黄淑帧
- 作品数：146 被引量：536H指数：12
- 供职机构：上海市儿童医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金美国国立卫生研究院基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 转人血清白蛋白基因试管牛的研究被引量：28
- 2000年
- 构建了含人血清白蛋白（hALB）基因的cDNA全序列、内含子1以及山羊β－酪蛋白基因启动子和5’端上游调控序列在内的乳腺表达载体pcDNA3.1－GCALBm，并通过显微注射将其导入经过体外受精（IVF）的奶牛受精卵中，体外培养到桑椹胚后期，取出少许细胞，应用巢式PCR对其进行目的基因整合及性别的预鉴定，将10枚整合胚移植于8头受体母牛，结果有3头妊娠，受孕率为37.5％（3／8），其中2头于妊娠中期流产，另有1头足月分娩产下1头有人血清白蛋白基因整合的雄性转基因试管牛，转基因实验的总有效率为12.5％（1／8）。
- 黄淑帧黄英陈美珏陈巍黄赞李华李景春任兆瑞曾溢滔
- 关键词：体外受精转基因牛乳腺生物反应器
- 免疫组织化学方法在人/山羊嵌合体人源细胞鉴定中的应用被引量：2
- 2005年
- 目的 在胎山羊宫内移植人造血干细胞 (hHSC)获得人 /山羊嵌合体基础上 ,应用免疫组织化学技术分析嵌合体实验山羊肝、肺和肾组织中人源细胞的生长及分化情况。方法 对 7头经荧光激活的细胞分选 (FACS)、荧光原位杂交 (FISH)和分子生物学方法鉴定为阳性的实验山羊 ,在出生后不同时间取其肝、肺和肾组织 ,制作石蜡切片 ,然后采用免疫组织化学的EnVision系统 ,用特异性人增殖期细胞核抗原 (PCNA)单抗、人肝细胞特异性抗原 (HSA)单抗及人 β 2微球蛋白 (β 2M )单抗鉴定这些组织中的人源细胞。结果 7头实验山羊的肝组织中有一定比例的PCNA和HSA抗体阳性染色细胞 ,肺和肾组织内有PCNA及 β 2M抗体阳性染色细胞 ,正常人的肝、肺和肾细胞也呈阳性染色 ,而非hHSC移植的正常山羊的肝、肺和肾组织中未见有阳性染色细胞。结论 胎山羊宫内移植hHSC所形成的嵌合体的肝脏中有人源细胞存活 ,并检测到表达人肝细胞特异抗原的人肝样细胞。免疫组化鉴定的阳性结果与分子生物学等方法的鉴定结果相符。此外 ,在嵌合体山羊肺和肾组织中也发现有人源细胞。
- 巩芷娟黄淑帧
- 关键词：嵌合体细胞鉴定HSC免疫组织化学方法增殖期细胞存活
- 胚胎移植时机对牛体细胞克隆胚胎妊娠率的影响被引量：5
- 2008年
- 以活体取卵OUP来源的牛卵母细胞为受体胞质,以Holstein奶牛的牛耳成纤维细胞作为供核细胞进行体细胞克隆,并将发育7 d的克隆囊胚和体内胚分别及体外胚进行移植,观察移植时机对受孕率的影响。依据代孕牛排卵后天数的不同分为3个实验组,组1:排卵后5～6 d(不含6 d);组2:排卵后6～7d;组3:排卵后7～8 d(不含7 d)。结果显示:对于体外胚胎而言,第2组的受孕率高于第1组(P>0.05),第3组的受孕率最低(P<0.05),且120 d的受孕率为0。与此相反,对于体内胚胎,第3组的受孕率高于其他2组。通过实验可以证明对于7 d的体外胚胎选择在代孕牛排卵后6—7 d移植可以得到较高的受孕率:而对于体内胚胎而言则应选择在受体牛排卵后7～8 d移植,可得到较高的妊娠率。
- 赵磊文伏静管鹏飞李华黄淑帧曾溢滔
- 关键词：体细胞核移植受孕胚胎移植
- 在中国人PAH基因中发现一种新的中性突变以及它在苯丙酮尿症产前诊断中的作用
- 1990年
- 本文在对一例中国PKU患者的PAH基因进行碱基顺序分析时发现了一种新的中性突变或顺序多态位点:11外显子第399密码子GTA(Val)→GTT(Val)。应用PCR体外扩增和寡核苷酸杂交技术对100个正常人和39个PKU患者进行分析,发现此顺序多态性在正常和异常PAH基因中的分布频率分别为0.005和0.090,存在一定的差异性。该顺序多态可作为一种“遗传标记”成功地对一例不能用RFLP连锁分析作完全诊断的PKU高危胎儿进行了产前诊断。
- 黄淑帧周霞娣任兆瑞曾溢滔胡流清
- 关键词：苯丙酮尿症PAH产前诊断
- 15例非典型β地中海贫血杂合子分析被引量：3
- 1994年
- 对１５例“非典型β地中海贫血杂合子”进行了血液学，血红蛋白组成，肽链生物合成速率和珠蛋白基因及其ｍＲＮＡ含量的分析。发现患者β珠蛋白基因的表达呈中等程度甚至较明显的减少，结合家系调查，认为他们是典型β地中海贫血基因和非典型β地中海贫血基因的复合杂合子。提出应用药物（如羟基脲）来调变珠蛋白基因的表达可能是治疗“非典型性β地中海贫血杂合子”的有效途径。
- 任兆瑞黄淑帧盛敏王文耀许洪平陈美珏曾溢滔
- 关键词：地中海贫血杂合子珠蛋白基因
- 应用HMG和FSH对山羊超排效果的分析被引量：3
- 2007年
- 胡伟陈美珏黄英黄淑帧
- 关键词：超排效果山羊FSHHMG金属硫蛋白基因转基因小鼠
- 亨廷顿病的基因诊断及家系分析被引量：6
- 1995年
- 为了对亨廷顿病进行早期准确基因诊断，作者应用限制性片段长度多态性连锁分析和巢式聚合酶链反应直接检测ＩＴ１５基因ＣＡＧ三核苷酸重复序列的技术，对徐州和浙江两大亨廷顿病（ＨＤ）家系，共８例患者和３９例高风险家庭成员进行了基因诊断。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射自显影和直接ＤＮＡ测序的分析结果表明，在所分析的正常ＩＴ１５基因中，（ＣＡＧ）ｎ拷贝数大多为１６，而突变ＩＴ１５基因（ＣＡＧ）ｎ拷贝数均大于４０，两者不重叠。３９例ＨＤ高风险者的症状前预测的结果为：有１１名为ＨＤ基因携带者。结果不仅表明ＩＴ１５基因的不稳定突变是导致中国人ＨＤ的遗传学基础，而且为该病的基因诊断、遗传咨询提供了科学资料。
- 曾溢滔陈美珏毛跃华任兆瑞王秀英许志大何曦黄淑帧
- 关键词：HUNTINGTON病遗传病基因诊断基因突变
- 重大出生缺陷研究中的样本采集与管理
- 2011年
- 出生缺陷是一种不正常发育引起的患儿先天性结构或功能异常。中国出生缺陷人群数量较大,这个问题在经济发展相对落后的农村更为严重。由于大多数出生缺陷发生机制还不明确,尚无有效治疗手段,故进行相关机制研究尤为重要。为更好地开展重大出生缺陷的研究,必须优化实验的顶层设计,并在样本采集、保存、运输等环节做到规范化、标准化,保证样本的质量。同时采用现代信息系统对样本进行集约化管理,力求达到资料完整、查询方便、信息共享,为后续研究打下坚实基础。
- 颜景斌黄淑帧
- 扩增Y染色体α类卫星序列鉴定胎儿性别
- 1990年
- 该文介绍用2组寡核苷酸引物X_1,X_2和Y_1,Y_2分别扩增人类X染色体和Y染色体的α类卫星DNA重复序列来鉴定胎儿性别。PCR扩增产生的Y染色体特异DNA片段可进一步用限制酶Dde Ⅰ和Hinf Ⅰ消化来分析鉴定。本方法灵敏而准确,作者应用此法对2例DMD高危胎儿进行了性别鉴定。
- 曾溢滔周霞娣黄淑帧
- 关键词：性别鉴定
- 反转录病毒介导的人凝血因子IX小基因在奶山羊乳腺中的分泌表达被引量：7
- 1997年
- 通过受精卵显微注射胚胎移植建立哺乳动物乳腺生产系统是近年来生物工程领域的研究热点,但该工作周期长、成本高、难度和工作量都很大.1994年Johanna等人曾经报道以反转录病毒作载体将hGH(human growth hormone)cDNA导入山羊乳腺组织并获得表达.但是由于病毒LTR控制下的hGH基因的表达在活体动物乳腺组织内受到一定程度的抑制,因此表达水平比较低,持续时间短.我们以微小MCK(Muscle creatine kinase)增强子,β-actin启动子控制hFⅨ(human clotting factorⅨ)小基因(minigene)表达顺序反向插入GINa框架,构建为复制缺陷反转录病毒载体.首次通过反转录病毒直接转染活体奶山羊乳腺小叶和乳腺导管导入的方法建立了hFⅨ蛋白的乳腺表达系统.hFⅨ蛋白在羊奶中的最高表达量为47.9ng/mL乳汁,其中1头奶山羊2个月后表达量仍维持在12ng/mL乳汁.Western
- 张克忠包云卢大儒薛京伦邱信芳黄英李兵岩李华黄淑帧曾溢滔
- 关键词：人凝血因子IX反转录病毒乳腺山羊
