杨海静
- 作品数：9 被引量：14H指数：2
- 供职机构：兰州大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- YKL-40转染对前列腺癌LNcap细胞增殖及侵袭活性的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨外源性YKL-40基因转染对前列腺癌LNcap细胞增殖、侵袭、迁移及黏附活性的影响。方法 RT-PCR法检测前列腺癌细胞LNcap、PC-3、DU-145 YKL-40基因内源性表达情况;用pcDNA3.1-YKL-40质粒转染LNcap细胞,分别经MTT法、Boyden小室法及黏附试验检测转染前后细胞增殖、侵袭、迁移及黏附活性,并进行体外药敏试验。结果仅DU-145细胞可内源性表达YKL-40基因;pcDNA3.1-YKL-40转染的LNcap细胞在第2～5天的A490值均显著高于对照组(P<0.05),其侵袭(75.11±4.40)和迁移穿膜细胞数(133.00±5.07)及黏附率(107.57%)均显著高于对照组(P<0.05),对5-FU、顺铂和依托泊苷的IC50值分别为(31.15±0.43)、(4.15±0.13)和(55.22±0.57)μmol/L,均显著高于对照组(P<0.05)。结论 YKL-40基因能促进LNcap细胞增殖,提高细胞侵袭、迁移及黏附活性,并使其对5-FU、顺铂和依托泊苷具有一定的耐药性。
- 夏艳査成喜杨海静温玉婷杨浩陈卫
- 关键词：LNCAP细胞细胞增殖肿瘤侵润
- 油酸调节人血管平滑肌细胞TLR4的增殖活性及炎性因子的表达被引量：6
- 2013年
- 目的探讨油酸对人主动脉血管平滑肌细胞TLR4及炎性因子表达的调节作用。方法 MTT法检测细胞增殖活性;实时荧光定量PCR法检测TLR4及炎性因子mRNA的表达;Western blot法检测细胞TLR4蛋白表达,ELISA法检测炎性因子蛋白含量。结果油酸促进人主动脉血管平滑肌细胞增殖活性,增加油酸浓度,抑制细胞增殖。油酸上调TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1 mRNA表达最大幅度为6.5、7.4、7.4和7.1倍。IL-6、IL-8和MCP-1蛋白表达最大上调幅度为2.16、1.93和2.06倍。200μmol/L组TLR4蛋白表达的吸光度值为(1.70±0.62),与对照组(0.29±0.22)比较P<0.05。LPS组TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1的表达明显增加(P<0.05)。结论油酸促进人主动脉血管平滑肌细胞TLR4及炎性因子mRNA及蛋白表达。
- 杨海静陈卫权金星李伟华刘静邱明才
- 关键词：油酸细胞因子基因表达
- TLR4通路在软脂酸诱导人血管平滑肌细胞IL-6基因表达中的作用被引量：1
- 2013年
- 构建Toll样受体4（TLR4）shRNA腺病毒表达载体（pGSadeno—TLR4）并感染人主动脉血管平滑肌细胞（HA-VSMC），采用软脂酸和不同的信号通路阻断剂处理HA—VSMC，以实时定量PCR检测白细胞介素6（IL-6）mRNA的表达，酶联免疫吸附法（ELISA）检测NF—KBp65活性和IL-6的蛋白水平。结果显示，软脂酸增加HA—VSMCIL-6mRNA和蛋白水平，且具有明显的剂量依赖关系，软脂酸（400μmol／L）处理6h作用最明显。IL-6mRNA的表达水平为对照组的10．43倍（P〈0．01）。IL-6蛋白水平在软脂酸作用24h时达到峰值，约为对照组的2．18倍（P〈0．01）。NF．KB阻断剂parthenolide下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为65％和59％（均P〈0．01），蛋白激酶C（PKC）阻断剂白屈菜红碱下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为24％和28％（均P〈0．05）。而细胞外信号调节激酶抑制剂PD98059和磷酸肌醇3激酶抑制剂wortmannin对软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达均无明显作用（均P〉0．05）。pGSadeno．TLR4下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为72％和75％（均P〈0．01），下调软脂酸刺激的NF—KBv65活性约62％（P〈0．01）。这些结果提示TLR-4／NF—KB和PKC信号通路介导了软脂酸诱导的人主动脉血管平滑肌细胞IL-6基因表达。
- 权金星高啸波杨海静陈卫李伟华李永红刘静
- 关键词：软脂酸TOLL样受体4白细胞介素6
- 果蝇样受体4介导游离脂肪酸调节人血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1的表达被引量：4
- 2013年
- 目的探讨软脂酸对人主动脉血管平滑肌细胞（HA—VSMC）单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）基因表达的调节及果蝇样受体4（TLR4）信号通路的作用。方法采用不同剂量的软脂酸（100、200、400μmol/L）处理HA—VSMC6、12、24h，采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞MCP．1mRNA表达，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测MCP-1蛋白表达，观察软脂酸调节MCP-1表达的剂量依赖关系和时间效应；采用蛋白激酶C（PKC）抑制剂白屈菜红碱、磷脂酰肌醇3激酶（P13K）抑制剂wortmannin、神经酰胺抑制剂myriocin和核因子KB（NF—KB）抑制剂parthenolide分别处理细胞30min，再加入软脂酸（400μmol/L）处理细胞6h后，实时荧光定量PCR检测MCP-1mRNA的表达水平，ELISA检测MCP-1的蛋白表达水平，研究软脂酸调节MCP-1表达依赖的信号通路；构建TLR4短发夹RNA（shRNA）腺病毒pGSadeno-TLR4并感染HA—VSMC沉默TLR4基因表达，实验同时设空白对照组（PBS缓冲液）和对照病毒（pGSadeno-GFP）组。细胞感染96h后更换培养基，再加入软脂酸（400μmoL／L）处理细胞6h，采用实时荧光定量PCR检测MCP-1mRNA表达水平，ELISA检测MCP-1的蛋白表达水平。提取细胞核蛋白，采用ELISA检测NF—KBp65亚基活性，观察TLR4／NF-KB通路在软脂酸调节HA-VSMCMCP-1基因表达中的作用。组间均数比较采用单因素方差分析。结果采用软脂酸处理细胞6h后，对照组及100、200和400μmoVL软脂酸组MCP-1mRNA表达分别为1．00±0．02、3．30±2．84、8．21±4．31和11．25±2．73（F=7．57，P〈0．05）；MCP-1蛋白表达分别为（127±10）、（147±10）、（163±18）和（194±14）ng／L（F=7．81，P〈0．05）。软脂酸可促进HA-VSMCMCP-1mRNA和蛋白表达且具有明显的剂量依赖关系。细胞培养12h和24h后，随着软脂酸浓度的增加，MCP-1mRNA和蛋白表达水平呈逐渐增加趋势，但时间效应则不明显。采用不同�
- 高啸波权金星杨海静陈卫李伟华李永红刘静
- 关键词：软脂酸单核细胞趋化蛋白-1
- 1,25(OH)_2D_3对人血管平滑肌细胞TLR4基因及炎症因子表达的抑制作用
- 2012年
- 目的探讨1,25（OH）2D3（1,25-dihydroxyvitamin D3）对人主动脉血管平滑肌细胞（human aortic vascular smooth muscle cell,HA-VSMC）果蝇样受体（Toll like receptor 4,TLR4）基因及其下游炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1表达的调节作用。方法不同浓度1,25（OH）2D3干预HA-VSMC后,采用实时荧光定量PCR法检测细胞TLR4、IL-6、IL-8、MCP-1mR-NA的表达水平。结果 1,25（OH）2D3在浓度为1-20nmol/L之间抑制TLR4、IL-6、IL-8、MCP-1mRNA水平的表达且具有明显的剂量依赖关系。在浓度为1nmol/L时1,25（OH）2D3下调TLR4和MCP-1mRNA表达的作用最明显,浓度为10nmol/L时,1,25（OH）2D3下调IL-6mRNA表达的作用最明显,浓度为20nmol/L时,1,25（OH）2D3下调IL-8mRNA表达的作用最明显。TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1mRNA表达的最大下调幅度分别为对照组的3.08、2.39、3.19、2.23倍（均P〈0.05）。结论 1,25（OH）2D3通过下调TLR-4信号抑制了人主动脉血管平滑肌细胞的炎症反应。
- 杨海静陈卫高啸波权金星
- 关键词：1,25(OH)2D3细胞因子基因表达
- TLR4/NF-κB介导软脂酸调节人血管平滑肌细胞IL-6表达的实验研究
- 权金星高啸波杨海静陈卫李伟华李永红刘静
- 油酸和1，25（0H）_2D_3对人血管平滑肌细胞TLR4基因及炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1表达的调节作用
- 目的：探讨油酸对体外培养的人主动脉血管平滑肌细胞TLR4基因及炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1表达的调节作用。 方法：采用不同浓度的油酸处理人主动脉血管平滑肌细胞不同时间,未加药物组为对照组,LPS组作为阳性对照。...
- 杨海静
- 关键词：油酸IL-6IL-8MCP-1IL-6IL-8MCP-1
- 文献传递
- 游离脂肪酸诱导血管平滑肌细胞炎症的分子机制及活性维生素D3的抑制作用研究
- 权金星刘静李伟华刘菊香高啸波杨海静李永红陈卫杨卫国
- 目的：探讨游离脂肪酸（FFA）对人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)果蝇样受体4（TLR4）信号及其下游炎症因子的调控作用。方法：构建TLR4 shRNA腺病毒表达载体并感染HA-VSMC，采用FFA、不同的信号通路...
- 关键词：
- 关键词：游离脂肪酸血管平滑肌细胞活性维生素D3
- 肝型脂肪酸结合蛋白研究进展被引量：2
- 2010年
- 肝型脂肪酸结合蛋白(liver-type fatty acidbinding protein,L-FABP,FABP1)是脂肪酸结合蛋白家族的成员之一,主要在肝脏、小肠、肾脏及胰腺等组织细胞中有表达。研究发现,L-FABP与脂肪酸的摄取、转运、代谢调节有关。近年研究表明,肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)与肿瘤、肾脏疾病、脂肪肝、肥胖、糖尿病等多种疾病的发生发展密切相关。本文就肝型脂肪酸结合蛋白的分子结构、功能以及与疾病的关系作一综述。
- 杨海静夏艳陈卫
- 关键词：肝型脂肪酸结合蛋白肿瘤肾脏疾病脂肪肝
