卢银平
- 作品数：50 被引量：94H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 习惯性流产孕妇巨细胞病毒pp65抗原检测的临床意义
- 2006年
- 目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染与习惯性流产(RPL)的关系。方法:采集习惯性流产孕妇和正常产前体检孕妇外周血,分离外周血单个核细胞(PBMCs)和血浆,分别用免疫荧光法和实时定量PCR检测HCMV pp65抗原和HCMV-DNA,并比较2种方法的一致性。结果:46例RPL患者HCMV pp65抗原有14例阳性,阳性率30.4%,50例正常体检孕妇HCMV pp65抗原有4例阳性,阳性率8%,2组孕妇HCMV活动性感染率有显著性差异(2χ=6.76,P<0.01)。孕妇HC-MV pp65抗原阳性率升高,孕妇流产几率增加(2χ=6.39,P<0.01)。免疫荧光法和实时定量PCR有较好的一致性(93.5%)。结论:习惯性流产孕妇HCMV活动性感染率显著高于正常孕妇,HCMV pp65抗原检测可作为RPL早期诊断指标之一。
- 卢银平董继华刘朝曹伟
- 关键词：习惯性流产巨细胞病毒PP65抗原免疫荧光定量PCR
- 乙型肝炎病毒核心抗原单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用
- 2006年
- 单克隆抗体是由识别一种抗原表位的B细胞产生的同源性抗体，具有特异性强、纯度高、效价高、无或少血清学交叉反应等优点，在临床和科研中得到了广泛应用。目前对乙型肝炎病毒的相关发病机制还在进一步探索，特别是在建立动物模型方面还有很多问题需要解决，如土拨鼠肝炎病毒核心抗原是否与人源型的核心抗原存在交叉反应等等都需要尽快弄清楚。我们将原核表达截短型乙型肝炎病毒核心抗原（HBc144）纯化后免疫BALB／C小鼠，制备出了抗乙型肝炎病毒核心抗原的两株单克隆抗体，并对其特异性、亲和力、抗原表位等性质进行了鉴定，
- 王蓉田拥军张振华李新宇张春燕卢银平游上游杨东亮
- 关键词：乙型肝炎病毒核心抗原单克隆抗体BALB/C小鼠土拨鼠肝炎病毒抗原表位发病机制
- HepG2．2．15细胞培养上清液中HBVDNA及其抗原的检测被引量：2
- 2006年
- 乙型肝炎病毒（HBV）是一种引起急性和慢性坏死炎症性肝病及肝细胞癌的DNA病毒。HBV具有特异嗜肝性、非细胞损伤与裂解、易发展为慢性等特征。HepG2．2．15细胞是能够表达HBV抗原和分泌完整HBV颗粒的肝胚瘤细胞系，也是目前用来研究HBV复制．肝细胞对干扰素（IFN）应答最为合适的细胞模型系统。
- 管世鹤卢银平刘华平
- 关键词：HEPG2.2.15细胞细胞培养上清液HBVDNAHBV抗原DNA病毒
- 慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞IL-12和α干扰素受体1的检测及意义
- 2006年
- 全球约有3．5亿人血清中携带乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原，中国的HBV感染情况尤其严重，携带率高达109，6以上。目前临床治疗慢性乙型肝炎的主要方法依然是干扰素（IFN）结合核苷类药物，虽然重组干扰素的应答率经过多年来不断的技术改进而有所增强，但患者的反应率还是不能令人满意。慢性乙型肝炎患者对干扰素治疗应答出现差异的原因还不十分清楚，为此我们试图从机体自身的外周血单个核细胞（PBMC）研究出现这种差异的机制，这里我们对用IFN-α治疗的不同慢性乙型肝炎患者PBMC分泌的IL-12和α干扰素受体1的表达作了检测和分析。
- 卢银平董继华刘朝管世鹤
- 关键词：慢性乙型肝炎患者IL-12Α干扰素外周血单核细胞受体1核苷类药物
- 现场检测中标本的抗凝和运送
- 2006年
- 现场检测（POCT）也称床边检测或就地检测，指在患者旁边进行的临床检测。通常不一定由临床检验师来操作，POCT的主要特点是不需要固定的检测场所，试剂和仪器是便携式的，并且可及时操作。由于能快速、简便和及时地检测患者的临床指标，缩短了患者治疗转换周期，有效地消除了一些试验的影响因素，其应用前景越来越广。POCT使用最多的是血液标本，其中一些检测对标本抗凝和运送有着严格的要求。下面就一些常见检测项目的血液标本抗凝和运送加以阐述。
- 卢银平董继华刘锡光
- 关键词：血液标本抗凝POCT检验师
- 土拨鼠白细胞介素15的克隆、表达和活性分析
- 2006年
- 目的对土拨鼠白细胞介素15(woodchuck interleukin 15,wIL-15)分子进行克隆、表达并鉴定其活性,为进一步研究IL-15在嗜肝病毒感染中的作用以及评价IL-15用于治疗慢性HBV感染奠定基础。方法用IL-15的保守引物将wIL-15基因克隆、测序并进行分析,构建wIL-15的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达,分离纯化后用淋巴细胞增殖试验检测其生物学活性。结果wIL-15的完整编码序列为489 nt(与其他哺乳动物IL-15编码序列的同源性高达78％-87％),编码162 AA长度的前体蛋白(与其他哺乳动物IL-15蛋白的同源性高达70％-80％),其信号肽为N端的48 AA,成熟蛋白由114 AA组成。土拨鼠IL-15与灵长动物IL-15的同源性高于啮齿动物。带有His-tag的成熟蛋白,可以在大肠杆菌中表达,分离纯化后,可以刺激Con A活化的小鼠脾细胞和土拨鼠PBMC增殖(其SI值可高达10以上),并存在明显的剂量依赖性。结论(1)wIL-15与其他哺乳动物IL-15高度同源,并且与灵长类动物的IL-15更接近。(2)wIL-15可以在大肠杆菌中表达,并在纯化后能刺激小鼠和土拨鼠淋巴细胞增殖,表现出较好的生物学活性。
- 王宝菊Beate Lohrengel卢银平Micheal Roggendorf陆蒙吉杨东亮
- 关键词：土拨鼠白细胞介素15
- 人hepcidin真核表达载体的构建及稳定转染细胞系的建立被引量：2
- 2010年
- 目的构建人hepcidin全长结构基因真核表达载体,建立稳定高表达hepcidin的HepG2细胞系,以应用于拮抗hepcidin从而增强铁吸收的活性药物筛选。方法化学合成结合PCR拼接hepcidin全长结构基因,插入原核表达载体pMD18-T中,测序正确后再经HindⅢ与EcoRⅠ双酶切,定向插入真核表达载体pcDNA3.0内,酶切鉴定后,采用脂质体转染法将重组质粒转染人HepG2细胞,G418选择抗性细胞克隆,ELISA检测转染细胞hepcidin的蛋白表达。结果经酶切鉴定,成功构建hepcidin真核表达载体pcDNA3-hepcidin;重组质粒转染HepG2,经G418筛选3周获得抗性细胞克隆,其hepcidin蛋白表达量为普通HepG2细胞表达量的3倍。结论成功构建了稳定高表达hepcidin的HepG2细胞,该稳定转染细胞系的建立为进一步研究hepcidin降低肠道铁吸收的分子机制以及筛选拮抗hepcidin作用的活性药物奠定了实验基础。
- 曾芳卢银平王凯平
- 关键词：真核表达稳定转染
- 替诺福韦体外抑制乙型肝炎病毒复制的研究被引量：2
- 2009年
- 目的观察抗乙型肝炎病毒(HBV)核苷类似物替诺福韦体外对HBV复制的抑制作用。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测药物对细胞的毒性作用。将乙型肝炎病毒复制子pHBV1.3质粒转染HepG2细胞,在转染细胞培养液中加入不同浓度的替诺福韦,然后在不同时间段观察替诺福韦的抗病毒作用。ELISA检测培养上清中HbsAg,HBeAg的表达,荧光定量PCR(FQ-PCR)定量检测培养上清中HBV DNA拷贝数,Southern blot分析转染细胞中HBV复制中间体。结果替诺福韦降低了培养上清中HbsAg,HBeAg水平及HBV DNA拷贝数,抑制了转染细胞中HBV复制中间体的形成。替诺福韦对HBV复制子体外复制的抑制作用依赖于药物浓度及作用时间。结论替诺福韦在体外对HBV复制有较强的抑制作用,有望用于临床治疗慢性乙型肝炎。
- 卢银平郭涛董继华刘朝陆蒙吉杨东亮
- 关键词：替诺福韦乙型肝炎病毒抗病毒
- 儿童抽动-秽语综合征HCMV pp65抗原检测的临床意义被引量：1
- 2006年
- 目的探讨儿童巨细胞病毒(Hum an cytom egalov irus,HCMV)活动性感染与抽动-秽语综合征(T ourette’s sym-drom e,TS)的关系。方法离心分离64例抽动-秽语综合征患儿和40例正常儿童外周血单个核细胞(PBM C s)和血浆,分别用免疫荧光法和定量PCR检测HCMV pp65抗原和HCMV DNA,并比较2种方法的一致性。结果64例TS患儿HCMV pp65抗原有14例阳性,阳性率21.9%,40例正常儿童HCMV pp65抗原有1例阳性,阳性率2.5%,2组儿童HCMV感染率有显著性差异(2χ=7.49,P<0.01)。免疫荧光法和实时定量PCR有较好的一致性(89.1%)。结论抽动-秽语综合征儿童HCMV感染率显著高于正常儿童,HCMV活动性感染可能诱发抽动-秽语综合征。
- 卢银平董继华刘朝
- 关键词：抽动-秽语综合征巨细胞病毒PP65抗原
- 替比夫定(素比伏)体外抑制乙型肝炎病毒复制的研究被引量：2
- 2008年
- 目的观察替比夫定体外对乙型肝炎病毒(HBV)复制的抑制作用。方法 HBV 复制子 pHBV1.3质粒转染 Huh7细胞,在转染细胞培养液中加入不同浓度的替比夫定,然后在不同时间段观察替比夫定的抗病毒作用。用 ELISA 检测培养上清中HBsAg、HBeAg 水平,用荧光定量 PCR(FQ-PCR)检测培养上清中 HBVDNA 拷贝数,用 Southern blot 分析转染细胞中 HBV 复制中间体。结果替比夫定减少了培养上清中 HBsAg、HBeAg 的表达及 HBV DNA 拷贝数,抑制了转染细胞中 HBV 复制中间体的形成。替比夫定对 HBV 复制子体外复制的抑制作用依赖于药物浓度及作用时间。结论替比夫定在体外对 HBV 有较强的抑制作用。
- 卢银平董继华刘朝陆蒙吉杨东亮
- 关键词：乙型肝炎病毒
