陈宁
- 作品数：34 被引量：128H指数：6
- 供职机构：天津医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市科技发展战略研究计划项目教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 抗人TSBAb单克隆抗体的制备、纯化及临床应用
- 陈宁
- 关键词：单克隆抗体酶联免疫吸附测定
- 病理生理教学中若干问题的实验探讨
- 2010年
- 目的明确病理生理学实验教学中的若干问题,使实验设计和解释更为合理。方法①通过输入蒸馏水和任氏液配制的不同浓度的白蛋白溶液,观察对蟾蜍下肢水肿标本重量及外观变化的影响。②在大量静脉输入生理盐水的基础上,分别加输0.15-0.45mg/kg的肾上腺素,观察家兔的血压、心率、肺系数和病理改变等指标的变化。结果①输入蒸馏水配制的接近生理浓度的白蛋白溶液,标本重量继续增加、外观肿胀;任氏液配制的相同浓度白蛋白溶液则使标本重量减轻、外观皱缩。②在加用肾上腺素促进肺水肿的过程中,家兔血压呈现先升高后下降及心率减慢的现象。结论①血浆胶体渗透压虽在血管内外液体交换中起重要作用,但需要有一定的晶体渗透压作为前提条件。②使用0.15-0.45mg/kg剂量的肾上腺素复制家兔肺水肿动物模型的主要机制在于其使皮肤、内脏的血液分布到肺脏,加重肺淤血。
- 陈宁叶静刘欣邸红军沈炳玲
- 关键词：水肿血浆胶体渗透压肺水肿肾上腺素
- 实时定量RT-PCR方法检测豚鼠TSHR免疫BALB/c小鼠甲状腺TSHR的表达被引量：1
- 2005年
- 目的:建立外标准法SYBRGREENI实时定量(real-time)RT-PCR方法,以检测豚鼠TSHR分子免疫对BALB/c小鼠甲状腺TSHRmRNA的表达的影响。方法:取正常BALB/c小鼠甲状腺提取甲状腺总RNA,逆转录后进行PCR,得到333bp扩增产物。经回收纯化后作为real-timePCR的标准品,稀释为106、105、104、103、102、101拷贝,制作标准曲线;并同时进行普通PCR,比较其灵敏度。优化反应条件使溶解曲线有特异扩增。检测豚鼠TSHR分子免疫的BALB/c小鼠甲状腺TSHRmRNA的表达。结果:建立的外标准法SYBRGREENI实时定量RT-PCR方法可以灵敏的检测到10copy的核酸,灵敏度为普通PCR的104倍;溶解曲线只有特异峰,溶解温度为82.9℃。没有明显的引物二聚体和非特异峰出现。不同标准点批间变异系数范围为5.8%￣14.3%(n=6)。与对照组比较,TSHR大分子免疫的BALB/c小鼠甲状腺组织TSHRmRNA水平显著升高(P<0.05)。结论:外标准法SYBRGREENI实时定量RT-PCR具有灵敏度高,特异性强,重复性好的特点,比普通PCR更精确地检测出小鼠甲状腺组织TSHRmRNA的水平。
- 朱云娟黄丽娟陈宁沈炳玲陆凤先
- 关键词：TSHRMRNASYBR
- 反义肽核酸对促甲状腺激素受体mRNA表达的影响
- 2012年
- 目的探讨反义肽核酸（asPNA）对大鼠甲状腺细胞的细胞膜表面促甲状腺激素受体（TSHR）表达的影响。方法设计两种与TSHRmRNA不同片段互补的asPNA，分别为核定位信号-asPNA1（NLS—asPNA1）和NLS．asPNA2，另外合成一段非相关的干扰肽核酸（NLS—scrPNA）序列，用荧光显微镜观察NLS—asPNA能否进入细胞，采用噻唑蓝法检测asPNA对细胞是否具有毒性作用，然后用实时定量RT—PCR检测NLS—asPNA对TSHRmRNA表达的影响。结果荧光显微镜观察发现，asPNA可以进入到细胞中去。噻唑蓝法检测发现asPNA对细胞没有毒性作用。实时定量RT—PCR结果显示，NLS—asPNA1和NLS—asPNA2可以抑制TSHRmRNA表达，表现为随着NLS—asPNA与细胞培养时间的延长，TSHRcDNA的拷贝数逐渐下降，且呈现时间依赖性，而NLS．scrPNA对TSHRtuRNA的表达没有明显的影响。结论NLS—asPNA可以进入到细胞中去，并且能够下调TSHRmRNA的表达。
- 黄丽娟陈宁叶静沈炳玲朱云娟孟涛张志洋朱学良
- 关键词：受体促甲状腺素RNA信使
- 肺炎衣原体感染通过PI3K通路诱导血管内皮细胞迁移被引量：4
- 2010年
- 目的:研究肺炎衣原体感染对血管内皮细胞迁移的影响及其相关分子机制。方法:创伤修复实验与Transwell实验观察肺炎衣原体感染的血管内皮细胞迁移情况,RT-PCR与ELISA法分别检测PI3K mRNA表达与酶活性。结果:肺炎衣原体感染以时间依赖方式明显促进人内皮细胞素ECV304细胞迁移,且可以显著增强PI3K mRNA表达与酶活性;PI3K特异性抑制剂LY294002可有效抑制肺炎衣原体感染引起的上述变化。结论:肺炎衣原体感染可诱导血管内皮细胞迁移,其机制可能与激活PI3K信号转导通路有关。
- 权伟张利军陈宁沈炳玲叶静王蓓蓓刘欣张丽莙
- 关键词：肺炎衣原体血管内皮细胞迁移血管新生磷酸肌醇3-激酶
- 共有序列寡核苷酸竞争结合NF-κB以减少TNF产生的实验研究被引量：29
- 2003年
- 目的 :了解使用含核因子 -κB(NF -κB)结合位点序列的共有序列寡核苷酸在胞浆内与NF -κB结合 ,以减少LPS刺激TNF产生的效果。方法 :直接将经硫代磷酸修饰的寡核苷酸导入大鼠腹腔巨噬细胞 ,以减少细胞分泌产生肿瘤坏死因子 (TNF)的效果作为判断指标 ,以ELISA法检测细胞培养上清液中的TNF -α含量。结果 :加入具有NF -κB结合位点序列的共有序列寡核苷酸 ,可明显减少巨噬细胞受LPS刺激后所产生的TNF -α。结论 :结果提示 ,具有NF -κB结合位点的共有序列寡核苷酸的使用 ,可在内毒素脂多糖 (LPS)致病过程的中心环节上阻止或减轻LPS诱导的TNF
- 陈宁叶静汤特朱学良
- 关键词：多器官功能衰竭寡核苷酸
- TSBAb-ELISA法的建立与临床初步应用被引量：3
- 1999年
- 利用杂交瘤技术制备了抗人甲状腺刺激阻断抗体（ｔｈｙｒｏｉｄ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｂｌｏｃｋｉｎｇａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＴＳＢＡｂ）单克隆抗体。两株单抗均为ＩｇＧ１，识别同一抗原表位。与甲状腺球蛋白（ｔｈｙｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎ，ＴＧ）、甲状腺过氧化酶（ｔｈｙｒｏｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＴＰＯ）无交叉反应，与促甲状腺激素受体抗体（ｔｈｙｒｏｔｒｏｐｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＴＲＡｂ）、甲状腺刺激抗体（ｔｈｙｒｏｉｄｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＴＳＡｂ）有部分交叉反应。用间接ＥＬＩＳＡ法检测甲减患者血清ＴＳＢＡｂ水平，表明该法有一定特异性、灵敏、稳定、简便。利用抗人ＴＳＢＡｂ单抗和ＥＬＩＳＡ技术，可为临床检测ＴＳＢＡｂ和探讨自身免疫性甲状腺机能低下的发病机理提供一种新的手段。
- 陈宁汤特张天庚叶静叶静叶静
- 关键词：甲状腺刺激ELISA甲状腺功能减退
- 肾上腺素在家兔实验性肺水肿形成过程中的作用被引量：2
- 2008年
- 目的：探索复制家兔实验性肺水肿动物模型的肾上腺素的合适用量,明确其在肺水肿形成过程中的作用。方法：实验组动物在大量静脉输入生理盐水的基础上,分别加输0.15-0.45mg/kg的肾上腺素,观察动物血压、呼吸状况、血气分析、肺系数和病理改变等指标的变化。结果：实验组动物均发生不同程度的肺水肿。实验过程中动物呈现血压先升高后下降及心率减慢的现象,并出现呼吸抑制、缺氧和呼吸性酸中毒的表现。结论：所用剂量肾上腺素导致家兔肺水肿主要机制在于其使皮肤、内脏的血液分布到肺脏,进一步增加肺毛细血管内压,促进肺水肿的形成。
- 陈宁叶静刘欣邸红军沈炳玲
- 关键词：肺水肿肾上腺素
- 双侧肾动脉不全结扎法建立肾前性急性肾衰动物模型被引量：3
- 2011年
- 目的:探索建立肾前性急性肾衰动物模型的方法。方法:将家兔双侧肾动脉分别与直径为0.90 mm的渔线一并结扎,造成肾动脉狭窄、肾血流量减少的病理状态。20 min后剪断结扎线恢复肾动脉血流。分别于肾动脉结扎前、结扎后及恢复血流后1 h内多个时段检测尿量、血清肌酐、电解质,并行血气分析和肾脏病理检查。结果:(1)肾动脉不全结扎后动物尿量明显减少,血清肌酐(Cr)水平显著升高,血清钾水平升高,动脉血pH值、碳酸氢盐(HCO3-)和动脉血二氧化碳分压(PaCO2)下降,剩余碱(BE)负值增加。(2)恢复血流后1 h内,尿量逐步增加,血清肌酐逐步恢复至正常水平,血清钾、钠、氯水平均呈下降趋势,但血气分析继续呈代谢性酸中毒变化。(3)肾脏病理检查缺血20 min、缺血20 min-恢复60 min和缺血20 min-恢复5 h的肾小球、肾间质小管无明显病理变化。结论:双侧肾动脉不全结扎法建立的动物模型具有肾前性(功能性)急性肾功能衰竭的特征,可以作为肾前性急性肾功能衰竭的动物模型。
- 李卓然黄迪盛旦赵娟叶静陈宁
- 关键词：急性肾功能衰竭动物模型家兔
- 探讨蟾蜍下肢水肿教学实验设计的改进被引量：1
- 2008年
- 目的:探索改进水肿教学实验的设计。方法:在输入任氏液复制出蟾蜍下肢水肿的基础上,两组实验标本分别继续输入蒸馏水和任氏液配制的不同浓度的牛血清白蛋白(BSA)溶液;观察标本重量及外观的变化,并与输入20%葡萄糖的对照组进行比较。结果:三组标本输入任氏液后重量均增加;继续输入蒸馏水配制的BSA溶液的标本,重量继续增加;而继续输入任氏液配制的BSA溶液的标本,重量呈减轻的变化;标本外观的变化表现为水肿的蟾蜍下肢标本肿胀,皮肤发白发亮,出现脱水的蟾蜍下肢标本出现皱缩,与对照组相同。结论:输入任氏液配制的BSA溶液可以获得与输入20%葡萄糖溶液相同的脱水效果,实验设计更趋合理。
- 叶静邸红军沈炳玲刘欣陈宁
- 关键词：水肿血浆胶体渗透压
