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蓝舌病系列检测技术: ＜正＞蓝舌病（Bluetongue,BT）是一种经吸血昆虫传播,引起反刍动物疫病的急性病毒性传染病,被世界动物卫生组织（OIE）列为上报疾病（以前为A类传染病）,我国列为一类动物疫病。蓝舌病对动物和动物制品国际间贸易具有...; 尹惠琼杨姝刘松婷贾茗娴张立营李文超章金刚; 关键词：蓝舌病蓝舌病病毒核酸检测单克隆抗体酶联免疫吸附法; 文献传递

蓝舌病病毒荧光定量RT-PCR检测技术被引量：9: 2009年; 蓝舌病是一种侵害反刍动物的虫媒传染病,被世界动物卫生组织(Office International des Epizooties,OIE)列为上报疾病,我国将其列为一类动物疫病。本研究利用计算机软件分析获取蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)核酸检测的保守靶序列,设计引物和TaqMan荧光探针,建立了BTV荧光定量RT-PCR技术,进行了特异性、敏感性、重复性等实验评价,并对动物样品进行检验。结果显示,该技术可有效检出不同血清型BTV,与流行性出血病病毒(Epizootic hemorrhagic disease virus,EHDV)无交叉反应;对RNA标准品的检测灵敏度为102copies;重复检测CV<5%,可对动物样品进行有效检测。因此,所建立的BTV TaqMan/荧光定量RT-PCR技术可为蓝舌病诊断提供一种快速、可靠的病原检测手段。; 尹惠琼张红刘松婷杨姝史利军张改平章金刚; 关键词：蓝舌病病毒实时定量RT-PCR

甲型H1N1流感病毒核酸荧光定量RT-PCR检测技术被引量：4: 2010年; 目的:建立基于TaqMan荧光探针技术的甲型H1N1流感病毒实时定量RT-PCR方法。方法:分析H1N1流感病毒基因特性,根据新发甲型H1N1流感病毒突变基因片段设计检测引物和TaqMan荧光探针,建立荧光定量RT-PCR检测体系,体外转录制备RNA标准品,进行特异性、敏感性、重复性及盲样检测评价实验。结果:可特异性有效检测新发甲型H1N1流感病毒核酸,与H1～H16流感病毒基因无交叉反应;对RNA标准品的检测敏感性达103拷贝/μL;重复性实验中,阳性标准品Ct值变异系数(CV)<10%,阴性标准品检测结果均呈阴性;12份盲样检测结果特异性好。结论:该荧光定量RT-PCR方法可作为甲型H1N1流感防控的病原快速诊断技术。; 尹惠琼刘松婷史利军杨姝章金刚; 关键词：甲型H1N1流感病毒大流行

生物条形码检测技术及其研究进展被引量：4: 2010年; 生物条形码检测技术是利用磁场作用收集"金纳米颗粒-被检物-磁性微球"复合物,再释放其中的条形码链,然后可选用多种方法对条形码链进行下一步检测。生物条形码检测技术在蛋白质及核酸的检测方面显示出极高的灵敏度,在不依赖酶反应的情况下,检测蛋白质可以达到10-18mol水平,同时在核酸检测方面也能达到PCR反应的灵敏度。该技术是一种新型的诊断技术,在临床诊断方面有着广泛的应用前景。; 刘松婷尹惠琼贾茗娴章金刚; 关键词：灵敏度蛋白质核酸

甲型H1N1流感病毒核酸荧光定量RT-PCR检测技术: 目的：建立基于TaqMan荧光探针技术的甲型H1Nl流感病毒实时定量RT-PCR方法。方法：分析H1N1流感病毒基因特性，根据新发甲型H1N1流感病毒突变基因片段设计检测引物和TaqMan荧光探针，建立荧光定...; 尹惠琼王升启刘松婷史利军章金刚; 关键词：甲型H1N1流感病毒荧光定量RT-PCR 病原诊断; 文献传递

甲型H1N1流感病毒核酸荧光定量RT-PCR检测技术: ＜正＞2009年3月墨西哥首发甲型H1N1流感病例,并在世界各地迅速蔓延。截至2009年8月6日,已报告170多个国家发现此流感病例177457例,造成1462人死亡。6月11日WHO将该流感大流行警告级别提高至6级。我...; 尹惠琼刘松婷史利军杨姝章金刚; 关键词：甲型H1N1流感病毒大流行荧光定量RT-PCR; 文献传递

结核分枝杆菌Ag85B和ESAT-6基因重组产单核细胞李斯特菌的构建被引量：2: 2009年; 对编码结核分枝杆菌抗原Ag85B和ESAT-6的基因片段进行了扩增,并将其克隆入穿梭载体pKSV7,利用基因同源重组技术构建了表达结核分枝杆菌抗原Ag85B和ESAT-6的重组产单核细胞李斯特菌(LM)。结果表明,外源基因成功整合入LM基因组并获得转录;Western-blot分析结果显示,重组菌携带的外源基因在动物体内能够表达;溶血试验与细胞感染试验表明,较之野生型李斯特菌,外源基因的插入破坏了重组菌LM(pKSV7-H85-6B)的溶血活性,显著降低了对细胞的侵袭能力。证实,携带结核分枝杆菌保护性抗原Ag85B和ESAT-6的重组李斯特菌对结核病新型疫苗的研究具有潜在应用价值。; 董慧焦新安殷月兰田德斌潘志明刘松婷方丽君; 关键词：结核分枝杆菌产单核细胞李斯特菌同源重组

甲型H1N1流感病毒核酸荧光定量RT-PCR检测技术: 本文分析了H1N1流感病毒基因，根据新发甲型H1N1流感病毒突变基因片段设计了检测引物和TaqMan荧光探针，建立了实时荧光定量RT-PCR检测方法，进行了特异性、敏感性等方法学评价实验。结果显示，此荧光定量RT-PCR...; 尹惠琼刘松婷史利军杨姝章金刚; 关键词：甲型H1N1流感流感病毒基因检测荧光定量RT-PCR检测; 文献传递

γ-辐射与常规方法灭活产单核细胞李斯特菌对小鼠免疫原性的比较被引量：3: 2009年; 【目的】以产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)为模式菌,比较γ-辐射及常规的热灭活、甲醛灭活制备的灭活李斯特菌对小鼠的免疫原性。【方法】以γ-辐射、热灭活和甲醛灭活法分别制备灭活的LM;腹腔注射BALB/c小鼠,ELISA检测各组灭活菌产生的抗体水平;观察野生型LM攻击后各组的保护效果,动态监测体内带菌情况;流式细胞仪分选免疫小鼠T细胞,以T细胞转移实验评价辐射灭活的LM产生的免疫应答。【结果】辐射灭活组、热灭活组和甲醛灭活组产生的抗体水平分别为:1∶1280,1∶640,1∶160;野生型细菌攻击后这3种灭活菌产生的保护率分别为:100%、35%、30%,其中免疫辐射灭活菌的小鼠能够较快清除攻击的细菌;辐射灭活李斯特菌能够激发产生T细胞保护性免疫应答。【结论】较之传统的灭活方法,利用γ-辐射制备的灭活LM免疫小鼠后能够产生较好的保护效果。; 董慧焦新安潘志明殷月兰孙林刘松婷; 关键词：产单核细胞李斯特菌 Γ-辐射灭活菌

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刘松婷