金丽
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国人民解放军93163部队更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人PTEN基因表达载体的构建及其在U251细胞株中的表达
- 2005年
- 目的:克隆人野生型和突变型PTEN的cDNA,并构建其表达载体,探讨其表达质粒在人胶质瘤U251细胞中的表达情况。方法:分别从新鲜胎盘组织和结肠癌组织中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增人野生型和突变型PTEN基因全长cDNA,分别克隆入pMD18-T载体上,经PCR、酶切鉴定均为阳性的克隆,进行核苷酸序列分析,再分别将两段基因定向克隆入pcDNA3.1(+)载体中构建表达载体。结果:反转录PCR扩增后的产物,在约1.4kb处出现明亮的特异性条带,pcDNA-PTEN-WT细胞的生长曲线生长速度较另3种细胞明显减慢。结论:转染入U251细胞,发现突变型PTEN蛋白对细胞生长无明显抑制作用,而野生型PTEN蛋白对细胞生长有明显抑制作用。
- 徐寿水徐冬梅赵文阁金丽
- 关键词：基因克隆抑癌基因PTEN
