糖苷、精氨酸等及其配比的大量反复筛选试验，已初步选定了数种可供选择并进一步优化完善的冻干保护剂配方。与现行冻干保护剂相比，其疫苗出品率在相同投入下可提高三倍。
- 王玉琳曾鸣王玲刘晓凡韩德胜李根明
- 关键词：病毒疫苗冻干保护剂冻干病毒病
- 硫酸鱼精蛋白去除Vero细胞乙脑疫苗残余DNA方法的条件优化被引量：4
- 2007年
- Vero细胞规模化生产疫苗时利用硫酸鱼精蛋白可去除乙型脑炎纯化疫苗中Vero细胞的DNA,实验中对不同条件进行了比较.首先在Vero细胞冻融浓缩液中分别按终浓度2mg/ml、1mg/ml、0.5mg/ml、0.2mg/ml、0.1mg/ml加入鱼精蛋白去除DNA,确定0.2～2 mg/ml均有良好去除效果;其次将Vero细胞培养的乙脑病毒浓缩液分3组:第1组按2mg/ml、1mg/ml和0.5mg/ml分别沉淀一次、两次;第2组加入终浓度1mg/ml PS后调pH值为pH6.0、6.4、6.8、7.2、7.6;第3组将NaCl浓度调整至0.029mol/L、0.145mol/L、0.725mol/L,加入终浓度1mg/mlPS.确定低浓度多次沉淀、pH值6.8～7.2、盐浓度0.145mol/L条件下沉淀效果最好.
- 韩德胜李振平李薇孙燕孙振鹏崔焰王玉琳
- 关键词：硫酸鱼精蛋白
- 生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗被引量：9
- 2009年
- 目的建立利用生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗的新工艺。方法以Vero细胞作为乙型脑炎病毒增殖的细胞基质,使用微载体Cytodex-Ⅰ在15L生物反应器中进行高密度培养,采用2.5～4.5g/L的载体浓度培养乙型脑炎病毒,制备3批纯化乙型脑炎疫苗并进行检定。结果随着微载体浓度的增加,细胞密度升高。采用2.5～4.5g/L微载体培养的病毒收获液的平均滴度为7.38～7.56lgPFU/ml,收获量最高可达到12～15个有效罐体积。制备的3批疫苗各项质量指标均符合《中国药典》三部(2005版)相关要求。结论已建立了15L生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗的新工艺,为进一步放大生产规模奠定了基础。
- 李薇李振平孙燕韩德胜周丽娟范秀娟王玉琳
- 关键词：生物反应器微载体VERO细胞乙型脑炎疫苗
- 双抗体夹心ELISA法检测狂犬病疫苗抗原活性组分被引量：6
- 1999年
- 采用多克隆双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法快速检测狂犬病毒抗原含量。结果表明，灵敏度达到１５μｇ／ｍｌ，同时特异性及变异系数均合乎要求。本方法用于精制狂苗制备过程中有效抗原活性组分的检测准确、快速、重复性好，且抗原的ＥＬＩＳＡ效价与ＮＩＨ动物法测定效价具有平行趋势。
- 王玉琳封多佳吕宏亮李薇马超魏至栋
- 关键词：双抗体夹心ELISA狂犬病毒抗原疫苗
- 冻干人用狂犬病纯化疫苗稳定剂的筛选被引量：1
- 2005年
- 取同一批人用狂犬病纯化疫苗纯化液,分别加入筛选出的A、B、C和D稳定剂,按已确定的适宜冻干曲线进行冻干后,分别检测其安全、效力、外观、水分等,效力结果显示,使用A、B、D稳定剂的制品在37℃放置3个月,效价降低了48%～60%;使用C稳定剂的制品在37℃放置3个月效价仅下降了16.1%。表明C稳定剂为冻干人用狂犬病纯化疫苗适宜的稳定剂配方。
- 李红芳邹勇徐斌李守丽张文权任宏伟郑学刚窦强王建军王玉琳
- 关键词：狂犬病疫苗冻干稳定剂
- 微载体规模化培养细胞的研究被引量：9
- 2005年
- 通过实验探索使用微载体进行动物细胞规模化培养,以期达到建立规模化生产病毒疫苗的目的.实验研究了Vero细胞的生长曲线,以及对细胞生长过程中影响细胞生长的葡萄糖、氨含量两个主要因素的变化规律以及微载体浓度与细胞密度的关系.通过实验发现微载体规模化培养细胞易于操作,比传统转瓶培养的细胞密度高,封闭式的培养方式不但减少了污染几率,而且可以充分保证疫苗的质量.最终找出适宜疫苗培养的微载体使用浓度为2.5g/L,适宜的细胞接种浓度为: 1～5×105cell/ml.
- 韩德胜李振平李薇孙振鹏赵星文周丽娟刘晓凡王玉琳
- 关键词：微载体细胞培养VERO细胞
- 乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2株生产用原代/主代毒种在恒河猴和小鼠体内神经毒力的测定及比较研究
- 贾丽丽董关木姚亚夫王玉琳黄佐林杨忠东李伟徐宏山刘欣玉王志伟岳广智张琳郑庆雯邹勇曾令冰
- 流行性乙型脑炎（简称“乙脑”）是由乙脑病毒感染引起的严重危害人类健康的急性病毒性传染病，主要损害中枢神经系统。病死率为20～40﹪，30﹪患者有严重神经系统后遗症。控制乙型脑炎最有效的措施是疫苗接种。目前国内外使用的乙脑...
- 关键词：
- 关键词：乙型脑炎疫苗神经毒力
- 冻干腮腺炎活疫苗细胞培养生产工艺研究被引量：1
- 1998年
- 报告了冻干腮腺炎活疫苗细胞培养生产工艺研究结果，通过对鸡胚疫苗株的适应培养及对细胞培养生产工艺的试验优化，建立了连续细胞培养多次收获疫苗生产工艺并制备出了冻干细胞培养腮腺炎活疫苗制剂。本生产工艺切实可行，生产成本低、投入产出率高，所用原材料规范、质量易于控制，具有明显的技术优势。生产的冻干疫苗制剂质量稳定可靠，符合中国生物制品规程要求。
- 王玉琳王玲刘晓凡韩德胜曾鸣
- 关键词：腮腺炎疫苗
