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赵坤: 作品数：15 被引量：33H指数：3; 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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基于WRAP53蛋白表达的新型肝细胞癌预后检测方法与应用: 本发明公开了基于WRAP53蛋白表达水平的新型肝细胞癌预后检测方法与应用，通过抗原抗体反应及呈色反应，显示细胞或组织中的WRAP53蛋白表达水平，在显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应的产物，从而能够在细胞或组织原...; 匡铭郭宇彭穗王晶赵坤; 文献传递

荧光成像技术活体示踪裸鼠肝细胞癌肺转移被引量：1: 2014年; 目的探讨荧光素酶标记肝细胞癌（肝癌）细胞的荧光成像技术在活体示踪裸鼠肝癌肺转移中的价值。方法应用低转移潜能 HCC97L、高转移潜能HCC97H 肝癌细胞建立稳定表达荧光素酶的肝癌细胞株 HCC97L-FL、HCC97H-FL。24只裸鼠按随机数字表法随机分为HCC97L-FL 组和 HCC97H-FL 组。分别将5＆#215;106个 HCC97L-FL 和 HCC97H-FL 细胞加入磷酸盐缓冲液（PBS）50μl，制成细胞悬液。将细胞悬液注入裸鼠尾静脉，建立荧光素示踪的裸鼠肝癌肺转移模型。观察荧光成像示踪肺转移瘤大体标本及组织标本情况。两组数据比较采用 t 检验。结果荧光检测发现，HCC97L-FL、HCC97H-FL 细胞均可发出强烈荧光。建模后2～3周，HCC97H-FL 组裸鼠的肺部收集到荧光信号，3～4周荧光强度逐渐增强；HCC97L-FL 组裸鼠无可见的肺部荧光信号。建模后4周 HCC97H-FL 组荧光强度为（1.73±0.16）×10^4 a.u.，明显高于 HCC97L-FL 组的（0.03±0.01）×10^4 a.u.（t=23.652, P〈0.05）。建模后4周 HCC97H-FL 组裸鼠肺脏密布大小不等转移瘤病灶，部分较大病灶突出于肺脏表面；HCC97L-FL 组中未观察到转移瘤。转移瘤癌细胞核异型性明显，具备肝癌特征。结论荧光素酶标记肝癌细胞的荧光成像技术可对裸鼠肝癌肺转移进行活体、动态示踪。该技术为体内肝癌细胞生长、侵袭、转移的研究提供了可靠的量化研究手段。; 叶志强刘旭辉吴飞龙赵坤潘卫东; 关键词：活体成像活体示踪肿瘤转移

miR-214对人肝细胞癌增殖能力影响的体外实验研究被引量：1: 2014年; 目的探讨微小RNA(mi R)-214对肝细胞癌(肝癌)增殖能力的影响及其相关机制。方法应用终浓度50 nmol/L的mi R-214模拟物mimics及其阴性对照mimics分别转染MHCC97L肝癌细胞建立M214组、阴性对照组(NC214组),另设未转染对照组(Ctrl组)。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测3组肝癌细胞mi R-214含量。采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法检测细胞增殖抑制率,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法(Western blot)检测c-myc、Bax、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2蛋白表达。3组比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果 M214组MHCC97L细胞mi R-214的含量为Ctrl组的(2 536±7)倍,差异有统计学意义(LSD-t=58.75,P<0.05)。M214组24、48、72 h时细胞增殖抑制率分别为(15.33±0.62)%、(24.07±0.75)%和(41.02±0.91)%,与Ctrl组比较差异有统计学意义(LSD-t=14.64,19.87,31.86;P<0.05)。M214组细胞平板克隆形成数量(5.3±0.7)个/孔,明显低于Ctrl组的(37.1±1.0)个/孔(LSD-t=-12.51,P<0.05)。M214组细胞凋亡率(42.1±3.2)%明显高于Ctrl组的(7.0±0.7)%(LSD-t=35.66,P<0.05)。M214组c-myc、Bcl-2蛋白表达量降低,Bax蛋白表达量升高。结论mi R-214可能通过下调c-myc蛋白表达及Bcl-2/Bax比值抑制人肝癌细胞的增殖能力。; 郭明明蔡锐彬邹德志赵坤刘江辉; 关键词：肝细胞细胞增殖细胞凋亡

营养缺乏自噬因子1对骨肉瘤MG-63细胞侵袭转移能力的影响: 2015年; 目的：使用小干扰RNA（siRNA）干扰人骨肉瘤MG-63细胞中营养缺乏自噬因子1（NAF1）的表达，观察对NAF1基因的沉默效果，并测定沉默后MG-63细胞生长增殖侵袭能力的变化。方法建立小干扰RNA（NAF1-siRNA）组、阴性对照（NC-siRNA）组、未行处理空白对照组。采用细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力不同，采用Transwell法观察各组细胞侵袭能力变化，荧光素酶报告基因检测NF-κB信号通路的活性。结果与空白对照组相比，NAF1-siRNA干预MG-63细胞后，NAF1-siRNA组NAF1的mRNA和蛋白表达水平都明显降低（P〈0.01），MMP2蛋白表达水平降低，细胞迁移能力明显降低，NAF1-siRNA组穿过Transwell膜的细胞少于空白对照组，且NF-κB转录活性下降（P〈0.01）。结论通过siRNA技术降低NAF1表达可能通过抑制NF-κB通路，影响MMP2蛋白表达水平，抑制骨肉瘤MG-63细胞的迁移和侵袭能力。; 张瑾朱远航谢迭来赵坤华学锋; 关键词：骨肉瘤 RNA干扰

枕下经颈-颈静脉突入路切除颈静脉孔肿瘤的临床研究被引量：2: 2020年; 目的探讨枕下经颈-颈静脉突入路切除颈静脉孔区肿瘤手术的疗效及并发症处理。方法回顾性分析中山大学附属第一医院神经外科2015年4月—2019年5月,行枕下经颈-颈静脉突入路手术治疗的13例颈静脉孔区肿瘤患者的临床资料。主要分析影像学检查、手术效果、术后并发症及其处理和预后。结果本组患者中,11例患者达到肿瘤全切除,2例患者次全切除。术后,7例患者症状缓解;3例患者出现脑脊液漏;5例患者出现后组颅神经麻痹症状加重,其中3例患者行气管切开;1例患者发生脑梗死。结论枕下经颈-颈静脉突入路是切除颈静脉孔区肿瘤的有效术式。; 李西西何科君徐小平夏昕赵坤谢宝树杨佳杨李轩黄正松张弩; 关键词：远外侧入路

自噬与肝移植的研究进展被引量：6: 2015年; 自噬是真核细胞为应对外界变化,依赖溶酶体对包括衰老细胞器和胞内过期蛋白质等自身结构进行可控制性生物学降解的过程。自噬与肝移植缺血-再灌注损伤和术后免疫抑制剂的应用有着密切关系。本文就自噬在肝移植中的调控机制进行综述。; 赵坤叶小鸣; 关键词：自噬缺血-再灌注损伤肝移植 BECLIN-1

微RNA抑制人舌鳞状细胞癌迁移侵袭能力: 2014年; 目的研究微RNA-214（miR-214）对舌癌Tca8113细胞迁移侵袭等生物学行为的影响及其起效机制。方法建立Tca8113细胞miR-214模拟物（M）组、阴性对照模拟物（N）组及阴性对照（c）组。采用RT．PCR法检测各组miR-214水平，Westernblot法检测膜型基质金属蛋白酶1（MT1-MMP）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。采用CCK-8实验检测细胞生长抑制率。采用细胞划痕实验和Transwell实验检测抑制细胞侵袭转移的能力。结果与对照组相比，miR-214模拟物干预Tca8113细胞后，M组miR-214表达水平明显升高（P〈0．05），MT1-MMP、VEGF蛋白表达水平降低，细胞迁移侵袭能力明显降低（P〈0．05）。结论miR-214可能通过降低MT1-MMP、VEGF蛋白表达，抑制舌癌Tca8113细胞的迁移侵袭能力。; 张新华王庆亮赵坤; 关键词：舌肿瘤微RNAS

miR-214对人舌鳞状细胞癌增殖能力影响的体外实验研究被引量：3: 2014年; 目的研究microRNA-214（miR-214）对舌癌AW13516细胞增殖能力的影响及其相关机制.方法建立MIR（miR-214 mimics）组、NC（阴性转染）组及无转染对照（MOCK）组细胞.采用RT-PCR法检测各组miR-214水平;Western印迹法检测HM1、PCNA、cyclin D1的表达,采用MTT实验检测细胞增殖能力;采用软琼脂集落形成实验和平板克隆形成实验检测细胞形成克隆的能力;采用流式细胞术观察各组细胞凋亡比例变化.结果与阴性转染组和无转染对照组相比,miR-214 mimics干预AW13516细胞后,MIR组miR-214表达水平明显升高（P＜0.05）,PIMl、PCNA、cyclin D1蛋白表达水平降低,细胞增殖能力明显降低,克隆形成能力明显减弱,凋亡比例明显升高（P＜0.05）.结论 miR-214可能通过降低PIM1水平下调PCNA、cyclin D1蛋白表达,抑制舌癌AW13516细胞的增殖能力并促进其凋亡.; 张新华王庆亮赵坤; 关键词：舌鳞状细胞癌微小RNA 细胞增殖

2014年胆囊癌NCCN治疗指南解读与思考被引量：2: 2015年; 胆囊癌是发病率最高的胆道系统恶性肿瘤,好发于女性患者。与胆管癌相比,其恶性程度较高,复发时间较早,生存时间较短,预后较差。胆囊癌的治疗手段包括手术治疗、化疗、放疗、介入治疗和基因治疗等,其中手术治疗是对胆囊癌有明确疗效的治疗方法,化疗、放疗及其他治疗方法的方案及疗效仍需进一步研究。本文结合2014年美国国立综合癌症网络（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）胆囊癌指南及相关文献，对胆囊癌治疗方法的选择和疗效进行讨论，以供同道参考。; 赵坤叶小鸣; 关键词：胆囊肿瘤抗肿瘤联合化疗方案基因疗法

IL‑2和IFNγ蛋白共表达的真核表达体系及其制备方法和应用: 本发明提供一种IL‑2和IFNγ蛋白共表达的真核表达体系及其制备方法和应用，属于生物基因技术领域。本发明提供的真核表达体系同时包含IL‑2基因的核苷酸序列和IFNγ基因的核苷酸序列，采用载体来负载IL‑2基因和IFNγ基...; 郭宇匡铭彭穗王晶赵坤彭振伟; 文献传递

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