李明刚
- 作品数：56 被引量：237H指数：9
- 供职机构：南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一个新的葡萄糖淀粉酶基因在大肠杆菌中的分泌表达被引量：2
- 2007年
- 从天然的少根根霉的基因组中,克隆出一个新的葡萄糖淀粉酶基因。对其进行分子进化的研究,在大肠杆菌中表达,从而给实验带来很大方便。设计引物将其(Gene Bank登录号:DQ903853)克隆到pET-22b(+)载体上,转化大肠杆菌BL-21(DE3)表达。检测培养液的上清有较高的葡萄糖淀粉酶活性,在淀粉板上有明显的晕圈显现。
- 杨立泉马春晓戴晓军侯建华孙官日于晓菊丁东风李明刚
- 关键词：大肠杆菌分泌表达葡萄糖淀粉酶少根根霉
- Floral dip法在大豆遗传转化中的应用研究被引量：10
- 2010年
- 首次运用floral dip法将植酸酶基因转化大豆品种冀豆12,获得遗传转化率1.18%～2.22%,证明该方法亦可用于大豆的遗传转化;研究了表面活性剂silwet L-77的浓度、转化液中农杆菌的浓度、不同农杆菌菌株对floral dip法大豆遗传转化的影响,结果表明采用EHA105菌株、菌浓度为OD_(600)=2.0、silwet L-77的浓度为0.05%条件下转化率最高。floral dip法在大豆遗传转化上的成功应用为扩展该方法的应用领域、简便有效地提高大豆的遗传转化效率奠定了一定基础。
- 王翠艳丁东风于晓菊阎瑞香廖芳赵磊陈苗李伟东乔坤艳刘菁李明刚
- 关键词：FLORALDIP大豆植酸酶基因
- 一种高产促胰岛素激素的毕赤酵母工程菌及其构建方法
- 本发明公开了一种高产促胰岛素激素毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌及其构建方法。本发明运用分子生物学技术先构建毕赤酵母(P.pastoris)表达载体pPIC9GLP－1，然后将其线性化后转化进入毕赤酵母G...
- 李明刚侯建华方园园薄涛王翠艳杨少辉武志强闫瑞香
- 文献传递
- 植酸酶基因表达与调控机制研究(Ⅰ)——发芽过程中植酸酶动态与贮藏态磷动员被引量：1
- 1998年
- 分析了玉米和番茄种子发芽过程中植酸酶活性的动态变化与无机磷酸释放量的关系．结果表明，植酸酶活性变化与贮藏态磷释放量密切正相关，这种贮藏态营养的再动员对种子萌发和幼苗生长具有重要意义．
- 刘迅龚雪琴李明刚
- 关键词：植酸酶发芽
- 一种高产促胰岛素激素的毕赤酵母工程菌及其构建方法
- 本发明公开了一种高产促胰岛素激素毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌及其构建方法。本发明运用分子生物学技术先构建毕赤酵母(P.pastoris)表达载体pPIC9GLP-1，然后将其线性化后转化进入毕赤酵母G...
- 李明刚侯建华方园园薄涛王翠艳杨少辉武志强闫瑞香
- 文献传递
- 拟南芥黑芥子酶基因根特异性表达启动子的克隆被引量：12
- 2005年
- 黑芥子酶是一类催化芥子油苷水解的同工酶, pyk10 是一个在拟南芥根和下胚轴中特异表达的黑芥子酶基因。本研究用PCR方法从拟南芥Columbia生态型基因组中克隆了pyk10 基因启动子片段。序列分析表明:该片段全长1 454 bp,与已发表的pyk10 启动子序列(GenBank accession no. AJ292756)同源性达98%。该启动子片段中含有多种其他植物基因启动子中发现的通用启动子元件,并含有器官和组织特异性转录因子的结合位点ACGT-、CANNTG-、GATA-以及I盒等顺式元件。
- 李桂兰王文颇臧少先乔亚科杨少辉薄涛李明刚
- 关键词：拟南芥启动子
- 植酸酶分泌型酵母工程菌的构建(英文)被引量：4
- 2002年
- 通过逆转录 PCR从无花果曲霉总 RNA中扩增出 1 .4 -kb带信号肽的植酸酶基因 ,将其克隆到穿梭表达载体 p YES2 ,构建了含有目的基因的重组质粒 p YPA1 .用 p YPA1转化酿酒酵母 INVSc1菌株 ,成功地构建了能分泌活性植酸酶的工程菌株 .该菌株的成功构建为饲料和食品添加剂以及解磷工程菌肥的开发奠定了基础 .
- 祝建洪孙建陈珈李桂兰吴卓伟王隆飞陈功Marc G Fortin李明刚
- 关键词：工程菌植酸酶酿酒酵母基因克隆基因表达重组质粒
- 重组巴斯德毕赤酵母发酵生产几丁质酶的条件优化研究被引量：14
- 2007年
- 研究了利用重组巴斯德毕赤酵母诱导表达重组几丁质酶的条件。在摇瓶水平上研究了诱导时间、pH、甲醇流加量、油酸等因素对重组几丁质酶表达的影响。结果发现诱导108h蛋白表达量最高;偏酸性环境不利于蛋白表达,维持在pH5.5～6.0最佳;甲醇最佳诱导浓度为1%;添加0.05%的油酸有助于提高蛋白表达量。在此基础上通过正交试验设计优化了培养基配方,在优化条件下,蛋白表达量达171.99mg/L,酶活达49.58U/mL。
- 阎瑞香吴仲侯建华李明刚
- 关键词：毕赤酵母发酵
- 降糖抗栓肽的构建及其功能活性研究
- 2022年
- 目的 构建一种具有降糖和抗栓活性的双功能降糖抗栓肽(HAP),并研究其功能活性。方法 通过重组聚合酶链反应克隆5rolGLP-1-NK融合肽基因,构建其高表达工程菌株并制备HAP样品,采用链唑霉素诱导法构建的糖尿病小鼠模型和K型角叉菜胶腹腔注射法构建的小鼠尾部血栓模型,研究其降糖和抗栓活性。结果 成功构建了HAP融合肽基因及其高效表达大肠杆菌工程菌株,通过对小鼠尾部血栓模型灌服HAP多肽,实验证明HAP能显著延缓模型小鼠的血栓形成;用构建的糖尿病小鼠模型对HAP降血糖活性的实验表明,经15 d HAP灌胃治疗的小鼠空腹血糖几乎降低到接近正常水平。结论 HAP具有显著的降糖和抗栓双重功能,为研发降糖抗栓肽双功能药物奠定了基础。
- 孟钰杰杨星楷杨佳明张芷萱Muhanmud Umar刘奇奇李晓丹李晓丹
- 关键词：糖尿病血栓纳豆激酶
- 四种芽孢杆菌对蒜薹灰葡萄孢霉抑制作用的时效性研究被引量：5
- 2017年
- 旨在对保存的4种芽孢杆菌菌株种属水平做初步鉴定并研究其在离体条件下对蒜薹灰葡萄孢霉的抑制作用以及活体条件下对蒜薹保鲜的时效性。采用平板对峙法和菌丝生长法进行离体实验,采用有伤接种法在不同时间段进行预防和治疗活体实验。结果表明,离体条件下,与对照相比,4种芽孢杆菌对灰葡萄孢霉菌落扩展和菌丝体生长都有显著的抑制作用且效果HB-2>B579>B1>B001(P<0.05)。20℃活体实验中,4种芽孢杆菌的预防处理均能较好地控制蒜薹灰葡萄孢霉病斑扩展,且效果好于治疗处理,但是不同芽孢杆菌最佳的预防时间有所不同。其中,HB-2和B579预防处理能较好地保持蒜薹的可溶性固形物、维生素C以及可滴定酸含量。综合来说,芽孢杆菌HB-2比其他3种芽孢杆菌能更有效地预防蒜薹灰霉病。
- 魏倩张娜张平李明刚阎瑞香
- 关键词：芽孢杆菌
