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淡色库蚊糜蛋白酶基因: 本发明属于基因工程领域,所述淡色库蚊糜蛋白酶基因(Culex pipiens pallens chymotrypsin)基因全长为977bp;其开放阅读框架为815bp,编码271个氨基酸。该基因之GENBANK中的编号...; 朱昌亮马磊沈波田海生李秀兰杨明夏胡莺; 文献传递

淡色库蚊抗药性相关NYD-Ch和NYD-Tr基因对人绒癌和肝癌细胞的影响: 目的:淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关基因NYD-Tr和NYD-Ch的体外表达对人类绒癌细胞和肝癌细胞的影响.结论:淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关基因NYD-Tr和NYD-Ch对体外培养绒癌细胞JAR和肝癌细胞HepG2有一定抑制和损...; 胡莺; 关键词：淡色库蚊基因免疫治疗质粒转染; 文献传递

抗药性相关糜蛋白酶基因真核表达载体的构建和鉴定被引量：2: 2003年; 目的:构建抗药性相关基因真核表达载体。方法:采用PCR方法,以淡色库蚊抗药性品系cDNA文库为模板,扩增出抗药性品系中高表达糜蛋白酶(chymotrypsin)基因,经T/A克隆测序鉴定后,扩增、纯化质粒,经双酶切后纯化目的片段,克隆到真核荧光表达载体pEGFP-C3中。结果:PCR和酶切鉴定表明,构建成功真核荧光表达载体pEGFP-C3/chymotrypsin。结论:PCR加双酶切鉴定的方法构建表达质粒,迅速省时,结果可靠。; 杨明夏胡莺沈波马磊李秀兰秦黎朱昌亮; 关键词：抗药性糜蛋白酶基因表达载体 CDNA文库

淡色库蚊胰蛋白酶基因: 本发明属于基因工程领域,所述淡色库蚊胰蛋白酶基因(Culex pipiens pallens trypsin)基因全长为909bp,其开放阅读框架为783bp,编码261个氨基酸。该基因在GENBANK中的编号为AY03...; 马磊朱昌亮沈波田海生李秀兰胡莺杨明夏; 文献传递

淡色库蚊β-肌动蛋白基因克隆与序列分析被引量：12: 2003年; 目的　获取淡色库蚊 β-肌动蛋白全长基因。　方法　采用 RACE法筛选淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系 c DNA表达文库 ,获得 β-肌动蛋白基因的 5′和 3′RACE序列 ,然后通过 T/ A克隆插入 p GEM- T质粒载体 ,经过测序、拼接获取全长序列。用 BL ASTp软件将该基因推导的氨基酸序列与蛋白质公共数据库 Swissprot比对、分析。　结果　获得淡色库蚊 β-肌动蛋白基因全长序列 ,总长度为 12 90 bp,开放阅读框为 1132 bp,编码 377个氨基酸 (Gen Bank/ NCBIAY10 0 0 0 5 )。推导的氨基酸序列与公共数据库比对 ,发现与冈比亚按蚊和黑腹果蝇的 β-肌动蛋白的同源性均为 91%。蛋白质的理论分子质量为 4 1.7ku,等电点 (PI)为 5 .4。　结论　获得了淡色库蚊 β-肌动蛋白基因全长序列 ,为蚊虫分子生物学的进一步研究奠定了基础。; 胡莺沈波杨明夏马磊李秀兰田海生朱昌亮; 关键词：淡色库蚊 Β-肌动蛋白克隆

淡色库蚊抗药性相关基因NYD-Ch和NYD-Tr的表达与初步鉴定被引量：1: 2003年; 目的　淡色库蚊抗药性相关基因NYD Ch(糜蛋白酶 )和NYD Tr(胰蛋白酶 )表达与鉴定。　方法　以淡色库蚊抗性品系全长cDNA文库为模板 ,采用PCR方法扩增出抗性品系中高表达的NYD Ch和NYD Tr基因 ,经T/A克隆测序鉴定 ,将扩增产物用NotI、EcoRI双酶切后作为插入片段 ,与具有相同粘性末端的融合表达质粒 pET 2 8a(+ )连接 ,转化入表达菌株E .coliBL2 1中 ,取含重组表达质粒的重组菌株以IPTG进行诱导表达 ,表达产物以SDS PAGE电泳和小鼠抗NYD Ch和NYD Tr抗血清进行Westernblot分析鉴定。　结果　NYD Ch和NYD Tr基因开读框大小分别为816bp和 786bp ,预计可分别编码 2 72个和 2 62个氨基酸。对应分子质量大小分别为 2 9.4ku和 2 8ku ,加上pET 2 8a(+ )载体融合部分氨基酸 ,表达产物条带应在 3 3ku附近 ,与SDS PAGE蛋白电泳胶上蛋白条带一致。Westernblot分析确认诱导后的 pET 2 8a(+ ) /NYD Ch和 pET 2 8a(+ ) /NYD Tr在分子质量约 3 3ku处出现 1条与小鼠抗NYD Ch和NYD Tr抗血清特异反应的条带。　结论　NYD Ch和NYD Tr基因在大肠杆菌中获得表达 ,Westernblot分析表明该蛋白为目的蛋白。; 李秀兰杨明夏胡莺沈波马磊公茂庆朱昌亮; 关键词：淡色库蚊抗药性克隆 WESTERN BLOT 公共卫生

用遗传操纵防治蚊媒的研究进展被引量：1: 2003年; 近年,由于蚊媒对杀虫剂的抗药性等多种原因,致使现有蚊媒防治措施的实施受到限制.因而人们把蚊媒病的防治策略转到了遗传操纵上,其目的是减少和替代目标种群,改变其作为疾病媒介的特性.早在30多年前研究者就在遗传防治方面展开了研究,通过改变媒介昆虫的染色体,产生大量绝育雄虫然后将其释放到野外,以控制种群数量,达到防治目的.但是,由于实践操作上的限制而被否定.近年来,随着分子生物学技术的发展,遗传防治被赋予了新的涵义,例如利用转基因技术,对媒介昆虫进行基因转化,定向地改变生物学性状,培育对病原体不易感、自身繁殖能力或传媒能力下降、对杀虫剂敏感性增加等性状的新型转基因昆虫,然后释放至自然界,最终达到控制危害的目的[1].; 胡莺朱昌亮; 关键词：蚊媒抗药性杀虫剂基因组学

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胡莺