王珊
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 供职机构：暨南大学医学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 稳定表达丙肝病毒EGFP-CORE融合蛋白细胞系的建立
- 2007年
- 目的:构建可表达丙型肝炎病毒(HCV)EGFP-CORE融合蛋白的真核表达载体,获得重组质粒稳定转染的QSG7701细胞系。方法:克隆HCV核心抗原基因于真核表达载体pEGFP-C1中,脂质体法转染QSG7701细胞后,荧光显微镜及免疫细胞化学染色检测EGFP-CORE融合蛋白的表达。再经持续G418压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系。最后用Western blotting鉴定融合蛋白的表达。结果:成功构建真核表达载体pEGFP-C1/CORE;建立了重组质粒稳定转染的QSG7701细胞系。结论:重组质粒稳定转染的QSG7701细胞系可表达EGFP-CORE,为以CORE基因作为靶位的抗HCV感染研究奠定了基础。
- 李晓栋李君武宋东周曙光王珊黄清华
- 关键词：丙型肝炎病毒绿色荧光蛋白细胞系
- 中心静脉穿刺致急性心包填塞1例被引量：1
- 2017年
- 急性心包填塞（acute pericardial tamponade）是指由创伤、心脏破裂、渗出等原因导致心包腔内液体急剧聚积或异常增多，心包腔内压力明显增加，使心室舒张期充盈受限，静脉血液不能充分回流人右房右室，导致体循环淤血、回心血量减少、心输出量降低的一种危及生命的临床综合征，其主要的病理生理改变为心包压力迅速增加导致心脏各腔室受压、心脏充盈及舒张功能不全。
- 何丹王珊主有峰尹海燕
- 关键词：中心静脉穿刺急性心包填塞急性循环衰竭
- 结核杆菌Hsp65和hGM-CSF双顺反子表达质粒的构建与表达
- 2007年
- 目的:应用分子生物学技术,构建pIHsp65GM双顺反子真核表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以结核分枝杆菌H37Rv株基因组为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65基因,同时从质粒pORF-hGM-CSF中扩增出基因佐剂hGM-CSF,分别克隆到真核表达载体pIRES的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建pIHsp65GM真核表达质粒,并转染HepG-2细胞中表达和检测.结果:酶切鉴定提示插入的基因片段大小分别为1.64kb和0.47kb,测序分析表明克隆的Hsp65和hGM-CSF序列与GenBank上公布序列完全一致;免疫组织化学方法检测到表达Hsp65的阳性细胞;ELISA方法检测到pIHsp65GM转染组细胞培养上清中hGM-CSF的表达,与空载体对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:成功构建和表达了pIHsp65GM质粒,为研制优于卡介苗的新型抗结核病DNA疫苗奠定基础.
- 李君武周曙光黄泽棋李晓栋宋东王珊黄清华
- 关键词：结核分枝杆菌双顺反子基因佐剂
- 脓毒症治疗的现状与展望被引量：6
- 2017年
- 脓毒症（sepsis）是由感染引起的失控的宿主反应导致的危及生命的器官功能障碍，脓毒症及脓毒性休克是进行性、多因素的疾病状态，具有较高的发病率及病死率。每年全球范围内有数百万人罹患脓毒症，其中超过1／4的患者死亡，显然，脓毒症已成为威胁人类生命健康的重要病症之一。
- 尹海燕王珊叶小玲
- 关键词：脓毒症器官功能障碍人类生命脓毒性休克宿主反应疾病状态
- 玉米特异启动子驱动下结核hsp65基因植物表达载体构建及鉴定被引量：2
- 2009年
- 以本实验室构建的pEGHLE为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65基因,连接到含有玉米特异性启动子globulin-1的pCR2.1载体上;将globulin1-Hsp65联合片断切下连到含有抗除草剂基因bar的pCAMBIA1300载体中;电击法将重组质粒转化到农杆菌LBA4404中。结果表明:成功构建了pC1300GHsp65质粒,酶切鉴定得到3Kb和8.6Kb两条带,测序分析表明,克隆的Hsp65与NCBI上公布序列一致;成功转化到农杆菌中,酶切从农杆菌中所提的质粒条带大小与预期结果相符合。结果显示,已成功构建和转化了pC1300GHsp65质粒,为成功研制利用转基因植物生产抗结核口服疫苗奠定了基础。
- 李君武黄清华王珊刘艳黄泽棋宋东
- 关键词：玉米特异启动子
- 结核杆菌Esat6与hGM-CSF双顺反子表达载体的构建及鉴定
- 2007年
- 目的从质粒pVAE中克隆目的基因Esat6,与hGM-CSF一起构建双顺反子表达载体pIEG,并进行鉴定。方法以质粒pVAE为模板扩增出Esat6基因,与pIRES的MCS A进行重组,构建pIEsat6重组质粒。然后再以pORF-hGM-CSF为模板扩增出hGM-CSF基因,与pIRES载体的MCS B进行重组,构建pIGM重组质粒,上述两重组质粒经PCR、限制性内切酶图谱及DNA序列测定分析等多种方法进行鉴定后,再通过酶切、连接把hGM-CSF构建于pIEsat6质粒中,形成双顺反子真核表达载体pIEG。结果通过PCR可克隆得到相应大小的产物,酶切鉴定所切下的两片段大小约为0.29 kb和0.47 kb,与预计相符。测序结果与报道一致。结论成功构建结核杆菌Esat6基因与hGM-CSF双顺反子真核表达载体,为进一步研究其结核融合DNA疫苗及其转染DC疫苗原型的免疫保护效果奠定了基础。
- 李君武黄泽棋姚翠婵林绍强周曙光李晓栋宋东黄清华王珊
- 关键词：结核分支杆菌ESAT6双顺反子
