高啸波
- 作品数：8 被引量：5H指数：1
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- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- TLR4通路在软脂酸诱导人血管平滑肌细胞IL-6基因表达中的作用被引量：1
- 2013年
- 构建Toll样受体4（TLR4）shRNA腺病毒表达载体（pGSadeno—TLR4）并感染人主动脉血管平滑肌细胞（HA-VSMC），采用软脂酸和不同的信号通路阻断剂处理HA—VSMC，以实时定量PCR检测白细胞介素6（IL-6）mRNA的表达，酶联免疫吸附法（ELISA）检测NF—KBp65活性和IL-6的蛋白水平。结果显示，软脂酸增加HA—VSMCIL-6mRNA和蛋白水平，且具有明显的剂量依赖关系，软脂酸（400μmol／L）处理6h作用最明显。IL-6mRNA的表达水平为对照组的10．43倍（P〈0．01）。IL-6蛋白水平在软脂酸作用24h时达到峰值，约为对照组的2．18倍（P〈0．01）。NF．KB阻断剂parthenolide下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为65％和59％（均P〈0．01），蛋白激酶C（PKC）阻断剂白屈菜红碱下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为24％和28％（均P〈0．05）。而细胞外信号调节激酶抑制剂PD98059和磷酸肌醇3激酶抑制剂wortmannin对软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达均无明显作用（均P〉0．05）。pGSadeno．TLR4下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为72％和75％（均P〈0．01），下调软脂酸刺激的NF—KBv65活性约62％（P〈0．01）。这些结果提示TLR-4／NF—KB和PKC信号通路介导了软脂酸诱导的人主动脉血管平滑肌细胞IL-6基因表达。
- 权金星高啸波杨海静陈卫李伟华李永红刘静
- 关键词：软脂酸TOLL样受体4白细胞介素6
- 果蝇样受体4介导游离脂肪酸调节人血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1的表达被引量：4
- 2013年
- 目的探讨软脂酸对人主动脉血管平滑肌细胞（HA—VSMC）单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）基因表达的调节及果蝇样受体4（TLR4）信号通路的作用。方法采用不同剂量的软脂酸（100、200、400μmol/L）处理HA—VSMC6、12、24h，采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞MCP．1mRNA表达，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测MCP-1蛋白表达，观察软脂酸调节MCP-1表达的剂量依赖关系和时间效应；采用蛋白激酶C（PKC）抑制剂白屈菜红碱、磷脂酰肌醇3激酶（P13K）抑制剂wortmannin、神经酰胺抑制剂myriocin和核因子KB（NF—KB）抑制剂parthenolide分别处理细胞30min，再加入软脂酸（400μmol/L）处理细胞6h后，实时荧光定量PCR检测MCP-1mRNA的表达水平，ELISA检测MCP-1的蛋白表达水平，研究软脂酸调节MCP-1表达依赖的信号通路；构建TLR4短发夹RNA（shRNA）腺病毒pGSadeno-TLR4并感染HA—VSMC沉默TLR4基因表达，实验同时设空白对照组（PBS缓冲液）和对照病毒（pGSadeno-GFP）组。细胞感染96h后更换培养基，再加入软脂酸（400μmoL／L）处理细胞6h，采用实时荧光定量PCR检测MCP-1mRNA表达水平，ELISA检测MCP-1的蛋白表达水平。提取细胞核蛋白，采用ELISA检测NF—KBp65亚基活性，观察TLR4／NF-KB通路在软脂酸调节HA-VSMCMCP-1基因表达中的作用。组间均数比较采用单因素方差分析。结果采用软脂酸处理细胞6h后，对照组及100、200和400μmoVL软脂酸组MCP-1mRNA表达分别为1．00±0．02、3．30±2．84、8．21±4．31和11．25±2．73（F=7．57，P〈0．05）；MCP-1蛋白表达分别为（127±10）、（147±10）、（163±18）和（194±14）ng／L（F=7．81，P〈0．05）。软脂酸可促进HA-VSMCMCP-1mRNA和蛋白表达且具有明显的剂量依赖关系。细胞培养12h和24h后，随着软脂酸浓度的增加，MCP-1mRNA和蛋白表达水平呈逐渐增加趋势，但时间效应则不明显。采用不同�
- 高啸波权金星杨海静陈卫李伟华李永红刘静
- 关键词：软脂酸单核细胞趋化蛋白-1
- 红芪多糖对糖尿病状态下血管内皮细胞功能的影响
- 刘静权金星田利民周淑红郭茜魏素虹许衍甲刘菊香刘佳牛瑞兰安思芹高啸波
- 目的：探讨红芪多糖引起糖尿病状态下内皮细胞功能变化的机制。方法：①高糖条件下红芪多糖对内皮细胞血管活性物质的影响；②高糖条件下红芪多糖对内皮细胞凋亡的影响；③糖基化终末产物条件下红芪多糖对内皮细胞功能的影响；结果：HPS...
- 关键词：
- 关键词：红芪多糖糖尿病血管内皮细胞功能
- 果蝇样受体4通路介导游离脂肪酸诱导人血管平滑肌细胞白细胞介素8基因表达的实验研究
- 目的 探讨软脂酸对人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)白细胞介素8(IL-8)基因表达的调节及果蝇样受体4(TLR4)信号通路的作用.方法 构建TLR4 shRNA腺病毒表达载体并感染HA-VSMC,采用软脂酸和不同...
- 权金星刘静高啸波刘菊香李伟华李永红杨卫国
- TLR4通路介导游离脂肪酸诱导人血管平滑肌细胞IL-8基因表达的实验研究
- 目的 探讨软脂酸对人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)白细胞介素8(IL-8)基因表达的调节及果蝇样受体4(TLR4)信号通路的作用.方法 构建TLR4 shRNA腺病毒表达载体并感染HA-VSMC,采用软脂酸和不同...
- 权金星刘静高啸波刘菊香李伟华李永红杨卫国
- 1,25(OH)_2D_3对人血管平滑肌细胞TLR4基因及炎症因子表达的抑制作用
- 2012年
- 目的探讨1,25（OH）2D3（1,25-dihydroxyvitamin D3）对人主动脉血管平滑肌细胞（human aortic vascular smooth muscle cell,HA-VSMC）果蝇样受体（Toll like receptor 4,TLR4）基因及其下游炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1表达的调节作用。方法不同浓度1,25（OH）2D3干预HA-VSMC后,采用实时荧光定量PCR法检测细胞TLR4、IL-6、IL-8、MCP-1mR-NA的表达水平。结果 1,25（OH）2D3在浓度为1-20nmol/L之间抑制TLR4、IL-6、IL-8、MCP-1mRNA水平的表达且具有明显的剂量依赖关系。在浓度为1nmol/L时1,25（OH）2D3下调TLR4和MCP-1mRNA表达的作用最明显,浓度为10nmol/L时,1,25（OH）2D3下调IL-6mRNA表达的作用最明显,浓度为20nmol/L时,1,25（OH）2D3下调IL-8mRNA表达的作用最明显。TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1mRNA表达的最大下调幅度分别为对照组的3.08、2.39、3.19、2.23倍（均P〈0.05）。结论 1,25（OH）2D3通过下调TLR-4信号抑制了人主动脉血管平滑肌细胞的炎症反应。
- 杨海静陈卫高啸波权金星
- 关键词：1,25(OH)2D3细胞因子基因表达
- TLR4/NF-κB通路介导软脂酸诱导血管平滑肌细胞产生炎症的分子机制研究
- 第一部分：软脂酸对人血管平滑肌细胞炎症因子表达的调节作用 目的:①探讨软脂酸对HA-VSMC炎症因子IL-8、IL-6和MCP-1表达的影响;②探讨不同信号通路阻断剂对软脂酸诱导HA-VSMC炎症因子IL-8、IL-6...
- 高啸波
- 关键词：软脂酸
- 游离脂肪酸诱导血管平滑肌细胞炎症的分子机制及活性维生素D3的抑制作用研究
- 权金星刘静李伟华刘菊香高啸波杨海静李永红陈卫杨卫国
- 目的：探讨游离脂肪酸（FFA）对人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)果蝇样受体4（TLR4）信号及其下游炎症因子的调控作用。方法：构建TLR4 shRNA腺病毒表达载体并感染HA-VSMC，采用FFA、不同的信号通路...
- 关键词：
- 关键词：游离脂肪酸血管平滑肌细胞活性维生素D3
