姜晓荣
- 作品数：16 被引量：12H指数：2
- 供职机构：北京市虹天济神经科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都医学发展科研基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胚嗅球嗅鞘细胞原代培养的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的拟建立人胚胎嗅球嗅鞘细胞的培养方法并探讨这些细胞在活性、纯度方面是否具备临床应用水平。方法用含有促进细胞生长的谷氨酰胺、转铁蛋白、生物素、硒酸纳的无血清纯化液纯化嗅鞘细胞,胰蛋白酶消化收集细胞,制成单细胞悬液。采用台盼蓝染色法进行活性测定,P75NGFR和S-100双标免疫荧光染色鉴定,以Hoechst复染鉴定OECs的纯度。结果可见比较典型的嗅鞘细胞:双极或梭形、多突起形和扁圆形,主要以梭形和多突起形细胞为主。细胞活性大于95%,纯度大于90%。结论实验建立的人胚胎嗅球嗅鞘细胞原代培养的方法可行,细胞活性大于95%,纯度和均一性已达到临床应用水平。
- 任玉水闫军浩王洪美陈琳黄红云周长满姜晓荣田国忠
- 关键词：嗅鞘细胞细胞培养纯化免疫荧光人胚
- 两种冻存液中海马神经元细胞复苏后生物学特性比较
- 2010年
- 目的：建立海马神经元适宜的冻存方法。方法：将新生24h以内的大鼠海马消化成单个细胞后分别直接冻存于血清浓度不同的冻存液中，复苏后进行台盼蓝染色观察细胞活性；培养后观察其生长状态并在第7天固定细胞，分别进行Hoechst，微管蛋白（Tubulin）和神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）显色后，荧光显微镜下计数海马神经元、胶质细胞的百分率，从而建立最佳冻存方法。结果：冻存于高浓度血清冻存液中的神经元百分率为87．5％，冻存于低浓度血清冻存液中的神经元百分率为73．8％，高浓度血清冻存液中的细胞复苏后的状态及神经元存活率明显优于保存于低浓度血清冻存液中的；而冻存于高低浓度血清冻存液中的胶质细胞百分率分别为9．5％和16．5％，胶质细胞在高浓度血清的相对含量明显低于低血清组。结论：高浓度血清冻存液更利于海马神经细胞冻存后的复苏和生长。
- 王洪美胡琴肖娟姜晓荣赵艳廷曹敬丽任玉水田国忠黄红云
- 关键词：海马神经元冻存微管蛋白神经胶质纤维酸性蛋白
- 人胚鼻黏膜神经干细胞的分离提纯及培养
- 目的:探讨人胚胎鼻黏膜神经干细胞的分离、纯化方法,以及培养过程中血清的应用。方法:选取优质胚胎,无菌分离上鼻甲、中鼻甲及其相对应的鼻中隔的被覆黏膜,DMEM/F12充分清洗,剪切,悬浮于中性蛋白酶和胶原酶的混合酶中37℃...
- 姜晓荣任玉水王洪美刘婧媛肖娟赵艳秀陈琳黄红云
- 关键词：神经干细胞传代
- 文献传递
- 来源于人胚室下区神经干/祖细胞的贴壁法培养和鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的建立有效的人胚胎神经干/祖细胞分离及纯化方法以达到临床需要。方法无菌取胎脑室管膜下区组织,经反复机械吹打制备细胞混悬液,采用贴壁法进行体外培养、传代。传代后用Nestin进行细胞鉴定。结果应用贴壁法进行胎脑室管膜下区神经干/祖细胞的培养能够稳定传代20代以上;共聚焦显微镜下可见Nestin阳性细胞表达呈递增趋势,传至P3(passage3)阳性率为35%,P7为79%,P12为90%,P15为99%。传到前七代时分别做细胞存活率鉴定,可达(82.57±1.38)%。结论成功建立了来源于人胚室下区的神经干/祖细胞的贴壁法培养,为该细胞移植治疗神经系统疾病提供了技术方法支持。
- 姜晓荣王洪美陈琳田国忠包建玲任玉水黄红云郗海涛
- 关键词：细胞培养人胚胎免疫细胞化学
- 嗅鞘细胞移植入淀粉样前体蛋白转基因小鼠脑内降低β淀粉样蛋白沉积
- 2010年
- 目的观察嗅鞘细胞移植入淀粉样前体蛋白(APP)转基因小鼠脑内后的存活和迁移状况及其对模型β淀粉样蛋白沉积的作用,以进一步探索嗅鞘细胞移植对阿尔茨海默病的治疗效果。方法取自发绿色荧光蛋白的新生3d龄增强型绿色荧光蛋白(EGFP)转基因小鼠,体外分离培养嗅球嗅鞘细胞,在小鼠脑立体定位仪的固定下,参照AP小鼠脑立体定位图谱,将收集的嗅鞘细胞移植入APP转基因小鼠脑内。移植1个月后,取脑组织冷冻切片,在双光子共焦显微镜下观察细胞存活和迁移状况并采集图像。移植1个月后,行荧光免疫组织化学和免疫印迹法检测淀粉样蛋白沉积,每组4只。结果嗅鞘细胞移植入APP转基因小鼠脑内存活良好,并以移植点为中心向外迁移,部分绿色荧光细胞呈现成血管现象,移植之后APP转基因小鼠脑内的β淀粉样蛋白沉积减少,APP表达明显减少(P<0.05)。结论嗅鞘细胞对减少APP转基因小鼠脑内淀粉样蛋白沉积有一定帮助。
- 曹敬丽刘婧媛肖娟姜晓荣任玉水王洪美周长满黄红云
- 关键词：Β淀粉样蛋白细胞移植免疫印迹法APP转基因小鼠
- 人胚胎嗅鞘细胞移植供、受者HLA配型方法介绍
- 陈琳方明俊黄红云王洪美姜晓荣任玉水田国忠
- 临床应用型人胚神经干细胞的培养与增值
- 目的:建立有效的人胚神经干细胞的培养与增值方法以达到临床需求。方法:用含有1%N2、2%B27、10ng/mlLIF、20ng/mlEGF、20ng/mlFGF的DMEM/DF12培养液进行培养后增值,在光学显微镜下观察...
- 任玉水肖娟姜晓荣黄红云
- 关键词：神经干细胞
- 文献传递
- 三种人胚胎许旺细胞培养方法的比较被引量：2
- 2011年
- 目的比较三种不同培养方法对许旺细胞纯度影响。方法应用三种不同的培养方法对10份人胚胎样本的坐骨神经分别采用植块培养法、差速贴壁法、分次消化法进行培养观察。并采用S100免疫荧光化学方法鉴定许旺细胞,Hoechst染色标记细胞核,统计许旺细胞纯度。结果三种培养方法其获得的细胞纯度分别为:分次消化培养法为90%,差速贴壁法为75%,植块培养法为67%,分次消化培养法获得的细胞纯度明显高于其他两组(P<0.05)。结论分次消化培养法较差速贴壁法、植块培养法更易获得高纯度许旺细胞。
- 王洪美胡琴姜晓荣肖娟任玉水陈琳黄红云
- 关键词：许旺细胞坐骨神经S100蛋白质类纯化
- 来源于嗅粘膜神经元细胞分离制备技术
- 来源于嗅粘膜神经元细胞分离制备技术本发明提供了一种嗅粘膜神经元的分离培养、传代、冻存、分化技术。特色步骤包括：1、嗅粘膜神经元基础培养基的配置；2、原代培养技术；3、专用传代培养基的配置：收集处理培养基上清液，用于配置嗅...
- 黄红云高文勇姜晓荣
- 文献传递
- 成人鼻腔嗅区黏膜细胞的分离培养与免疫学特点被引量：1
- 2010年
- 目的探讨成人鼻腔嗅区黏膜细胞的分离培养方法及嗅鞘细胞(OECs)的免疫学特点。方法通过手术取成人嗅区黏膜7例,将其消化为单个细胞后采用差速贴壁法除去成纤维细胞。倒置显微镜下行形态学观察,并利用p75、S100、GFAP抗体对嗅鞘细胞进行免疫荧光化学染色,共焦显微镜下进行各种抗体阳性率的统计。结果共焦显微镜下可见嗅黏膜细胞中S100和p75阳性细胞多见,GFAP阳性细胞在嗅黏膜细胞中较少见。一般在同一细胞上可见S100和p75共同表达,而GFAP与S100、p75未见有共同表达现象;p75阳性细胞胞体大小和形态也大不相同。经统计S100和p75阳性细胞的平均百分率为(35.0±8.3)%。结论成功进行了成人鼻腔嗅区黏膜细胞的分离培养。
- 王洪美任玉水田国忠姜晓荣曹敬丽刘婧媛周长满黄红云
- 关键词：嗅鞘细胞P75S100细胞移植
