刘莹
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组李斯特细菌载体HIV疫苗LmHIV CN54 gag的培养温度及免疫剂量与其毒力及免疫原性的关系研究
- 刘莹刘芳王荣敏刘颖邵一鸣王书晖
- 重组痘苗病毒HIV疫苗肌注初免蛋白疫苗滴鼻加强后激发高强度黏膜IgA应答反应被引量：1
- 2015年
- 目的研究痘苗病毒载体HIV疫苗和蛋白疫苗联合运用所激发的黏膜免疫应答，探讨不同途径免疫产生黏膜免疫应答的异同，进一步证实MF59佐剂在激发疫苗黏膜免疫应答方面的效果。方法以表达HIV-1中国流行株CN54 Gag—Pol—Env基因的重组痘苗病毒天坛株rTV，重组HIV-1膜蛋白gp140三聚体为抗原，辅以水包油型佐剂（oil—in—water）MF59，在小鼠模型上，通过不同免疫途径组合联合免疫BALB／c小鼠，即重组痘苗病毒初免，免疫途径为滴鼻或肌注，gp140与MF59混合物加强免疫，免疫途径为滴鼻、肌注或皮下，探讨能诱导高效黏膜免疫应答的免疫策略。通过ELISA方法对小鼠血清中HIV-1特异性的IgG和IgA及唾液和阴道分泌物中IgA进行检测。结果MF59是一种良好的黏膜佐剂，能显著增强HIV蛋白疫苗的黏膜免疫应答，所激发的黏膜IgA滴度与鞭毛素蛋白（SF）和霍乱毒素B亚单位（CTB）的黏膜佐剂活性相当；重组痘苗病毒初免（肌注），gp140与MF59加强（滴鼻）联合免疫策略能诱导高水平的血清IgA和黏膜IgA抗体（P〈0．05），其抗体滴度分别高达1：15000和1：600。结论重组痘苗病毒天坛株rTV系统途径免疫小鼠后蛋白疫苗黏膜途径加强能激发高强度黏膜免疫应答，这一免疫策略及组合可为阻断通过口腔和阴道黏膜传播的艾滋病疫苗研究提供参考。
- 刘芳刘莹王荣敏邵一鸣刘颖王书晖
- 关键词：HIV疫苗重组痘苗病毒蛋白疫苗
- HIV-1疫苗prime-boost策略免疫间隔研究被引量：3
- 2013年
- 目的探索不同的DNA、重组痘苗病毒、蛋白疫苗免疫间隔在HIV-1疫苗prime-boost策略中对免疫效果的影响,为建立最佳免疫方案提供理论支持。方法对小鼠进行3针DNA初免,之后分别间隔3周、6周、12周、16周免疫重组痘苗病毒VTKgpe;对小鼠或兔子进行3针DNA初免,间隔16周免疫VTKgpe,之后分别间隔4周或8周免疫gp140蛋白。末次免疫后2周检测HIV-1特异性体液或细胞免疫应答。结果 DNA初免-VTKgpe加强间隔16周效果最佳,诱导的HIV-1 Env特异性抗体滴度达到105,分泌IFN-γ的T细胞数为5 966.4/106细胞。DNA初免,间隔16周VTKgpe加强,之后间隔4周或8周gp140蛋白加强效果差异无统计学意义。结论 DNA疫苗初免,16周后VTKgpe加强,4周后gp140蛋白加强可诱导较高的免疫应答,同时更为适宜临床试验及商业化应用的需要。
- 张舟齐智刘颖刘莹凌大伟康延申陈仙子张其程李勋邵一鸣
- 关键词：DNA疫苗痘苗病毒天坛株
- 痘苗病毒天坛株C8L—K3L片段缺失表达载体的生物学性能研究
- 2013年
- 目的研究缺失C8L．K3L片段的痘苗病毒天坛株载体的生物学性能及外源基因的免疫原性。方法构建缺失C8L-K3L区域的重组痘苗病毒天坛株载体VrITT△c8-K3-gag。在4种细胞上检钡0了重组载体的增殖能力、在小鼠和家兔模型上进行毒力评价，并在BALB／c小鼠进行了免疫效果评价。结果与Vrrr相比，VTTAC8-K3-gag在CEF、BHK-21、HeLa细胞中复制能力显著下降，在Vero细胞中失去复制能力。VTYAC8-K3-gag在小鼠和家兔模型中毒力均有显著降低。VTT△C8-K3-gag免疫小鼠第4周后诱导的痘苗病毒特异结合抗体与中和抗体滴度分别达到5．6×10^3和1．0×10^4，第9周滴度弦到5．8×10^5和5．25×10^3，与VTKgpe相比均显著下降3～9倍，但E3刺激后的细胞免疫应答无显著变化。VTT△C8-K3-gag单独免疫或与DNA疫苗联合免疫诱导的HIV特异性抗体水平和细胞免疫应答均与VTKgpe无差异。结论VTrAC8-K3-gag是一个安全性较高且具有深入研究价值的HIV候选疫苗株。
- 刘铮刘颖王书晖张其程刘莹侯爵王荣敏邵一鸣
- 关键词：痘苗病毒天坛株毒力免疫应答
- C D4＋T 细胞剔除对复制型重组痘苗病毒免疫原性及毒力的影响
- 2014年
- 目的：探讨CD4＋T细胞剔除对复制型重组痘苗病毒免疫原性及毒力的影响。方法BALB／c小鼠经腹腔注射CD4单克隆抗体剔除CD4＋T细胞后，尾部划痕接种重组痘苗病毒rTV或天坛株VTT，同时设正常小鼠对照。免疫后定期观察小鼠体重变化和接种部位痘斑变化，并检测病毒排出量和CD4＋T细胞比例。免疫后第28天处死小鼠，检测小鼠体液和细胞免疫，取卵巢组织检测病毒滴度。结果 CD4＋T细胞剔除小鼠和正常小鼠在接种rTV或VTT后均出现典型的种痘后局部反应，但均未出现次级或卫星病损。 CD4＋T细胞剔除小鼠的痘斑愈合时间、病毒排出时间及体重恢复时间均长于正常小鼠。 CD4＋T细胞剔除小鼠和正常小鼠的卵巢中均未检测出痘苗病毒。 CD4＋T细胞剔除小鼠的HIV抗体和痘苗病毒抗体平均A值分别为0．119和0．168，显著低于正常小鼠的平均A值（P＜0．05，P＜0．01）。 McAb／rTV组的痘苗病毒中和抗体滴度几何均值为1∶321，显著低于rTV组1∶1286（P＜0．05）。 McAb／rTV组诱导的痘苗病毒特异性IFN-γ＋／CD4＋T效应细胞百分比均值为0．654％，显著低于rTV组（P＝0．0004），但IFN-γ＋／CD8＋T效应细胞百分比与rTV组的差异无统计学意义。结论剔除CD4＋T细胞的小鼠能有效控制重组痘苗病毒的复制和播散。 CD4＋T细胞的剔除显著降低了体液免疫应答和CD4＋T细胞免疫应答，对CD8＋T细胞免疫应答无显著影响。
- 刘颖王书晖刘莹彭虹刘畅邵一鸣
- 关键词：CD4+T细胞CD8+T细胞病毒清除免疫原性
- IL-15基因佐剂对DNA初始-重组痘苗病毒加强免疫效果的影响被引量：2
- 2012年
- 目的比较IL-15在DNA疫苗初始和重组天坛痘苗病毒加强免疫阶段对免疫原性的影响。方法应用PCR方法构建重组片段I8R-pE/L-IL-15-GFP-G1L,通过同源重组将IL-15基因插入到表达HIV-1CN54Gag,Pol和Env基因的重组天坛艾滋病疫苗rTV的基因组中。HIV DNA疫苗在0、3、6周与质粒pIL-15共免疫BALB/c小鼠,或仅使用DNA疫苗,rTV和rTV-IL-15在12周分别进行加强免疫。末次免疫后1、4周应用ICS和ELISPOT方法检测小鼠脾淋巴细胞中HIV特异性细胞免疫。末次免疫后1、4周和12周ELISA方法检测小鼠血清中Gp120特异性抗体。结果 IL-15基因正确插入重组天坛艾滋病疫苗rTV基因组中,成功构建了重组病毒rTV-IL-15。各组免疫小鼠均诱导出HIV特异性细胞和体液免疫。尽管各组诱导的HIV特异性CD8+T细胞免疫反应差异无统计学意义,但加强免疫后4周,DNA-IL-15/rTV-IL-15组分泌IFN-γ、TNF-α以及IFN-γ/TNF-α双因子的CD8+T效应记忆细胞百分比均值显著高于DNA-IL15/rTV组(P<0.05),分别为0.86%,0.37%和0.31%。DNA/rTV-IL-15组的gp120抗体滴度在加强免疫后1周即达到1∶40 381,显著高于DNA-IL-15/rTV组和DNA-IL-15/rTV-IL-15组(P=0.000 1,P=0.020 5),且抗体滴度持续至12周未见明显下降。而DNA-IL-15/rTV组和DNA-IL-15/rTV-IL-15组的抗体滴度则从加强免疫1周后逐渐上升,在12周达到高峰(1∶11 143,1∶16 889),DNA-IL-15/rTV组4周和12周的抗体滴度显著高于1周(P=0.009,P=0.012)。结论在初始和加强免疫阶段使用IL-15佐剂可以提高CD8+T效应记忆细胞应答水平。
- 田美娟刘莹刘铮彭虹马燕邵一鸣刘颖
- 关键词：白细胞介素15
