赵景壮
- 作品数：109 被引量：115H指数：7
- 供职机构：中国水产科学研究院黑龙江水产研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 鱼类传染性造血器官坏死病毒RT-LAMP检测方法的建立及应用被引量：7
- 2014年
- 将逆转录环介导的等温扩增技术(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)引入到鱼类的传染性造血器官坏死病病毒(infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV)检测中,建立了简单、快速、灵敏的IHNV检测方法。针对IHNV的聚合酶蛋白基因(polymerase protein,L)设计特异性引物,以IHNV基因组RNA为模板,在反转录酶和Bst DNA聚合酶的作用下进行RT-LAMP,反应产物添加SYBR Green I荧光染料后,肉眼观察阳性样本表现为荧光绿色,阴性样本表现为红棕色。2%琼脂糖凝胶电泳检测结果与可视化检测结果一致。该方法实现了检测结果的可视化。特异性分析显示该方法不与传染性胰脏坏死病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)及病毒性出血性败血症病毒(viral haemorrhagic septicaemia virus,VHSV)发生交叉反应,并且可检测不低于10 pfu的IHNV RNA。本研究所建立的IHNV RT-LAMP可视化检测方法具有灵敏度高、特异性好、成本低、不依赖任何专门的仪器设备的优点,其检测结果直观可视化,可实现现场高通量快速检测。
- 刘淼徐黎明卢彤岩赵景壮曹永生刘红柏尹家胜张金凤冯剑
- 关键词：RT-LAMP
- 鱼类传染性造血器官坏死病毒糖蛋白的酵母表面展示被引量：2
- 2016年
- 糖蛋白(glycoprotein,G)是鱼类传染性造血器官坏死病毒的主要表面抗原,是病毒检测及疫苗研制的主要靶基因。为了对其进行酵母表面展示,本研究利用本实验室保存的含有IHNV-Sn1203毒株G基因的质粒为模板,PCR扩增富含抗原表位的糖蛋白基因片段后,连接酵母表面展示载体p YD1,构建重组质粒p YD1-G。将p YD1-G转化酿酒酵母EBY100细胞后,利用半乳糖诱导G蛋白的表达。利用细胞免疫荧光、Western Blotting及流式细胞仪检测酵母表面G蛋白的表达情况。细胞免疫荧光结果显示,转化了p YD1-G重组质粒的酵母细胞表面呈现出特异性荧光;Western Blotting结果显示,经半乳糖诱导后G蛋白在酵母细胞表面获得了成功表达;流式细胞仪检测结果表明,随着半乳糖诱导时间的增加,G蛋白的表达量随之增加,并在诱导48 h时达到峰值。以上研究表明G蛋白在酵母细胞表面获得了成功表达,本研究为以酵母为活载体的新型口服疫苗的研制奠定了基础。
- 赵景壮徐黎明刘淼曹永生尹家胜刘红柏卢彤岩
- 关键词：糖蛋白真核表达酵母表面展示
- 一种细胞培养板
- 一种细胞培养板，涉及细胞培养装置，本实用新型为了解决现有细胞培养板制备的单层细胞在加入液体时容易被破坏，并且需要频繁更换枪头，否则极易导致细胞污染的问题，本实用新型包括细胞培养板，在细胞培养板的培养板孔内设置有加样台，加...
- 徐黎明赵景壮卢彤岩
- 文献传递
- 抗IPNV的海带提取物及其应用
- 本发明属于提取物领域，具体涉及抗IPNV海带提取物及其应用。本发明公开了海带提取物，所述海带提取物按照包括如下步骤的方法制备：1)海带粗提物的制备：包括去除海带浸提液中的蛋白质，得到海带粗提物；所述海带浸提液是对海带进行...
- 任广明徐黎明卢彤岩赵景壮邵轶智
- PARP抑制剂PJ34在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用
- 本发明公开了PARP抑制剂PJ34在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用。本发明提供了PARP抑制剂PJ34或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂PJ34或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在制备抗鱼类弹状...
- 赵景壮徐黎明卢彤岩任广明邵轶智
- 文献传递
- 成纤维细胞生长因子21在抵抗素引发胰岛素抵抗的肝细胞模型中的糖代谢调节作用被引量：3
- 2013年
- 抵抗素是2001年Steppan等发现的一种与胰岛素抵抗有密切联系的细胞因子.本研究探讨了成纤维细胞生长因子21(FGF-21)在抵抗素过表达导致胰岛素抵抗的肝细胞中的糖代谢调节作用.构建人抵抗素真核表达载体,转染HepG2细胞,利用流式细胞仪筛选出过表达抵抗素的HepG2模型细胞,分别用不同浓度的胰岛素和FGF-21刺激细胞,用GOD-POD法检测细胞的葡萄糖摄取情况,利用实时荧光定量PCR方法检测抵抗素转染后及FGF-21处理后细胞GLUT1、PPAR-γmRNA表达的变化.PCR鉴定结果表明过表达抵抗素的HepG2模型细胞构建成功.GOD-POD法检测结果证明,模型细胞对胰岛素敏感性降低,但FGF-21仍能有效调节模型细胞的葡萄糖摄取,且呈现剂量依赖关系.实时荧光定量PCR方法检测发现,抵抗素转染后HepG2细胞GLUT1 mRNA表达增加,经FGF-21刺激后模型细胞与对照细胞相比GLUT1 mRNA的表达仍有上升趋势,PPAR-γ的变化不显著.上述结果表明,抵抗素过表达的肝细胞,对胰岛素敏感性降低,产生胰岛素抵抗,但FGF-21仍能有效调节其葡萄糖代谢.
- 刘淼王文飞刘铭瑶赵景壮白银郭茉任桂萍李德山
- 关键词：抵抗素胰岛素抵抗HEPG2
- 重组虹鳟IFN-γ2的原核表达及抗IHNV活性分析被引量：4
- 2016年
- 为获得虹鳟IFN-γ2(rt IFN-γ2)抗传染性造血器官坏死病毒(IHNV)活性的相关数据,实验根据NCBI已发表序列设计引物,提取经植物血凝素刺激后的虹鳟头肾细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增471 bp的该基因完整开放阅读框。将该基因重组至原核表达载体p ET32a中,并转化大肠杆菌Rosetta,进行诱导表达,SDS-PAGE结果显示,目的蛋白以包涵体形式表达,大小约为38.4 ku。重组蛋白经复性、纯化后在CHSE-214细胞上进行抗IHNV活性分析,结果显示,rt IFN-γ2在CHSE-214细胞上抗IHNV活性为6.63×106U/mg。Real-time PCR结果显示,rt IFN-γ2免疫后,虹鳟头肾、脾、肝中IRF-1、IRF-2、IFN-I、IFN-γ和Mx表达水平均显著提高,总体而言免疫后2天机体抗病毒状态弱于免疫后1天。攻毒保护实验结果显示,免疫后1天进行IHNV攻击时,鱼死亡率为40%,而免疫后2天进行IHNV攻击时,鱼死亡率达到80%。研究表明,原核表达系统制备的重组虹鳟IFN-γ2不仅具有体外抗IHNV活性,更能激发虹鳟的抗病毒状态,从而为虹鳟抵抗IHNV感染提供一定的保护力。
- 曹永生徐黎明赵景壮刘淼张奇亚卢彤岩
- 关键词：原核表达
- 虹鳟IFN-γ2在制备抗IHN病毒产品中的应用
- 本发明公开了虹鳟IFN-γ2在制备抗IHNV病毒产品中的应用。本发明提供了rtIFN-γ2蛋白或其编码基因或含有其编码基因的重组载体在制备抑制传染性造血器官坏死病病毒产品中的应用；所述rtIFN-γ2蛋白的氨基酸序列为序...
- 曹永生徐黎明赵景壮卢彤岩
- 文献传递
- 一种用于虹鳟鱼疫苗评价的攻毒方法
- 本发明涉及一种用于虹鳟鱼疫苗评价的攻毒方法，属于水产品攻毒方法技术领域。为解决现有虹鳟鱼疫苗评价攻毒方法操作不便、攻毒效果平行性差的问题，本发明提供了一种用于虹鳟鱼疫苗评价的攻毒方法，将试验用虹鳟鱼麻醉后，将其置于攻毒实...
- 曹永生韩世成李绍戊卢彤岩王荻徐黎明赵景壮
- 文献传递
- 一种五味子多糖提取物及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种五味子多糖提取物及其制备方法和应用。本发明提供了一种五味子提取物的制备方法，依次包括如下步骤：(a1)取五味子，进行水提，收集液相；所述水提前进行超声预处理；(a2)去除蛋白质和小分子杂质，进行醇沉，得到...
- 任广明徐黎明赵景壮卢彤岩尹家胜
- 文献传递
