苗萍
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抑制TIGAR表达可以增加非小细胞肺癌细胞对化疗药物的敏感性被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制TP53诱导的糖酵解和凋亡调节因子(TP53-induced glycolysis and apoptosis regulator,TIGAR)表达后对肺腺癌A549细胞化疗敏感性的影响及其可能的作用机制。方法:化学合成针对TIGAR基因的特异性siRNA片段(siRNA-TIGAR)和对照干扰片段(siRNAcontrol)。将siRNA-TIGAR或siRNA-control转染至A549细胞后,应用实时荧光定量-PCR和蛋白质印迹法检测细胞中TIGAR mRNA及蛋白的表达,CCK-8(cell counting kit-8)法检测依托泊苷、5-氟尿嘧啶、顺铂、依托泊苷联合N-乙酰-L-半胱氨酸和H2O2作用后细胞的存活率,FCM法检测H2O2作用后细胞的凋亡率及细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果:siRNA-TIGAR转染组A549细胞中TIGAR mRNA及蛋白的表达水平明显下降(P<0.01);依托泊苷、5-氟尿嘧啶和顺铂对siRNA-TIGAR转染组A549细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)明显降低(P<0.05);H2O2作用后,siRNA-TIGAR转染组A549细胞的存活率下降、凋亡率和细胞内ROS水平上升(P<0.05);依托泊苷联合N-乙酰-L-半胱氨酸作用后,siRNA-TIGAR转染组和siRNA-control转染组A549细胞对依托泊苷敏感性之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:抑制TIGAR的表达可以增强A549细胞对化疗药物的敏感性,其机制可能与细胞内ROS水平的改变有关。
- 张腾俞小凤苗萍赵小平黄钢刘建军
- 关键词：RNA干扰活性氧
