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田昱: 作品数：15 被引量：39H指数：3; 供职机构：上海医科大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>; 相关领域：生物学医药卫生更多>>

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人纤溶酶原激活剂抑制物2型在胃癌组织中的分布与表达: 1999年; 目的探讨人纤溶酶原激活剂抑制物２型（ＰＡＩ－２）基因在胃癌组织中表达与分布的作用。方法采用ＡＢＣ方法检测发生和未发生淋巴结转移的胃癌组织中ＰＡＩ－２、ｕＰＡ和ＰＡＩ１的表达，各３０例。结果ＰＡＩ－２主要在平滑肌细胞中表达，ｕ－ＰＡ和ＰＡＩ－１主要在肿瘤细胞中表达（Ｐ＜０．０１）。ＰＡＩ－２在胃癌组织中的分布以及表达程度与肿瘤的淋巴结转移相关。肿瘤的淋巴结转移与肿瘤细胞是否表达ＰＡＩ－２无关（Ｐ＞０．０５）。但在有ＰＡＩ－２表达的病例中，肿瘤的淋巴结转移却与肿瘤细胞ＰＡＩ－２的表达程度呈正相关，而与平滑肌细胞ＰＡＩ－２的表达程度呈负相关（Ｐ＜０．０１）。; 田昱沈俊卿宋后燕朱运松; 关键词：胃肿瘤 PAI-2 基因表达

降低细胞内tTG活性可使细胞获得对TNF-α的抗性被引量：3: 2000年; 用 Northern印迹证实在 He La细胞中有 t TG的表达 ,且这种表达受 TNF-α的上调 .构建t TG反义真核表达质粒并转染 He La细胞 ,用 G41 8抗性筛选稳定表达的转染细胞 ,并用 Northern印迹和 t TG活性测定进一步分析反义 t TG的转录 .用结晶紫及 MTT法证实阳性细胞克隆获得了对 TNF- α的抗性 ,而转染表达载体 pc DNA3的细胞仍对 TNF- α敏感 .结果表明降低 t TG活性能使细胞对 TNF-; 田昱李平朱运松shmu.edu.c; 关键词：TTG TNF-Α 酶活性

控制正常细胞对肺癌细胞P^(16)基因缺失的污染的方法的建立及其应用被引量：6: 1997年; 目的建立一种能有效提高从混有正常细胞的肿瘤组织中检测Ｐ１６基因纯合缺失的灵敏度的方法，以及探讨该基因的状态与肺癌临床病理的关系。方法将野生型ＤＮＡ与Ｐ１６基因纯合缺失的ＤＮＡ按一定比例混合，并将其有限稀释，以不同量的ＤＮＡ为模板，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增Ｐ１６基因第二外显子及内对照基因片断，在此基础上，以特定量肺癌ＤＮＡ为模板，用相同的ＰＣＲ条件对上述片断进行扩增，对扩增出的第二外显子行单链构型多态性（ＳＳＣＰ）分析。结果ＤＮＡ模板为５ｎｇ，野生型ＤＮＡ不超过总ＤＮＡ４０％时，不掩盖Ｐ１６基因纯合缺失。小细胞肺癌，癌旁肺无Ｐ１６基因纯合缺失及突变，５２例非小细胞肺癌中有２１例Ｐ１６基因纯合缺失，３例第二外显子ＳＳＣＰ异常，其中伴淋巴结转移的非小细胞肺癌Ｐ１６基因的纯合缺失率（７２％）显著高于无淋巴结转移者（１６．６％）。同时还发现Ｐ１６基因的异常与非小细胞肺癌的临床病理分级及预后明显相关。Ｐ１６基因缺失的患者术后存活时间显著低于无Ｐ１６基因缺失者。结论控制ＰＣＲ中模板的量有助于提高检测Ｐ１６基因缺失的灵敏度。Ｐ１６基因异常可能参与非小细胞肺癌的恶性进展。; 冉瑞琼曹晓运田昱傅晓颖傅晓颖曹世龙; 关键词：肺肿瘤基因缺失 P16 聚合酶链反应

t PA、u PA/u PAR及其抑制剂PAI 1在乳腺肿瘤的表达被引量：4: 1999年; 目的　研究组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ）、尿激酶型纤溶酶原激活剂（ｕＰＡ）及其受体ｕＰＡＲ、１型纤溶酶原激活剂抑制剂ＰＡＩ１在乳腺肿瘤中的分布及酶学活性。　方法　用免疫组织化学ＡＢＣ方法，分析４种因子在乳腺肿瘤组织中的定位及半定量表达，用发色底物法测定乳腺肿瘤组织提取物中的ｔＰＡ和ｕＰＡ的活性。　结果　ｔＰＡ、ｕＰＡ、ＰＡＩ１主要分布在正常腺上皮及癌上皮细胞的胞质中，ｕＰＡＲ则在癌细胞的胞膜及胞浆中；总ＰＡ活性和ｔＰＡ活性在乳腺良、恶性组织中均无显著性改变，但ｕＰＡ，ｕＰＡＲ和ＰＡＩ１在乳腺癌组织中的表达明显高于良性组织及癌旁组织；ｕＰＡ／ｕＰＡＲ在转移灶中的表达较原发灶有不同程度的下降，而ＰＡＩ１在转移灶中却较原发灶中为高。　结论　ｔＰＡ可能与乳腺癌的恶性表型无关。而ｕＰＡ／ｕＰＡＲ与恶性表型相关；ｕＰＡ／ｕＰＡＲ和ＰＡＩ１的相互制约及平衡在调节肿瘤原发灶癌细胞的移动中可能起到重要作用。; 唐辉滨何诚廖劲晖田昱应其龙宋后燕朱运松; 关键词：U-PA U-PAR 抑制剂

人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)在大肠杆菌中的表达和分离纯化被引量：3: 1998年; 用ＰＣＲ方法从ｐＰＡＩＪ．７中扩增人纤溶酶原激活剂抑制物２型（ＰＡＩ－２）ｃＤＮＡ，与ｐＵＣ１８重组，经限制性内切酶片段分析与核苷酸序列分析，获得全长人ＰＡＩ－２ｃＤＮＡ．ＰＡＩ－２ｃＤＮＡ与原核表达载体重组，构建原核表达质粒并转化大肠杆菌．经温度诱导表达，重组ＰＡＩ－２占全菌总蛋白的１４％，以可溶性形式存在，具纤溶抑制活性．工程菌发酵、压榨后，用硫酸铵分级沉淀，沉淀物经分子筛、离子交换和疏水性色谱的分离，每升菌液可获得约３０ｍｇ纯度达９０％的蛋白质，比活性为１１８６６ＡＩＵ／ｍｇ蛋白质，得率为１９．２％．; 田昱沈俊卿李平宋后燕朱运松; 关键词：原核表达分离纯化 PAI-2 大肠杆菌

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA在P.pastoris酵母菌中的表达和鉴定: 1998年; 将编码３７９个氨基酸残基的ＰＡＩ－１ｃＤＮＡ插入到含ＡＯＸ１启动子和ＰＨＯ１分泌信号肽序列的甲醇营养型酵母载体中，构建成表达质粒ｐＹＩＳ－１．表达质粒转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ甲醇营养型酵母细胞，筛选Ｈｉｓ＋Ｍｕｔ－表型的转化子，经低密度摇瓶培养，１％甲醇诱导表达７ｄ后，培液经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，ＰＡＩ－１生物活性测定和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实表达出分子量为４３～５１ｋＤ的４条ＰＡＩ－１条带．表达的ＰＡＩ－１能有效地分泌到培液中，占培液总蛋白的２６％左右，达４ｍｇ／Ｌ培液；其比活性为１．１６×１０４ＡＵ／ｍｇ．; 何诚唐辉滨田昱宋后燕朱运松; 关键词：PAI-1

纤溶酶原激活剂抑制物2型的结构与功能被引量：1: 1997年; 纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)具纤溶抑制活性,是尿激酶(uPA)特异的抑制物。u-PA在肿瘤浸润与转移过程中起了十分关键的作用,PAI-2亦因此成为当今研究的热点。本文对PAI-2的基因结构、表达调控、蛋白质结构、功能及其作用机制等进行了综述。; 田昱; 关键词：T-PA

人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)在Pichia pastoris中的表达被引量：2: 1998年; 用ＰＣＲ方法从ｐＰＡＩＪ．７中扩增人纤溶酶原激活剂抑制物２型（ＰＡＩ－２）基因，与ｐＰＵＣ１８重组，经限制性内切酶片段分析与核苷酸序列分析，获得全长人ＰＡＩ－２基因．ＰＡＩ－２基因与表达载体ｐＰＩＣ９重组，构建受乙醇氧化酶１基因（ＡＯＸ１）启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒，转化ＧＳ１１５宿主菌，经表型筛选和ＰＣＲ扩增筛选阳性克隆，用甲醇诱导表达，重组ＰＡＩ－２以分泌型表达，占分泌总蛋白的３０％，具ＰＡＩ－２抗原性，与低分子量尿激酶形成了抗ＳＤＳ复合物，具抑制纤溶的活性（９１．４ＡＩＵ／ｍｌ）．对培养条件也进行了探讨．; 田昱李平朱运松; 关键词：纤溶酶原激活剂酵母表达 PCR

PAI-2ΔCD突变体的构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化: 1999年; 目的构建ＰＡＩ－２ΔＣＤ突变体基因，实现在大肠杆菌中的表达并建立重组人ＰＡＩ－２ΔＣＤ的分离纯化方法。方法用ＰＣＲ扩增ＰＡＩ－２ΔＣＤ基因，经限制性内切酶片段分析及核苷酸序列分析后，突变体基因与原核表达载体ｐＬＹ－４重组并转化蛋白酶缺陷型菌株ＪＦ１１２５。经温度诱导表达，表达产物用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法和纤溶抑制活性测定等方法鉴定。工程菌发酵后，经高压匀浆破菌，用离子交换、疏水性色谱和分子筛进行分离。结果经温度诱导表达，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ证实在相应相对分子质量处出现表达条带，约占全菌总蛋白的１５％。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法证实表达产物具有ＰＡＩ－２免疫原性，溶圈抑制法及翻转板法证实表达产物具有纤溶抑制活性。５Ｌ发酵菌液可得湿菌约１００ｇ，经多步纯化后，每升发酵菌液可得纯度达９７％的ＰＡＩ－２ΔＣＤ约３６ｍｇ，比活性为２８６４０ＡＩＵ／ｍｇ。结论成功构建了ＰＡＩ－２ΔＣＤ突变体，实现了在大肠杆菌中的表达，并成功地分离纯化了重组人ＰＡＩ－２ΔＣＤ蛋白。; 田昱宋后燕朱运松; 关键词：纤溶酶原激活剂抑制物突变体 PAI-2 大肠杆菌

抗菌肽ABP3基因的克隆及其在Pichia pastoris中的表达被引量：17: 1999年; 用化学合成法合成以植物偏爱密码子编码的新抗菌肽ＡＢＰ３基因片段，合成片段拼接后，与ｐＵＣ１９重组，经限制酶片段分析与核苷酸序列分析，获得抗菌肽ＡＢＰ３基因。ＡＢＰ３基因与表达载体ｐＰＩＣ９重组，构建受乙醇氧化酶１基因（ＡＯＸ１）的启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒，转化ＧＳ１１５宿主菌，经表型筛选，阳性克隆用甲醇诱导表达，重组ＡＢＰ３以分泌型表达，具抗菌活性，且符合ＡＢＰ３; 沈俊卿屈贤铭田昱; 关键词：抗菌肽酵母表达克隆

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