邓云
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 一个新的睾丸特异表达基因的克隆及功能的初步分析(英文)
- 2005年
- 运用'数据库消减杂交'(digital differential display )方法来筛选人类睾丸特异表达新基因,获得了有差异显示的代表新基因的克隆重叠群.挑选其中一个克隆重叠群HS.326528进行多组织RT-PCR,初步获得该重叠群在人睾丸中有高表达.从该重叠群的IMAGE出发,采用生物信息学的方法快速克隆了一个人类新基因的全长cDNA序列,其全长1 044 bp,开放阅读框为214～529 bp,定位于15q26.2,编码由105个氨基酸组成、分子量为11.7 kD、等电点为10.09的一个碱性蛋白,该蛋白与已知蛋白无明显的同源性,克隆实验证明该基因的阅读框完全正确,RT-PCR和Northern blot显示该基因在人类睾丸中特异表达,实时PCR结果表明:该基因在成人睾丸中高表达,在精子中有中度表达,在胚胎睾丸中低表达,推测该基因与精子的生成有关,命名为SRG8(homo sapiens spermatogenesis -related gene 8)(GenBank登录号:AY489187),该基因编码的蛋白定位于细胞核.流式结果分析表明,SRG8基因能够促使HeLa细胞由S期向G2期的转变,从而加速细胞的分裂.这些结果表明SRG8基因可能在睾丸的发育及精子的形成过程中起重要的作用.
- 聂东宋朱文兵向阳王建谭小军邓云卢光琇
- 关键词：睾丸实时定量PCR组织特异表达
- 人类睾丸凋亡相关基因蛋白(TSARG2)在大肠杆菌中的表达和纯化
- 2006年
- 目的获得重组TsARG2基因蛋白,为进一步研究其功能和制备特异抗体奠定基础.方法根据已报道的TsARG2基因序列,采用RT-PCR的方法获得TsARG2基因.将所得的PCR产物插入原核表达载体pQE30中,得重组质粒(pQE/TSARG2)并转化大肠杆菌(E.coli)M15,通过IPTG诱导表达出带有六个组氨酸的融合蛋白,采用镍固定金属亲和层析法纯化.结果序列分析表明TSARG2基因成熟肽编码区含有918bp,编码305个氨基酸;与GenBank(AY040204)中已报道的TSARG2分离物的核苷酸序列有100%同源性.经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析显示,表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的66%,分子质量约为35kDa.经Ni2+-NTAagarose纯化获得SDS-PAGE电泳下单一条带.结论在大肠杆菌中获得了TsARG2基因蛋白的高效表达,为研究其生物学功能和制备单克隆抗体奠定了基础.
- 邓云聂东宋卢光琇
- 关键词：大肠杆菌
- 小鼠睾丸凋亡基因MSRG-11的人类同源基因SPATA17的克隆(英文)
- 2006年
- 利用生物信息学方法结合实验手段克隆了一个在睾丸组织中特异高表达的小鼠生精细胞凋亡相关基因Spata17的人类同源基因SPATA17(GenBank登录号为AY963797)。应用生物信息学分析显示该基因定位在染色体1 q41,包含11个外显子,内含子和外显子交界区均符合gt-ag规则;该基因开放阅读框为1083 bp编码一个由361个氨基酸组成的、分子量为43.49 kD、等电点为9.71、含有三个保守IQ功能域的蛋白;对SPATA17编码蛋白质进行生物信息学分析,无跨膜区,无信号肽序列,推测为一非分泌性蛋白。多组织和Northern b lot结果显示该基因只在睾丸组织中特异高表达,转录本大小为2.0 kb。总之,研究表明SPATA17在睾丸组织生精细胞凋亡起重要作用。
- 邓云王建胡亮杉卢光琇
- 关键词：生物信息学凋亡精子发生
- 小鼠睾丸生精细胞凋亡新基因MSRG-11及人类同源基因SPATA17的克隆及初步功能研究
- 本课题运用了“数据库消减杂交”(DigitalDifferentialDisplay，DDD)策略;结合实验手段成功地克隆到一个在小鼠睾丸中高表达的生精细胞凋亡特异的新基因MSRG-11，并对该基因的功能进行了初步研究;...
- 邓云
- 关键词：基因克隆睾丸生物信息学生精细胞凋亡
- 文献传递
