郭雁
- 作品数：4 被引量：34H指数：3
- 供职机构：北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- RGDS-尿激酶原嵌合体的构建与表达被引量：17
- 1999年
- 利用定点突变及ＤＮＡ重组技术，构建了在尿激酶原Ｋ区Ｃ端的β发夹区插入了精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸－丝氨酸〔ＲＧＤＳ〕片段的尿激酶原嵌合体基因，并利用昆虫杆状病毒表达系统通过感染Ｓｆ９细胞对野生型及嵌合体尿激酶原进行了高效表达，表达量分别为１２００～１８００ＩＵ／（１０６细胞·ｍｌ）和１８００～２４００ＩＵ／（１０６细胞·ｍｌ）．经过ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ离子交换层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶过滤层析及超滤浓缩对野生型及突变型进行了部分纯化，并对其性质进行了初步研究．表明突变体尿激酶原保留了全部尿激酶原的纤溶酶原激活活性，并具有很强的抗血小板聚集活性．
- 孙迎庆郭雁李令媛茹炳根
- 关键词：尿激酶原昆虫杆状病毒激活剂
- 昆虫细胞Sf9悬浮培养表达尿激酶原(pro-UK)
- 1998年
- 研究了悬浮培养昆虫细胞 Sf9时感染指数 (MOI)、感染时间和培养基营养状况对重组蛋白激酶原 (pro- UK)表达的影响。发现在转瓶培养中采用 MOI3、感染对数中期细胞所产生的重组蛋白的量最高 ,酶活可达 42 0 U/ml。在反应器中采用同样感染条件 ,重组蛋白的表达量可达530 U/ml。在转瓶培养中采取感染后换液处理 ,重组蛋白的表达可提高至 61 0
- 常韶华孙洪亮郭雁李佐虎
- 关键词：昆虫细胞杆状病毒尿激酶原
- 含RGD的配基与其受体相互作用研究进展被引量：15
- 1997年
- RGD配基与其受体相互作用目前已成为一个研究热点 ,许多粘附蛋白是通过RGD序列与其整合素结合的 ,它参与许多生物学过程 .文章主要就RGD序列肽与糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的相互作用及其在抑制血小板聚集上进行了较为全面的综述 。
- 孙迎庆郭雁茹炳根
- 关键词：粘附蛋白RGD配基受体
- 尿激酶原-RGDS双功能分子——构建、表达及性质研究被引量：6
- 1999年
- 利用定点突变及DNA重组技术 ,构建了在尿激酶原K区C 端的β 发夹区插入了精氨酸 甘氨酸 天冬氨酸 丝氨酸 (RGDS)片段的尿激酶原嵌合体基因 ,并利用昆虫杆状病毒表达系统通过感染Sf9细胞对嵌合体尿激酶原进行了高效表达 .用尿激酶原单抗亲和柱纯化表达产物 ,获得初步纯化的嵌合体蛋白 .对嵌合体蛋白进行血小板膜结合实验表明 ,此嵌合体具有依赖于钙离子的结合活化血小板膜的活性 .用生色底物Chromozym U测定嵌合体的酰胺解活性 ,结果显示 ,纤溶酶激活后的嵌合体比活为 62 0 0 0IU/mg,与文献报道的纤溶酶激活的尿激酶原比活 65 3 5 5IU/mg相近 .纤溶酶激活后的嵌合体激活纤溶酶原的反应符合米氏方程 ,其Km 值为 0 .97μmol/L ,与天然尿激酶的Km 值 1.64μmol/L相近 .嵌合体还显示了较强的体外抑制血小板聚集活性 .这些结果表明 ,此尿激酶原 RGDS嵌合体有可能成为一种新的双功能溶栓药物 .
- 钱斌孙迎庆郭雁党昕茹炳根
- 关键词：尿激酶原心血管疾病溶栓药物
