冯颖
- 作品数：16 被引量：91H指数：6
- 供职机构：北京医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转染早老素1突变基因SH-SY5Y细胞凋亡的研究被引量：1
- 2002年
- 目的 探索转染早老素 -突变基因导致 SH-SY5 Y细胞凋亡的机制。方法 用 Xba I和 Acc6 5 I内切酶将携带野生型和突变型 PS-1的 p Bluescript质粒双酶切 ,电泳后纯化其 c DNA片段 ,然后将其克隆到 p CDNA3载体中。由脂质体介导将 p CDNA3空载体、携带有野生型和突变型 PS-1基因的 p CDNA3质粒分别转染到神经母细胞瘤细胞系 SH-SY5 Y细胞中。用蛋白印迹 ( Western blot)杂交检测其表达。用流式细胞仪 ( Coulter EpicsXL)检测在不同情况下不同细胞凋亡的百分率 ,荧光显微镜下观察碘化吡啶 ( PI)、Hoechst3334 2 ( Ho)双染的凋亡细胞的形态 ,并用分子生物学方法检测凋亡细胞的 DNA状况。结果 在无血清培养 2 4 h条件下含有空载体、野生型和突变型 ( A2 4 6 E) PS-1基因的 SY5 Y细胞凋亡百分率依次为 ( 6 .0 3± 2 .0 3)、( 8.34± 2 .4 1 )、( 2 6 .2±4 .6 )。用 SY5 Y细胞作为对照 ,其凋亡百分率为 ( 4 .2 2± 1 .89)。在 Aβ2 5 -35 ( 2 5 μmol/L)诱导下其凋亡百分率依次为 ( 2 4 .4± 3.6 )、( 2 7.7± 2 .5 )、( 5 0 .3± 8.3)。SY5 Y对照组为 ( 1 8.4± 3.1 )。比较显示含突变早老素 1基因细胞的凋亡程度明显升高 ( P<0 .0 0 1 )。结论 早老素 1基因突变导致神经细胞更容易在各种刺激下发生凋亡 ,
- 冯颖许贤豪彭丹涛张华乔立艳张星虎刘广志殷剑国红王红李宝林莫培生
- 关键词：ALZHEIMER病早老素突变
- 老年痴呆患者的危险因子载脂蛋白E4的研究被引量：9
- 2001年
- 目的 研究Alzheimer病 (AD)与载脂蛋白E(ApoE)基因ε4的相互关系 ,为AD的实验室诊断提供可能的外周生物学指标。方法 我们收集了 10 7例AD患者、68例血管性痴呆 (VD)患者及74例年龄、性别相匹配的健康对照组 (NDC)。均取外周血抗凝 ,酚、氯仿法提取DNA采用聚合酶链反应 (PCR)和限制性片段长度多态性 (RFLP)分析技术检测ApoE基因型。结果 AD患者中ApoEε4等位基因频率明显高于VD及NDC组 (P <0 0 1) ,而VD患者ε4等位基因频率与NDC组间差异无显著性 (P >0 0 5 )。在AD患者中 ,ε4纯合子基因型者的发病年龄较ε4杂合子基因型者明显年轻、ε4杂合子基因型携带者的发病年龄较非ε4基因携带者明显年轻 (P值均 <0 0 5 ) ,而VD患者的发病年龄与是否携带ε4等位基因无明显相关性。本研究还发现 3例携有ApoEε4 / 4基因型的家族性痴呆患者。结论 ApoEε4与AD密切相关 ,是AD的危险因子。
- 彭丹涛许贤豪冯颖朱济英
- 关键词：ALZHEIMER病痴呆载脂蛋白E类
- 重症肌无力胸腺单个核细胞白细胞介素-2、白细胞介素-10及其mRNA水平的变化被引量：13
- 2002年
- 目的 研究重症肌无力 ( myasthenia gravis,MG)患者胸腺是否存在辅助性 T细胞 ( Th)亚群的免疫活性紊乱。方法 利用亲和层析法自人腓肠肌纯化获得乙酰胆碱受体 ( ACh R)并进行了鉴定 ,然后用其作为特异性抗原 ,经体外培养刺激 5例 MG患者胸腺和外周血单个核细胞 ,酶联免疫吸附分析 ( ELISA)法检测上清液中白细胞介素 -2 ( IL-2 )、白细胞介素 -1 0 ( IL-1 0 )水平 ,狭缝印迹杂交法检测 MG胸腺及外周血 IL-1 0 m RNA的表达。结果 MG胸腺和外周血经 ACh R刺激后 ,其上清液 IL-2水平略高于对照组 ( P>0 .0 5 ) ,经 ELISA法和狭缝印迹杂交法发现 MG外周血 IL-1 0及其 m RNA表达水平均略高于对照组 ( P>0 .0 5 ) ,胸腺则明显高于对照组( P<0 .0 5 )。结论 MG发病过程中 IL-1 0的异常增高可能发生于转录或转录以上水平 ,其异常表达的机制有待于进一步研究。
- 刘广志许贤豪侯世芳张星虎黄文王永忠冯颖
- 关键词：重症肌无力胸腺
- 神经免疫性疾病的诊断技术进展
- 1999年
- 本文介绍了神经免疫性疾病诊断技术进展较快的几个方面,包括免疫学,神经影像,临床电生理检查方面的新进展。
- 刘广志王红许贤豪张华国红张星虎冯颖乔立艳
- 关键词：神经免疫性疾病免疫学检查电生理
- 散发性迟发型痴呆与遗传基因早老蛋白1的多态性分析
- 2000年
- 对2014例60岁以上老年人行痴呆流行病学调查。筛选出散发性迟发型痴呆(AD)患者32例,血管性痴呆(VD)患者21例,非痴呆(ND)32例。取其外周血抗凝,用酚、氯仿法提取DNA,应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术对遗传基因早老蛋白1(PS1)的多态性进行分析。结果AD、VD患者与ND者PS1的1/1、1/2、2/2基因频率依次为0.125、0.095、0.063和0.531、0.667、0.562及0.344、0.238、0.375。虽然PS1的1/1型频率及PS1-1等位基因频率降低,PS1的2/2型频率及PS1-2等位基因频率增高,但均无统计学意义(P>0.05)。认为PS1与散发性迟发型AD的发病无明显相关性。
- 朱济瑛徐文玲高颖徐玲玲许贤豪冯颖杨巍巍王建俊
- 关键词：遗传基因AD
- PCR技术在检测sp3基因表达和ApoE基因型中的应用被引量：1
- 2003年
- 目的 应用多聚酶链式反应 (PCR)技术检测多发性硬化 (MS)和老年性痴呆 (AD)的相关基因 sp3和Apo E。方法 分离 MS患者外周血单个核细胞 (PBMC) ,提取 RNA,反转录合成 c DNA第 1链 ,PCR扩增 sp3基因片段 ,应用反转录 -PCR(RT-PCR)技术在 RNA水平上检测 sp3基因在 MS患者 PBMC的表达情况 ;取 AD患者外周血 ,用低渗溶血法提取白细胞 ,酚 /氯仿法提取 DNA,应用 PCR-限制性片段长度多态性 (PCR-RFLP)分析技术检测 Apo Eε基因的多态性。结果 MS组 sp3阴性表达率 (4 5 % )明显高于对照组 (P <0 .0 1 )。AD患者的 Apo Eε2、ε3、ε4基因频率依次为 0 .0 67、 0 .70 0、 0 .2 3 3 ,AD患者的 Apo Eε4基因频率明显高于正常人。结论 汉族人 MS患者存在 sp3基因表达缺陷 ;Apo Eε4与 AD密切相关 ;PCR相关技术可作为基因研究的有力工具。
- 乔立艳许贤豪冯颖张华殷剑耿莹魏雪飞王红国红侯世芳文诗广刘江红矫毓娟
- 关键词：SP3APOEPCR-RFLP多发性硬化
- 新斯的明试验结果判定标准及其临床应用被引量：15
- 2000年
- 目的 新斯的明试验是诊断重症肌无力 (MG)的重要手段之一 ,但目前对试验结果的判定缺乏量化标准 ,本研究旨在确立此试验的准确评定方法。方法 54例确诊MG患者及 6例其他神经系统疾病患者给予甲基硫酸新斯的明 1 5mg及阿托品 1 0mg肌肉注射。儿童剂量酌减。各项指标在新斯的明注射前及注射后每10min测定 1次 ,注射后每 10min记录 1次该时与注射前数据的差值。试验结束后 ,每项求出注射后 6次记录值的均值 ,取均值小数点后 1位数作为该项的阳性界值。各项指标中只要有 1项阳性就定为新斯的明试验阳性。结果 该方法重复性好 ,经Kappa检验 ,K值均在 0 60以上 ;采用本判定标准 ,MG患者的敏感性为90 7% ,6例非MG患者无 1例阳性 ,特异性为 10 0 %。结论 本研究确立的新斯的明判定标准为临床提供了一种客观、精确、可靠、稳定的诊断手段。
- 张星虎许贤豪刘广志冯颖国红张华文诗广蒋云王红
- 关键词：重症肌无力
- Alzheimer病与遗传基因载脂蛋白E的多态性分析被引量：5
- 2000年
- 目的 进一步探讨Alzheimer病 (AD)与载脂蛋白E(ApoE)的关联性。 方法 通过对济南铁路地区 2 0 14名 60岁以上的老年人进行痴呆流行病学调查 ,随机选出AD患者 3 6例、血管性痴呆患者 (VD) 2 7例和非痴呆老人 (ND) 3 6例 ,取外周血抗凝 ,酚、氯仿 /异戊醇法提取DNA ,应用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性分析(PCR RFLP)技术对ApoE基因的多态性进行分析。 结果 AD、VD患者与ND的ApoEε4、ε3、ε2的等位基因频率依次为 0 2 5 0、0 681、0 0 69和 0 0 74、0 83 3、0 0 93及 0 0 5 6、0 889、0 0 5 6。AD患者的ApoEε4基因频率显著高于对照组 (P <0 0 1) ,ApoEε3基因频率明显低于对照组 (P <0 0 5 )。不含、含 1个、含 2个ApoEε4 AD的患病率分别为 2 7 6%、60 0 %、10 0 %。随ApoEε4基因剂量的递增AD的发病年龄提前。 结论 ApoEε4在AD中增高具有较高的特异性 。
- 朱济瑛徐文玲高颖徐玲玲许贤豪冯颖王建俊
- 关键词：ALZHEIMER病基因载脂蛋白E多态性分析
- 重症肌无力患者对糖皮质激素的敏感性与糖皮质激素受体的关系被引量：5
- 2000年
- 目的 了解重症肌无力 (MG)患者对糖皮质激素 (GC)敏感性与糖皮质激素受体 (GR)的关系。方法 观察 10例MG患者及 10名健康对照。采用 3H 地塞米松 ( 3H DEX)放射配体法测定外周血单个核细胞 (PBMC)GR。分别用植物血凝素 (PHA)、髓鞘碱性蛋白 (MBP)、乙酰胆碱受体 (AChR)刺激PBMC ,3H TdR掺入法检测体外淋巴细胞增殖反应 ,地塞米松 (DEX)抑制淋巴细胞增殖反应。结果 正常对照及MG患者PBMC对PHA及MBP刺激的增殖反应差别不显著 (P >0 0 5)。而MG患者PBMC对AChR的反应明显高于正常对照者 (P <0 0 1)。DEX对MG患者PBMC特异性增殖反应的抑制率为 4 2 14% ,而对正常对照PBMC的增殖反应的抑制率为 2 1 62 % ,两组间有很显著区别 (P <0 0 1)。GR数与DEX抑制率间有很良好的相关关系 (r =0 94 3,P <0 0 1)。结论 MGPBMCGR数与体外DEX对PBMC特异性增殖反应的抑制效应有良好的一致性。DEX对抗原特异性淋巴细胞增殖反应的抑制性可作为了解MG患者对GC敏感性的一项指标。
- 张星虎许贤豪王红国红张华殷剑冯颖刘广志李宝林
- 关键词：重症肌无力糖皮质激素受体淋巴细胞增殖反应
- 老年性痴呆致病基因早老素1突变作用机制的研究被引量：1
- 2003年
- 目的研究阿尔茨海默病(AD)致病基因早老素(PS)突变导致AD的可能发病机制。方法 利用PS神经细胞模型,应用细胞内钙拮抗剂及抗氧化剂处理细胞后检测细胞凋亡及细胞内钙水平。结果 4种细胞在自然状态下细胞内钙及凋亡程度差异无显著性(P>005) 经β淀粉样蛋白(Aβ)的诱导 含突变PS1细胞凋亡的百分率及细胞内钙浓度较其他3组显著升高(P<001)。4种细胞经金纳多或尼莫地平处理后 含突变的PS1细胞内钙浓度及凋亡率较其他3种细胞差异无显著性(P>005)。突变PS1细胞内钙浓度变化与细胞凋亡程度呈正相关(P<001)。结论 突变PS1导致AD的可能机制是:突变的PS1促进细胞内钙超载、提高细胞内氧化应激反应 从而导致细胞凋亡增加;;加速了老年性痴呆患者细胞的退行性变。
- 彭丹涛许贤豪冯颖彭乐
- 关键词：老年性痴呆致病基因早老素1基因突变细胞凋亡Β淀粉样蛋白
