马百成
- 作品数：19 被引量：37H指数：4
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- 发文基金：国家高技术研究发展计划天津市卫生局科技基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 双功能促胰岛素水蛭素(5rolGLP-HV)的构建及功能分析
- 2014年
- 采用分子克隆方法获得5拷贝口服长效促胰岛素多肽(rolGLP-1)和水蛭素(rHV)融合基因促胰岛素水蛭素(5rolGLP-HV),并将该基因克隆至pET22b(+)表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),实现了高效表达.表达产物经SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定后用Ni-NTA亲和层析柱纯化,得到高纯度的5rolGLP-HV.用STZ诱导Ⅱ型糖尿病小鼠和血栓模型鼠进行药物功能分析,结果表明,5rolGLP-HV有较好的降糖和抗血栓效果.
- 张耀方马百成屠培培李宠马志华姬艳丽董震马超郝军凤李晓丹王宇李明刚
- 关键词：血栓纯化功能分析
- 优化型十拷贝rolGLP-1在大肠杆菌中的高效表达及其应用研究
- 目前，全球糖尿病患者有近3亿，随着人们生活节奏和生活方式的变化，糖尿病正在逐渐蔓延且发病人群向年轻化发展，糖尿病已成为威胁人类健康的重要慢性流行疾病，目前市场急需标本兼治的糖尿病治疗药物。 促胰岛素(Incretin)...
- 马百成
- 关键词：大肠杆菌
- 酵母整合型载体的构建及其功能分析被引量：7
- 2008年
- 选取酿酒酵母基因组rDNA序列中25S和5S rDNA之间的一段约2.2 kb序列作为整合栽体同源重组到酿酒酵母基因组中的靶位点,PCR扩增得到该段序列左右2段大小分别为865 bp和1 350 bp的片段,将其与URA3、磷酸丙糖异构酶启动子和终止子序列依次克隆入pUC18中,构建成整合型栽体pNK。以绿色荧光蛋白基因为报告基因,荧光显微镜下观察到酿酒酵母菌株INVSc1转化子发出较强荧光,Southem杂交产生目的条带,这些结果表明载体pNK具有整合并表达外源基因功能。通过对转化子连续培养证明构建的整合型栽体的稳定性较高。
- 武志强贾耐兵李娜王瑞菊马百成王翠艳李明刚
- 关键词：酿酒酵母RDNA磷酸丙糖异构酶绿色荧光蛋白
- 长效促胰岛素降糖酵母的构建及其对糖尿病模型小鼠的治疗效果被引量：6
- 2015年
- 益生菌生物药物是指通过口服表达药用多肽(蛋白)的重组益生菌活细胞达到治疗疾病的新型口服给药系统。为了构建一种能有效防治2型糖尿病的酵母生物药物,文章首先构建了酿酒酵母(S.cerevisiae)整合型表达载体p NK1-PGK,并且通过绿色荧光蛋白(GFP)证明其表达功能正常,利用该载体将10?GLP-1(Glucagon-like peptide-1)基因转化到酿酒酵母INVSc1中,通过营养缺陷型和Western blotting成功筛选出表达10?GLP-1的长效促胰岛素降糖酵母(Long-acting GLP-1 hypoglycemic yeast,LHY)。该酵母生长迅速,外源基因10?GLP-1表达稳定,表达量达到1.56 mg/g细胞湿重。通过链脲佐菌素和高脂高糖饮食联合诱导的方法构建了2型糖尿病小鼠模型,用LHY对其进行口服灌胃治疗,证明LHY具有较好疗效,明显降低血糖水平。
- 吴日马超李晓丹段会坤姬艳丽王宇姜苹哲王海松屠培培李淼尼钢钢马百成李明刚
- 关键词：重组酿酒酵母糖尿病小鼠模型
- RNA恒温扩增技术在快速检测儿童肺泡灌洗液中肺炎支原体的研究
- 林书祥马百成王维郭伟徐勇胜
- 儿童肺泡灌洗液中肺炎支原体RNA恒温扩增技术检测及临床应用被引量：18
- 2018年
- 目的通过采用RNA恒温扩增（SAT）技术，对肺炎患儿的肺泡灌洗液标本进行检测，并结合体外培养实验，评估该技术检测活菌的能力，为SAT技术在肺炎支原体（MP）肺炎诊疗中的应用提供理论支持。方法收集天津市儿童医院2015年10月至2017年12月临床确诊为社区获得性肺炎的572例患儿的肺泡灌洗液，利用MP核酸定量和SAT技术检测MP感染情况，并对161份肺泡灌洗液进行分离培养，培养阳性菌液中持续加入高浓度抗生素，同时进行MP核酸定量和SAT技术检测。结果MP核酸定量和SAT技术的MP阳性检出率分别为74.7%（427/572）和71.9%（411/572），两种检测方法具有很高的一致性（χ2＝1.142，P＝0.285）。根据SAT技术的检测结果，572例肺炎患儿中男性患儿阳性率为72.7%（224/308），女性患儿阳性率为70.8%（187/264），不同性别患儿阳性率差异无统计学意义（χ2＝0.252，P＝0.616）。不同年龄患儿MP检出阳性率不同，婴幼儿（≤3岁）阳性率为56.6%（94/166），学龄前期和学龄期儿童（4～14岁）阳性率为78.1%（317/406），学龄前期和学龄期儿童的阳性率明显高于婴幼儿，差异有统计学意义（χ2＝26.811，P＝0.000）。通过SAT技术检测活菌的能力的实验发现，MP阳性培养液中连续5 d加入5 MIC阿奇霉素后，MP核酸定量检测阳性，SAT技术检测则为阴性。结论SAT技术具有高灵敏度和高特异性，并且可以鉴别＂死菌＂＂活菌＂，可以快速准确检测MP感染情况，并能有效评估临床治疗效果。
- 林书祥马百成王维王朝郭伟徐勇胜
- 关键词：肺炎支原体支气管肺泡灌洗液核酸扩增技术微生物敏感性试验
- 利用RNA恒温扩增技术快速检测儿童肺泡灌洗液中肺炎支原体
- 目的 采用RNA恒温扩增(SAT)技术，对肺炎患儿的肺泡灌洗液标本进行检测，并结合体外培养实验，评估该技术检测活菌的能力，为利用SAT技术评估在肺炎支原体(MP)肺炎诊疗中的应用价值和临床治疗效果提供理论支持。方法 收集...
- 林书祥马百成王维郭伟徐勇胜
- 十拷贝串联重复laGLP-1基因植物表达载体的构建及对黄瓜遗传转化的研究被引量：1
- 2009年
- 天然胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)是含有30个氨基酸的短肽激素,对2型糖尿病具有特殊疗效.以本实验室克隆的长效GLP-1(long acting GLP-1,la-GLP-1)基因为基础,构建了十拷贝串联重复laGLP-1的无抗生素选择标记的植物表达载体pX6-laGLP-1,采用农杆菌介导法对黄瓜自交系2 M1进行转化,通过PCR及Southern杂交检测分析,最后获得了4株稳定整合十拷贝串联重复laGLP-1的转基因植株.该遗传体系的建立为研发糖尿病食疗型转基因植物或用其生产治疗糖尿病的口服药物奠定了基础.
- 赵磊廖芳王翠艳陈苗魏爱民杜胜利马百成胡晓宇武志强王瑞菊李明刚
- 关键词：糖尿病黄瓜农杆菌介导法
- 一种rolGLP-HV工程菌的构建方法及应用技术
- 本发明涉及一种生产治疗糖尿病及血栓并发症的双功能药物(rolGLP-HV)工程菌的构建、制备方法和应用技术。将对2型糖尿病具有“治标治本”疗效的长效促胰岛素rolGLP-1与有效防治其心脑血管并发症的水蛭素rHV<Sub...
- 李明刚卫一鸣王维婧马百成胡晓宇张耀方乔坤艳李宠马志华
- 文献传递
- 实验性2型糖尿病小鼠肝脏组蛋白H3表观修饰的变化及其意义
- 2015年
- 目的:研究肝脏组蛋白H3表观修饰的变化在2型糖尿病小鼠发病过程中的作用,探讨其临床意义。方法:30只C57BL/6J小鼠分为正常组、高脂高糖组和糖尿病组,正常组和高脂高糖组小鼠分别给予正常饲料和高脂高糖饲料,糖尿病模型采用高脂高糖饲料联合注射链脲佐菌素(STZ)方法构建。采用HE染色、免疫印迹法、实时定量PCR和ChIP技术分别检测小鼠肝脏病理学变化、肝脏中总组蛋白H3的修饰状况及与糖代谢相关基因丙酮酸激酶(Pklr)、葡萄糖转运蛋白2(Glut2)、葡糖糖激酶(Gck)、过氧化物酶体增生物激活受体γ辅助活化因子1(Ppargc1a)和胰岛素受体(Insr)的表达水平和基因启动子区组蛋白的修饰变化。结果:糖尿病组小鼠肝脏病理学(HE染色)和组蛋白修饰模式均发生了明显变化。与正常组比较,高脂高糖组小鼠H3K23的乙酰化下降(P<0.01),H3K9Ac和H3K9Me2修饰水平上调(P<0.01),H3K4Me保持不变(P>0.05),糖代谢相关基因Pklr、Glut2和Gck的表达水平升高(P<0.01);糖尿病组小鼠H3K23Ac和H3K9Ac修饰水平下降(P<0.05或P<0.01),H3K9Me2和H3K4Me的修饰水平升高(P<0.01),糖代谢相关基因Pklr、Glut2、Gck、Ppargc1a和Insr表达水平明显下调(P<0.05或P<0.01)。Pklr、Glut2启动子区H3K23Ac、H3K9Ac、H3K9Me2和H3K4Me修饰水平变化与基因的表达水平变化相吻合。结论:肝脏组蛋白表观修饰变化可能参与了2型糖尿病的发生发展。
- 屠培培李晓丹马百成张耀方段会坤尼再中王海松姜苹哲李淼吴日李明刚
- 关键词：表观遗传学组蛋白H3丙酮酸激酶葡萄糖转运蛋白2
