何淑芳
- 作品数：10 被引量：37H指数：4
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 复方芪参提取物抗瘢痕疙瘩的TGF-β/Smad信号转导及MAPK通路调控机制
- 背景： 瘢痕疙瘩是一种以成纤维细胞过度增殖和胶原为主的细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)成分过度沉积为主要病理特征的皮肤纤维增生性疾病,其确切发病机制仍不清楚,目前尚无理想的治疗方法。因而,...
- 何淑芳
- 关键词：瘢痕疙瘩信号转导
- 文献传递
- 复方芪参提取物对瘢痕疙瘩成纤维细胞内Smad蛋白连接区的影响被引量：5
- 2010年
- 目的研究复方芪参提取物(CASE)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)内Smad蛋白连接区的影响。方法 MTT法检测CASE对新生牛血清(NBS)诱导的KFs增殖的影响;细胞免疫荧光染色法观察不同浓度(7.5、15、30mg/L)CASE对TGF-β1诱导的KFs内Smad2L和Smad3L蛋白磷酸化的影响;人体正常成纤维细胞(NFs)作为对照。结果 CASE(15、30、60mg/L)能够显著抑制NBS诱导的KFs的增殖,其IC50为18.90mg/L;TGF-β1能够诱导KFs内Smad2L和Smad3L蛋白磷酸化,而CASE(7.5、15、30mg/L)对这两种蛋白的磷酸化均具有明显的抑制作用,而TGF-β1对NFs中Smad2L和Smad3L蛋白表达无明显影响。结论 CASE能够抑制KFs细胞的增殖,其作用机制可能与抑制Smad2连接区和Smad3连接区磷酸化有关。
- 黄维娟何淑芳杨雁周伏圣方巧云杨森张学军
- 关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞转化生长因子-Β1SMAD蛋白质类
- 抗肝硬化复方在体外对星状细胞增殖和胶原合成的抑制作用被引量：1
- 2008年
- 目的研究抗肝硬化复方（BJ-JN）在体外对活化星状细胞（HSC）增殖和胶原合成的抑制作用，进一步探讨BJ-JN的作用机制。方法在引入血清药理方法的基础上，探讨BJ-JN在体外对混合新生小牛血清（NBS）＋大鼠血清（RS）和转化生长因子β1（TGF-β1）两种刺激因素作用下的HSC-T6细胞增殖和胶原合成的抑制作用。将不同时间点（2．5、3．5h）采集的BJ-JN含药血清作用于NBS和RS共同刺激下的HSC-T6，分别加入^3H-TdR和^3H-Pro，在液体闪烁计数仪上检测HST-T6细胞增殖和胶原合成。在5个不同的时间点（2～24h）将刺激浓度为9pmol／L的TGF-β1作用于HSC-T6，用四甲基偶氮唑（MTT）比色法测定吸光度值，确定TGF-β1刺激HST-T6的最适刺激时间。将不同浓度（0．19％～3．125％）BJ-JN含药血清作用于最适刺激时间、9pmol／L TGF-β1刺激条件下的HST-T6，用MTT比色法测定吸光度值并计算抑制率。结果与正常对照组比较，给药2．5和3．5h BJ-JN含药血清对NBS＋RS刺激的HSC-T6细胞增殖和胶原合成有显著的抑制作用。9pmol／LTGF-β1对HSC-T6细胞作用16h的刺激作用最强。不同浓度BJ-JN含药血清可显著抑制TGF-β1刺激的HSC-T6细胞增殖。结论BJ-JN含药血清在体外可以明显抑制HSC-T6细胞增殖和胶原合成。
- 方佳何淑芳杨林邹宇宏吴樱樱杨雁
- 关键词：转化生长因子Β
- 护肝片通过抑制肝纤维化而阻碍肝细胞癌发展被引量：5
- 2013年
- 目的探讨在DEN诱导的大鼠肝癌模型中,护肝片在肝纤维化—肝癌发展过程中所产生的影响。方法雄性SD大鼠90只随机分为二乙基亚硝胺(diethylinitrosamine,DEN)组,正常对照组,护肝片组(921 mg·kg-1)。DEN组和护肝片组给予0.2%DEN溶液灌胃,按体重10 mg·kg-1给药,每周5次,至14周,对照组给予溶媒。护肝片组同时灌胃(ig)给予护肝片溶剂(羟甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液配制),每日1次,直至16周。收集所有大鼠血液样本,进行血清学检测。通过病理组织学检查检测肝纤维化的程度。采用试剂盒检测肝组织中羟脯氨酸的含量。采用免疫组化法检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及胎盘型谷胱甘肽硫转移酶(Glutathione S-transferase placenta,GST-P)蛋白的表达。结果 DEN能够成功的诱导大鼠在12周发生肝纤维化,在16周发生肝癌。护肝片能够显著抑制肝纤维化—肝癌的发生。在12周时,护肝片能显著降低与肝功能相关的血清学指标以及α-SMA的过度表达,降低纤维化的程度。在16周时,护肝片能显著降低DEN诱导的大鼠肝癌的发生率和多样性。此外护肝片还能降低癌前病变指标γ-谷氨酰转肽酶(gamma-glutamyl transferase,GGT)和GST-P蛋白的表达。结论护肝片能够通过降低癌前病变指标GGT和GST-P的表达来阻止DEN诱导的肝癌的发生,同时也能减轻肝纤维化的程度,提示GGT与GST-P表达增强与肿瘤的发生密切相关,可能可以作为由纤维化进一步发展为肿瘤的标志,或者有可能成为预测肝癌发生的指标。
- 芮文娟何淑芳伍超胡祥鹏谢雷江洁美杨雁
- 关键词：肝纤维化
- DEN诱导大鼠肝纤维化-肝癌过程中pSmad3L和PAI-1蛋白的表达被引量：12
- 2012年
- 目的建立二乙基亚硝胺(diethylinitrosamine,DEN)诱导大鼠肝纤维化-肝癌模型,检测肝组织中磷酸化Smad3连接区(linker-phosphorylated Smad3)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1)蛋白的表达。方法♂SD大鼠50只随机分为DEN组和正常对照组,DEN组给予0.2%DEN溶液灌胃,每周5次至14周。对照组给予溶媒。分别于4、8、12、16周结束时处死动物。进行肝组织苏木精-伊红(HE)染色和Van Gieson(VG)胶原纤维染色;分别采用免疫组化法和Western blot法检测肝组织中pSmad3L及PAI-1蛋白的表达。结果对照组肝组织结构正常,DEN组4周时,肝细胞点状坏死及炎性细胞浸润;8周时,肝细胞严重脂肪变性、灶性坏死,门管区出现纤维组织增生;12周时,增生的胶原束包绕并分割肝小叶,正常的肝小叶结构被破坏,假小叶形成;到16周结束时,剩余存活大鼠均形成肝癌,肝癌细胞排列成条索状或团块状,异型性明显。免疫组化结果显示,pSmad3L和PAI-1在正常肝组织中几乎无表达,DEN组4周时肝组织中有少量阳性表达,8周和12周表达量逐渐增强,到16周时达到高峰,尤其是在肿瘤边界区域肝组织的pSmad3L和PAI-1表达更强。Westernblot结果显示,pSmad3L和PAI-1表达也逐渐增强,与免疫组化结果基本一致。结论 DEN诱导大鼠肝纤维化-肝癌动态过程中,pSmad3L和PAI-1蛋白的表达逐渐增强,提示其损伤机制可能涉及TGF-β/Smads/PAI-1通路。
- 芮文娟何淑芳黄先甲方政杭欣李前进胡敏杨雁
- 关键词：肝纤维化肝癌纤溶酶原激活物抑制剂-1WESTERNBLOT
- Cav-3/ERK信号通路在吗啡预处理减轻慢性心力衰竭大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用:离体实验
- 2022年
- 目的:探讨小窝蛋白(Cav-3)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在吗啡预处理减轻慢性心力衰竭大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法:清洁级健康雄性成年SD大鼠,体重200~250 g,结扎冠状动脉左前降支6周制备慢性心力衰竭模型。取慢性心力衰竭和Langendorff灌注模型制备成功的大鼠心脏36个,采用随机数字表法分为4组(n=9):心肌缺血再灌注组(IR组)、吗啡预处理组(MP组)、吗啡预处理+甲基-β-环糊精组(MP+MβCD组)、甲基-β-环糊精对照组(MβCD组)。采用全心停灌30 min再灌注120 min的方法建立离体心脏全心缺血再灌注损伤模型。MP组于平衡灌注15 min后灌注含1μmol/L吗啡的K-H液进行预处理,灌注5 min后改为K-H液灌注5 min,3个循环共计30 min,处理结束后全心停灌30 min再灌注120 min。MP+MβCD组于吗啡预处理前10 min灌注含200μmol/L甲基-β-环糊精的K-H液,其余操作同MP组。MβCD组:于全心停灌前40 min灌注含200μmol/L甲基-β-环糊精的K-H液,其余操作同IR组。于平衡灌注15 min(T_(0))、再灌注5 min(T_(1))、10 min(T_(2))时收集冠状动脉流出液,采用化学比色法检测LDH活性。再灌注120 min时,测定心肌梗死体积(IS)、缺血危险区体积(AAR),计算IS/AAR;采用Western blot法检测心肌组织Cav-3、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达水平,计算p-ERK1/2/ERK1/2比值。结果:与IR组比较,MP组IS和IS/AAR降低,冠状动脉流出液LDH活性降低,心肌组织Cav-3表达上调,p-ERK1/2/ERK1/2比值升高(P<0.05),MβCD组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与MP组比较,MP+MβCD组IS和IS/AAR升高,冠状动脉流出液LDH活性升高,心肌组织Cav-3表达下调,p-ERK1/2/ERK1/2比值降低(P<0.05)。结论:吗啡预处理减轻慢性心力衰竭大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制可能与激活Cav-3/ERK信号通路有关。
- 郭成晓金世云金世云胡旭东胡旭东张野
- 关键词：吗啡MAP激酶信号系统
- MAPK通路调控下经TGF-β1/Smad信号途径的瘢痕疙瘩发病机制研究
- 瘢痕疙瘩是一种以细胞外基质(extracellular matrix,ECM)成分,尤其是胶原组织过度沉积导致的纤维增生性疾病,但其病因及发病机制仍不清楚。目前研究认为转化生长因子β(Transforming growt...
- 何淑芳
- 关键词：瘢痕疙瘩SMAD促分裂原活化蛋白激酶纤溶酶原激活剂抑制剂-1
- 文献传递
- 复方黄芪提取物抗肝癌HepG2细胞侵袭作用及其机制
- 目的探讨复方黄芪提取物(CAE)体外对 TGF-β刺激肝癌 HepG2细胞侵袭的作用及其经由 TGF-β/Smads 信号介导的作用机制。方法采用浸润小室镜下计数细胞的方法,检测 CAE(40 mg·L)对 TGF-β(...
- 杨雁王玉美方佳何淑芳陈敏珠
- 关键词：转化生长因子-ΒSMADHEPG2细胞
- 文献传递
- 应用SYBR荧光实时定量RT-PCR法检测TGF-β1诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞中PAI-1mRNA表达被引量：3
- 2009年
- 目的应用SYBR荧光实时定量RT—PCR法检测转化生长因子-β1（transforming growth factor betal，TGF-β1）诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞（keloid fibroblasts，KFS）中纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activator inhibitor1，PAI-1）mRNA的表达。方法体外分离培养KFs，应用不同浓度（1．25～20pmol·L-1）TGF-β1刺激KFs3h或TGF-β1（10pmol·L-1）刺激KFs不同时间（0．5～6h），采用SYBRGreenI荧光实时定量RT—PCR法检测，以B—actin基因作为内参，计算各组PAI-1mRNA的相对表达量。结果与空白对照组相比，TGF-β1能明显诱导KFs中PAI-1mRNA的表达，10、20pmol·L-1浓度组表达比值分别增至4．19及4．44倍（P〈0．01）；TGF-β1（10pmol·L。）的1、2h时问组表达比值分别增至2．29及2．41倍（P〈0．05），3、6h时间组分别增至4．19及5．83倍（P〈0．01）。提示，TGF-β1诱导KFs中PAI=1mRNA表达的最适浓度为10pmol·L-1、最适时间为3h。结论利用SYBR荧光实时定量RT—PCR法检测TGF-β1诱导KFs中PAI-1mRNA的表达，为进一步研究瘢痕疙瘩中TGF-β1信号通路的靶基因调控机制，以及开发治疗瘢痕疙瘩的新药提供了基础。
- 何淑芳杨林黄维娟杨雁周伏圣方巧云张安平杨森张学军
- 关键词：瘢痕疙瘩纤溶酶原激活物抑制剂-1
- 黄芪有效部位群对大鼠肌成纤维细胞增殖移行及胞内Smads蛋白磷酸化的影响被引量：4
- 2008年
- 目的研究黄芪有效部位群（effective fractions of astragalus，EFA）对转化生长因子-β1（transforming growth factorbeta1，TGF-β1）诱导的大鼠肌成纤维细胞（myofibroblast，MFB）增殖、移行及胞内Smads蛋白磷酸化的影响。方法采用MTT法观察EFA不同浓度对新生小牛血清（NBS）或TGF-β1诱导的MFB细胞增殖的影响；浸润小室法观察EFA对TGF-β1诱导的MFB细胞移行的影响；免疫吸附和Westem blot法研究EFA对TGF-β1诱导的MFB细胞内Smads蛋白磷酸化的影响。结果EFA（10-160mg·L^-1）呈浓度依赖性抑制NBS及TGF-βl诱导的MFB细胞增殖；EFA（80mg·L^-1）能明显抑制TGF-β1诱导的MFB细胞移行；EFA（10-80mg·L^-1）呈浓度依赖性抑制TGF-β1诱导的MFB细胞内Smad2C、Smad2L蛋白磷酸化，但各组间Smad2／3蛋白表达水平无差别。结论EFA通过干扰TGF-β／Smad信号转导通路而抑制MFB细胞的增殖、移行从而起到抗肝纤维化的作用。
- 何淑芳梁佳玉方佳杨林杨雁张学军
- 关键词：肌成纤维细胞SMAD
