目的:探讨高迁移率蛋白1(high mobility protein box1,HMGB1)与活化T细胞核因子2(nuclearfactor of activating T cells2,NFAT2)之间的直接相互作用。方法:首先观察HMGB1与NFAT2在细胞外的相互作用,构建pET28a(+)-HMGB1、pGEX-KG-NFAT2质粒,应用网织红细胞系统进行体外翻译得到带有放射性硫同位素35S的His-HMGB1融合蛋白。应用蛋白纯化技术得到的GST-NFAT2融合蛋白,利用GST-pulldown实验检验二者在体外是否可直接结合;然后观察HMGB1与NFAT2在细胞内能否直接结合,构建HMGB1和NFAT2的真核表达质粒,共同转染人胚胎肾293T细胞系,刺激之后裂解细胞,应用相应的抗体进行免疫共沉淀检测,观察二者在细胞内直接结合的情况。结果:利用GST-pull down实验及免疫共沉淀实验证实,HMGB1全长蛋白与NFAT2全长蛋白在细胞内、外有直接结合的条带,而对照组没有结合条带,说明HMGB1可与NFAT2特异性结合。结论:HMGB1与NFAT2之间存在直接相互作用。
重症医学在我国发展较为滞后,多数重症医学科医生来自于其他专业,缺乏重症医学专业知识及临床实践经验。建立完善、科学、有效的重症医学科进修生管理和培养模式对于进一步提高危重症救治专业人才的水平至关重要。我科室通过总结多年的进修生教学经验,以"病例分析学习(case based learning,CBL)+多学科协作(multiple department team,MDT)"教学模式为主导,以病例幻灯竞赛为契机激发进修医生学习的主观能动性;以专业英语为特色;重视临床科研教学;制定规范化培训制度,实行导师负责制,开展定期考核。显著提高了重症医学科进修生的医疗及科研水平。
在危重症医学的临床带教教学中,改进教学方法,将传统的授课带教改为及时病例分析学习(case based learning,CBL)+多学科协作(multiple department team,MDT)教学模式,选取38名进行CBL+MDT教学法教学的进修生及轮转生作为实验组,与既往36名经传统教学的进修生和轮转生作为对照组进行比较。实验结果表明实验组出科理论成绩和床旁分析病例成绩均优于对照组(P<0.05),实验组对新教学模式的评价优于对照组对传统模式的评价(P<0.05),说明CBL+MDT教学模式具有较大的优势,值得推广。
