任玉水
- 作品数：23 被引量：33H指数：3
- 供职机构：北京市虹天济神经科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都医学发展科研基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 来源于人胚室下区神经干/祖细胞的贴壁法培养和鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的建立有效的人胚胎神经干/祖细胞分离及纯化方法以达到临床需要。方法无菌取胎脑室管膜下区组织,经反复机械吹打制备细胞混悬液,采用贴壁法进行体外培养、传代。传代后用Nestin进行细胞鉴定。结果应用贴壁法进行胎脑室管膜下区神经干/祖细胞的培养能够稳定传代20代以上;共聚焦显微镜下可见Nestin阳性细胞表达呈递增趋势,传至P3(passage3)阳性率为35%,P7为79%,P12为90%,P15为99%。传到前七代时分别做细胞存活率鉴定,可达(82.57±1.38)%。结论成功建立了来源于人胚室下区的神经干/祖细胞的贴壁法培养,为该细胞移植治疗神经系统疾病提供了技术方法支持。
- 姜晓荣王洪美陈琳田国忠包建玲任玉水黄红云郗海涛
- 关键词：细胞培养人胚胎免疫细胞化学
- 嗅鞘细胞移植入淀粉样前体蛋白转基因小鼠脑内降低β淀粉样蛋白沉积
- 2010年
- 目的观察嗅鞘细胞移植入淀粉样前体蛋白(APP)转基因小鼠脑内后的存活和迁移状况及其对模型β淀粉样蛋白沉积的作用,以进一步探索嗅鞘细胞移植对阿尔茨海默病的治疗效果。方法取自发绿色荧光蛋白的新生3d龄增强型绿色荧光蛋白(EGFP)转基因小鼠,体外分离培养嗅球嗅鞘细胞,在小鼠脑立体定位仪的固定下,参照AP小鼠脑立体定位图谱,将收集的嗅鞘细胞移植入APP转基因小鼠脑内。移植1个月后,取脑组织冷冻切片,在双光子共焦显微镜下观察细胞存活和迁移状况并采集图像。移植1个月后,行荧光免疫组织化学和免疫印迹法检测淀粉样蛋白沉积,每组4只。结果嗅鞘细胞移植入APP转基因小鼠脑内存活良好,并以移植点为中心向外迁移,部分绿色荧光细胞呈现成血管现象,移植之后APP转基因小鼠脑内的β淀粉样蛋白沉积减少,APP表达明显减少(P<0.05)。结论嗅鞘细胞对减少APP转基因小鼠脑内淀粉样蛋白沉积有一定帮助。
- 曹敬丽刘婧媛肖娟姜晓荣任玉水王洪美周长满黄红云
- 关键词：Β淀粉样蛋白细胞移植免疫印迹法APP转基因小鼠
- 人胚胎嗅鞘细胞移植供、受者HLA配型方法介绍
- 陈琳方明俊黄红云王洪美姜晓荣任玉水田国忠
- 临床应用型人脐血间充质干细胞分离培养与鉴定
- 2010年
- 目的探讨能够达到临床细胞治疗标准的人脐血间充质干细胞的体外培养与纯化方法。方法以15%FBS/DMEM作为培养基,采用淋巴细胞分离液间接分离法,分离MSCs,以贴壁培养法进行原代培养和纯化。倒置显微镜下观察生长状态和形态学变化,共聚焦显微镜下观察细胞表面抗原CD34,CD44免疫组化染色的鉴定。结果细胞计数显示人脐血间充质干细胞产品的细胞成活率大于95%,其纯度大于85%,符合卫生部第三类医疗技术的有关标准。结论脐带血内含MSCs,可在体外分离培养纯化增殖,获得大量相对纯化的MSCs,达到临床应用水平。
- 肖娟陈琳王洪美李莹任玉水黄红云
- 关键词：脐血间充质干细胞细胞培养免疫组化
- 嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤后顽固性神经痛17例报告
- 陈琳江昭黄红云张峰刘彦铖郗海涛王洪美任玉水
- 组织块法培养人脐带来源间充质干细胞的培养与扩增方法
- 目的:探讨一种能为临床治疗提供大量间充质干细胞的培养方法。方法:无菌条件下取下脐带,经剪碎采用组织块法分离脐带间充质干细胞,采用15%FBS/DMEM进行体外培养,并通过传代进行纯化与扩增。倒置显微镜下观察细胞生长状态和...
- 肖娟陈琳任玉水姜晓荣黄红云赵艳秀
- 关键词：人脐带间充质干细胞组织块法
- 文献传递
- 两种冻存液中海马神经元细胞复苏后生物学特性比较
- 2010年
- 目的：建立海马神经元适宜的冻存方法。方法：将新生24h以内的大鼠海马消化成单个细胞后分别直接冻存于血清浓度不同的冻存液中，复苏后进行台盼蓝染色观察细胞活性；培养后观察其生长状态并在第7天固定细胞，分别进行Hoechst，微管蛋白（Tubulin）和神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）显色后，荧光显微镜下计数海马神经元、胶质细胞的百分率，从而建立最佳冻存方法。结果：冻存于高浓度血清冻存液中的神经元百分率为87．5％，冻存于低浓度血清冻存液中的神经元百分率为73．8％，高浓度血清冻存液中的细胞复苏后的状态及神经元存活率明显优于保存于低浓度血清冻存液中的；而冻存于高低浓度血清冻存液中的胶质细胞百分率分别为9．5％和16．5％，胶质细胞在高浓度血清的相对含量明显低于低血清组。结论：高浓度血清冻存液更利于海马神经细胞冻存后的复苏和生长。
- 王洪美胡琴肖娟姜晓荣赵艳廷曹敬丽任玉水田国忠黄红云
- 关键词：海马神经元冻存微管蛋白神经胶质纤维酸性蛋白
- 人胚鼻黏膜神经干细胞的分离提纯及培养
- 目的:探讨人胚胎鼻黏膜神经干细胞的分离、纯化方法,以及培养过程中血清的应用。方法:选取优质胚胎,无菌分离上鼻甲、中鼻甲及其相对应的鼻中隔的被覆黏膜,DMEM/F12充分清洗,剪切,悬浮于中性蛋白酶和胶原酶的混合酶中37℃...
- 姜晓荣任玉水王洪美刘婧媛肖娟赵艳秀陈琳黄红云
- 关键词：神经干细胞传代
- 文献传递
- 脑内神经网络修复关键点的临床验证被引量：2
- 2011年
- 背景:细胞移植的安全有效靶点选择,是临床研究的重要方向。对脑内是否存在能发挥重要治疗作用的点或区域,以最大限度对神经网络发挥良性影响进而修复,是研究先行者必须优先考虑的课题之一。目的:通过临床资料分析,证实细胞移植脑内神经网络修复关键点(KPNNR)理论的客观性、真实性和实用性。方法:2003-05/2009-01共有631例各类中枢神经系统疾病患者接受神经网络修复关键点嗅鞘细胞移植,其中609例资料齐全,男392例,女217例;年龄1.2～84(42.87±19.64)岁,病程0.4～35(5.11±5.46)年。疾病分布:肌萎缩侧索硬化432例次、脑性瘫痪110例次、多发性硬化25例次、共济失调12例次、多系统萎缩7例次、遗传性痉挛性截瘫6例次、持续性植物状态6例次、痴呆2例次、脑缺氧后遗症2例次、帕金森叠加综合征2例次、非特异性脑炎后遗症2例次、肾上腺脑白质营养不良1例、核黄疸后遗症1例、皮质基底核变性1例。患者来自75个国家或地区。结果与结论:细胞移植后随访2～8周,平均4周,609例次中526例次神经功能获不同程度改善,近期总改善率为86.37%,其中肌萎缩侧索硬化改善率为87.96%。脑性瘫痪改善率为82.7%,特别是4例伴有癫痫者,术后发作明显减少。共济失调改善率为83.3%。遗传性痉挛性截瘫改善率为83.3%。围手术期出现不良事件共33例次,发生率为5.4%,主要为术后头痛、发热等,多经对症治疗后痊愈。结果提示,大脑内神经网络修复关键点(KPNNR)客观存在,在该点进行嗅鞘细胞移植安全可行,能改善多种中枢神经系统疾病患者的神经功能和(或)延缓病情的进行性恶化。
- 陈琳郗海涛黄红云张峰刘彦铖陈娣江昭王庆苗任玉水
- 关键词：嗅鞘细胞细胞移植神经系统疾病安全性
- 人类胚胎嗅球嗅鞘细胞质量标准被引量：4
- 2008年
- 为严格控制人类胚胎嗅鞘细胞培养和临床使用准备过程中诸多环节的质量,制定了人类胚胎嗅球嗅鞘细胞培养操作规范。因为完善的操作流程,可以最大限度的减少人为因素,确保细胞质量的稳定性。所以对嗅鞘细胞来源的标本要求,要严格规定人类胚胎嗅球嗅鞘细胞培养过程中的实验室条件以及细胞培养的规范,对操作中关键步骤进行严格规范要求,质控嗅鞘细胞冻存和复苏过程,提出细胞培养中微生物污染的检测方法,减少应用风险,为人类胚胎嗅球嗅鞘细胞临床使用提供高质量保证。
- 任玉水田国忠王洪美黄红云陈琳
- 关键词：嗅鞘细胞胚胎嗅球细胞培养
