赵兴卉
- 作品数：22 被引量：38H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- MLL融合蛋白下调CBF复合物的机理及应用研究
- RUNX1/CBFβ（CBF复合物）和MLL都是正常血细胞生成过程中非常关键的转录因子,也都是重要的白血病抑制基因,它们的突变在白血病的发生发展中都起着重要的作用。RUNX1/CBFβ是RUNX1和CBFβ组成的异源二聚...
- 赵兴卉侯利华赵陶然董韵竹张金龙吴诗坡徐俊杰陈薇
- 关键词：病理机制
- 文献传递
- NF-κB与基质金属蛋白酶在骨髓单个核细胞心肌移植后的变化
- 2009年
- 背景:骨髓干细胞能够修复受损心肌,改善不利的心室重构及恶化的心功能,但细胞移植后对梗死心室重构影响的分子机制仍不清楚。目的:观察骨髓单个核细胞心肌移植后,心肌组织NF-κB、基质金属蛋白酶及其抑制因子表达的变化。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-07/2007-05在解放军总医院心血管外科实验动物中心和解放军军事医学科学院病原微生物生物安全国家重点实验室完成。材料:成年健康雄性杂种犬24只,随机分为急性心肌梗死对照组、急性心肌梗死移植组、陈旧心肌梗死对照组、陈旧心肌梗死移植组,6只/组。方法:急性心肌梗死对照组、急性心肌梗死移植组在冠状动脉左前降支主干结扎1h,观察缺血梗死区仍然呈暗红色,确认急性心肌梗死模型建立成功。陈旧心肌梗死对照组、陈旧心肌梗死移植组在移植前行超声心动图检查,证实左室前壁和心尖部可见节段性室壁运动异常,确认陈旧心肌梗死模型建立成功。Ficoll分离法获得犬自体骨髓单个核细胞悬液,急性心肌梗死移植组在造模后1h于梗死区及梗死边缘区分多点注射细胞悬液,每点注射0.5mL,(1～2)×107个细胞/mL;陈旧心肌梗死移植组于造模后4周开胸确认梗死区,同法行细胞移植。主要观察指标:RT-PCR法检测心肌组织基质金属蛋白酶及其抑制因子mRNA的表达,Western免疫印迹法检测心肌组织NF-κB的表达。结果:移植后6周与相应对照组比较,急性心肌梗死移植组、陈旧心肌梗死移植组的梗死区、梗死周围区基质金属蛋白酶2,9mRNA及NF-κB表达均显著降低(P<0.01),基质金属蛋白酶抑制因子1,2mRNA表达均显著升高(P<0.01)。结论:犬自体骨髓单个核细胞心肌移植可能通过抑制NF-κB活化,导致基质金属蛋白酶mRNA表达减少及其抑制因子mRNA表达增加,从而抑制梗死后心室重构过程。
- 任崇雷高长青赵兴卉李力兵郭俊伟叶卫华刘志勇
- 关键词：骨髓单个核细胞心室重构核转录因子基质金属蛋白酶
- 通过共表达转铁蛋白和细胞周期蛋白D1改造CHO细胞株
- 2012年
- 目的:对现有的CHO-DG44细胞株进行改造,得到在无血清培养基中更具生长优势的CHO宿主细胞株。方法:分别克隆转铁蛋白和细胞周期蛋白D1基因,构建共表达2种基因的pIRES质粒,转染CHO-DG44细胞株,筛选G418抗性克隆。结果与结论:得到3株G418阳性克隆株,其中转铁蛋白和细胞周期蛋白D1表达水平最高的S6与CHO-DG44相比,在无血清培养基中生长更快、密度更高。
- 付玲赵兴卉郭俊伟于婷宋小红侯利华陈薇
- 关键词：中国仓鼠卵巢细胞代谢工程转铁蛋白细胞周期蛋白D1
- 3株肠道病毒71型毒株的全基因组序列分析
- 2013年
- 目的:对获得的3株肠道病毒71(EV71)型毒株进行全基因组序列测定,并对其进化特点及分型进行初步分析。方法:提取病毒RNA,反转录得到cDNA,PCR分段扩增覆盖病毒全长序列的6个重叠片段(不包括多聚腺苷酸尾);用软件将3株EV71的各片段序列进行拼接、编辑和校正,随后进行氨基酸翻译及序列比较;用MEGA4.1软件构建系统进化树。结果:获得了3株EV71的全长序列:GDV103株基因组全长7404 nt,包括741 bp的5'端非编码区(UTR)、6582 bp的病毒基因组编码区(ORF)及81 bp的3'UTR;安徽株(Anhui2007)基因组全长7405 nt,包括742 bp的5'UTR、6582 bp的ORF及81 bp的3'UTR;VR1432株基因组全长7408 nt,包括743 bp的5'UTR、6582 bp的ORF及83 bp的3'UTR长。经同源性比对和进化树分析,证实GDV103和安徽株EV71属于C基因型的C4基因亚型,而VR1432株则属于C基因型的C2基因亚型。结论:获得了3株EV71的全长基因组序列,并进一步探讨了其型别,为下一步的干扰素保护实验奠定了基础。
- 刘颖樊红艳赵兴卉张晓鹏于蕊吴诗坡张哲付玲侯利华
- 关键词：肠道病毒71型全基因组
- TAT蛋白质转导结构域与SV40启动子特异的三锌指结构融合蛋白的表达与纯化被引量：1
- 2005年
- 利用蛋白质转导结构域(PTDs)可以将与之融合表达的蛋白质直接送入细胞中。将通过筛选噬菌体展示锌指文库得到的特异作用于SV40启动子上9bp序列的三锌指结构的序列插入含有TAT蛋白的蛋白质转导结构域的表达载体pET-TAT-NLS中,构建融合蛋白的表达载体pET-TAT-NLS-clone3。融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中得到了可溶性表达,含量约占总蛋白的18%;并通过镍亲和凝胶层析柱得到了较好的纯化融合蛋白。
- 赵兴卉朱旭东吴国清黄培堂
- 关键词：TAT融合蛋白可溶性表达纯化
- 特异靶向AML1-ETO+细胞的渗透肽的表达纯化与筛选
- 细胞渗透肽(cell penetrating proteins,CPP)是一类由5～30个氨基酸组成的短肽,具有特殊的细胞膜穿透作用。研究发现其能够将药物大分子物质转运到细胞内,在细胞生物学和细胞免疫学,尤其是在药物开发...
- 赵陶然董韵竹张金龙吴诗坡侯利华赵兴卉徐俊杰陈薇
- 关键词：AML1-ETO白血病蛋白表达
- 文献传递
- 炭疽毒素保护性抗原的不同结构域对其表达可溶性的影响
- 2008年
- 目的:对炭疽毒素保护性抗原(PA)的不同结构域进行了缺失突变,以期找到免疫原性降低而功能变化不大的PA蛋白突变体。方法:在对PA结构域的缺失突变体进行表达时,意外发现不同的突变体表达效果之间存在很大差异,遂用DNAStar软件对PA的4个结构域和突变体进行分析。结果:PA蛋白结构域2的表面特性与其他结构域存在很大差异。结论:推断这种表面特性影响了PA突变体的可溶性特征。
- 任声权易绍琼于婷杨秀旭刘树玲赵兴卉陈薇
- 关键词：炭疽毒素保护性抗原结构域缺失突变体
- 大肠杆菌RNaseⅢ基因的克隆与表达
- 2008年
- 目的:克隆并在原核表达系统中表达RNaseⅢ基因。方法:提取大肠杆菌JM109株的基因组DNA,以之为模板扩增得到RNaseⅢ基因全序列,将该编码序列克隆到原核表达载体pET-22b(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组RNaseⅢ表达。结果与结论:在大肠杆菌中克隆到了RNaseⅢ的全基因,经测序证明与数据库中报道的序列一致;表达的重组RNaseⅢ主要以包涵体形式存在。
- 解岩郭俊伟赵兴卉陈薇
- 关键词：基因克隆原核表达
- 乙型肝炎病毒HBx基因的人工转录因子及其应用
- 本发明公开了能够特异结合乙型肝炎病毒HBx基因转录调控区的C2H2型三锌指蛋白和六锌指蛋白，以及融合了能够抑制基因转录的效应功能域的人工转录因子，本发明还公开了所述转录调节因子在制备治疗乙型肝炎病毒感染性疾病药物中的应用...
- 陈薇赵兴卉黄培堂朱旭东周晓巍徐俊杰付玲
- 文献传递
- 特异识别HIV-1序列的锌指蛋白的表达纯化及其在Biacore CM-5芯片上的固定
- 2007年
- 目的:为了更好地利用Biacore 3000研究锌指与核酸的相互作用,将特异性识别HIV-15′端一段保守序列的三锌指蛋白固定在CM-5芯片上。方法:将特异性识别HIV-15′端一段保守序列5′-CTGTGTTTG-3′的三锌指基因克隆到表达载体pET-22b(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达重组三锌指蛋白,超声碎菌进行SDS-PAGE分析;包涵体形式的表达产物用盐酸胍溶解后,经一步凝胶柱复性并纯化;随后摸索适宜固定的pH值并通过化学方法进行固定。结果:表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在于超声沉淀中,纯化及柱复性后的蛋白纯度为98.8%,并在CM-5芯片上成功固定。结论:本研究为利用Biacore实时定量研究锌指蛋白与其识别DNA的相互作用进行了尝试。
- 刘娟赵兴卉蒋世卫朱旭东黄培堂
- 关键词：锌指HIV-1包涵体BIACORE
