吕小婷
- 作品数：50 被引量：184H指数：8
- 供职机构：中国人民解放军更多>>
- 发文基金：南京军区医学科技创新课题江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目徐州市科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 紫草素对人γδT细胞杀伤胃癌SGC7901细胞的影响被引量：5
- 2013年
- 目的研究紫草素对人γδT细胞杀伤胃癌细胞株SGC7901的影响。方法异戊烯焦磷酸（IPP）法扩增人外周血γδT细胞;用不同浓度的紫草素作用于γδT细胞72 h后,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测γδT细胞生长曲线;流式细胞术（FCM）检测γδT细胞表面穿孔素、颗粒酶B及CD107a的表达情况;乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测γδT细胞对胃癌细胞株SGC7901的杀伤活性。结果质量浓度为0.000 2-0.4μg/ml的紫草素诱导人γδT细胞72 h后,紫草素在0.000 2-0.012 5μg/ml时可以促进γδT细胞的生长,并增加γδT细胞表面颗粒酶B、穿孔素、CD107a的表达。结论紫草素在一定质量浓度下能促进γδT细胞的生长,且增加对胃癌细胞株SGC7901的杀伤活性。
- 张继跃陈复兴刘军权吕小婷费素娟
- 关键词：紫草素ΓΔT细胞杀伤活性
- 一种体外扩增γδT细胞的新方法被引量：6
- 2011年
- 目的:建立一种新的γδT细胞扩增方法。方法:从健康人外周血中分离外周血单个核细胞(PBMCs),与用唑来膦酸预处理过的未成熟DCs按10:1混合,在含IL-2 400 U/ml和10%小牛血清的RPMI1640培养基中培养,用MTT法测定细胞增殖倍数。用流式细胞仪对γδT细胞进行表型分析并检测其细胞内的颗粒酶B、穿孔素和CD107a含量。用乳酸脱氢酶释放法(LDH)检测细胞杀伤活性。结果:经唑来膦酸预处理的树突状细胞与自身外周血单个核细胞共培养,到11天时γδT细胞增殖倍数达到(120±15)倍,第8天和11天γδT细胞百分率分别达到70.26%±3.56%、90.11%±4.67%。γδT细胞细胞内颗粒酶B、穿孔素及CD107a在第8天时分别为81.66%±4.32%、86.62%±5.21%和80.12%±3.78%,均高于对照组。培养的γδT细胞对SGC-7901、SW-1990、SW-480肿瘤细胞株杀伤活性至第8天时达到峰值。结论:此法能有效诱导γδT细胞体外扩增,培养的γδT细胞颗粒酶B、穿孔素及CD107a均显著高于对照组,并有较强的抗肿瘤活性。
- 吕小婷刘军权周忠海陈玲张娟张颂黄菲陈复兴
- 关键词：树突状细胞唑来膦酸ΓΔT细胞免疫治疗
- 三叶青水提取物对NK细胞杀伤胃癌BGC-823细胞的影响被引量：9
- 2016年
- 目的探讨三叶青水提取物对人NK细胞杀伤胃癌BGC-823细胞的影响及机制。方法采用干细胞生长培养基（SCGM）体外扩增人外周血NK细胞,不同浓度三叶青水提取物作用于NK细胞后,采用CCK8法检测三叶青水提取物对NK细胞增殖率的影响,流式细胞术（FCM）检测NK细胞穿孔素（PFP）、颗粒酶B（Gra B）及CD107a的表达,乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测NK细胞对胃癌BGC-823细胞的杀伤活性。结果三叶青水提取物作用人NK细胞48 h后,三叶青水提取物0.0003~78.125μg/ml浓度组的NK细胞增殖明显（P〈0.05）;三叶青水提取物0.305~4.883μg/ml浓度组人NK细胞PFP、Gra B及CD107a表达高于对照组（P〈0.05）;三叶青水提取物0.305~19.531μg/ml浓度组人NK细胞对胃癌BGC-823细胞杀伤活性较对照组增强,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论三叶青水提取物能促进NK细胞的增殖,能增强NK细胞对胃癌BGC-823细胞的杀伤活性,这可能与三叶青水提取物上调NK细胞PFP、Gra B及CD107a表达有关。
- 袁雨朱炳喜刘军权周燏吕小婷周忠海陈永强杨阳
- 关键词：NK细胞胃癌BGC-823细胞杀伤活性
- 不同抗凝剂对外周单个核细胞增殖影响比较、γδ T细胞鉴定被引量：1
- 2017年
- 目的探讨3种抗凝剂保存的外周血对培养γδT细胞的增殖和杀伤功能的影响研究。方法选择获得知情同意的6例健康志愿者,其中男性3例,女性3例;年龄25~45岁。常规无菌抽取新鲜外周血15 mL。将其外周血标本分别置于肝素钠、细胞保存液(枸橼酸钠)和乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝剂中(即肝素钠组、细胞保存液组、EDTA组),并立即处理培养细胞,用CCK-8法检测3组细胞的增殖情况。在第10天,行流式细胞术检测3组γδT细胞的穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达。结果在外周血细胞培养过程中,EDTA组细胞增殖不明显;肝素钠组和细胞保存液组细胞增殖明显,在第14天细胞增殖倍数最大分别为137.00%±1.44%和99.00%±1.45%,且肝素钠组优于细胞保存液组(t=2.72,P<0.01)。流式细胞仪检测发现肝素钠组γδT细胞穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达都明显高于细胞保存液组(t=3.871,P=0.003;t=2.744,P=0.021;t=2.261,P=0.047)。结论肝素钠和细胞保存液均可用于γδT细胞培养的血液抗凝,但肝素钠保护γδT细胞的杀伤功能明显优于细胞保存液。
- 孙飞陶正中周忠海吕小婷陈玲姚仁南
- 关键词：抗凝剂ΓΔT细胞杀伤功能肝素钠乙二胺四乙酸
- 人胃癌组织中γδT细胞亚群变化及意义被引量：2
- 2016年
- 目的通过检测人胃癌组织中γδT细胞及其亚群多种效应分子、细胞因子的水平,了解γδT细胞及其亚群的功能变化及意义。方法选取手术切除的新鲜胃癌组织和正常胃组织(距离癌灶边缘>5 cm)标本,采用Ⅱ型胶原酶等酶消化法分离成单细胞悬液;流式细胞术检测γδT细胞颗粒酶B、穿孔素、CD107a和IL-17A、IFN-γ的水平。结果 (1)胃癌组织中CD27+γδT细胞比例显著高于CD27-γδT细胞的比例及正常胃组织中CD27+γδT细胞比例(P<0.05);(2)胃癌组织中γδT细胞IL-17A的分泌水平明显高于正常胃组织(P<0.05),而颗粒酶B、穿孔素、CD107a等抗肿瘤效应分子的表达与正常胃组织比较,差异无统计学意义(P>0.05);(3)CD27+γδT细胞IL-17A的分泌水平显著高于CD27-γδT细胞(P<0.01),且其在胃癌组织中明显高于正常胃组织(P<0.05),在Ⅲ/Ⅳ期胃癌组织明显高于Ⅰ/Ⅱ期胃癌组织(P<0.05)。结论 (1)胃癌组织中的γδT细胞分泌IL-17A明显增高;(2)CD27+γδT细胞亚群是胃癌组织中γδT细胞的优势亚群,并可能通过分泌细胞因子IL-17A参与胃癌的发生、发展。
- 陈新孚刘建刘军权陈光侠吕小婷朱云费素娟
- 关键词：胃癌ΓΔT细胞CD27
- 吡罗昔康提高γδT细胞杀伤胃癌细胞作用的机制研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨吡罗昔康提高γδT细胞杀伤胃癌细胞作用的机制。方法按常规方法培养γδT细胞;在培养第9天的γδT细胞中加入不同浓度吡罗昔康(分别为0.01、0.02、0.04、0.08、0.16 mmol/L)诱导,24 h后收集培养上清液用于细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素12(IL-12)检测,沉淀细胞用流式细胞术测定穿孔素、粒酶B和NKG2D及用LDH法检测γδT细胞杀伤胃癌细胞活性。结果吡罗昔康浓度为0.04 mmol/L时诱导的γδT细胞穿孔素和粒酶B分别为78.7%和71.8%,明显高于对照组(分别为51.4%和60.9%)。吡罗昔康能显著抑制γδT细胞NKG2D的表达,并随着药物浓度的增加作用越明显。γδT细胞经吡罗昔康诱导24 h后,培养上清液中IFN-γ和IL-12浓度与对照组比较没有明显变化;但能抑制TNF-α的分泌,并且随着药物浓度的增加抑制作用越明显。γδT细胞杀伤胃癌细胞BCG-823的活性在0.04 mmol/L时最高(75%),明显高于对照组(58%)。结论经吡罗昔康诱导后γδT细胞杀伤BCG-823活性明显增高的机制可能与γδT细胞表达较高浓度的穿孔素和粒酶B有关。
- 王婷滕达陈复兴陶征中吕小婷李佚张颂刘军权
- 关键词：吡罗昔康NKG2DΑ-肿瘤坏死因子胃癌
- —80℃短期冻存对NK细胞功能及杀伤活性的实验研究被引量：2
- 2018年
- 目的探讨一80℃短期冻存不同时间对NK细胞功能及杀伤活性的影响。方法采集和分离健康人外周血单个核细胞,在体外培养扩增NK细胞,扩增12d后将部分NK细胞于一80%冻存1、4、12、24周。用流式细胞仪分别检测冻存前后NK细胞的表型、凋亡百分率、穿孔素、颗粒酶B及CDl07a的表达;用LDH法检测并比较冻存前后的NK细胞对食管癌细胞株的杀伤活性。结果一80Y:冻存1、4、12周的NK细胞与未冻存的NK细胞比较表型、凋亡百分率、穿孔素、颗粒酶B、CDl07a表达及对食管癌的杀伤活性,差异无统计学意义(P>0.05)。而冻存24周的NK细胞与未冻存的NK细胞比较表型、凋亡百分率、穿孔素、颗粒酶B、CDl07a表达及对食管癌的杀伤活性,差异均有统计学意义(P
- 吕小婷吕小婷周忠海陈玲陈复兴周熵
- 关键词：NK细胞冻存杀伤活性
- TWS119对人胃癌SGC-7901细胞和γδT细胞活性影响及机制研究被引量：2
- 2016年
- 目的研究糖原合酶激酶-3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶(TWS119)体外抗肿瘤活性和对人γδT细胞活性的影响。方法用不同浓度的4,6-二取代吡咯并嘧啶分别作用于人胃癌SGC-7901细胞和γδT细胞24、48和72 h后,用CCK-8法测定4,6-二取代吡咯并嘧啶对人胃癌SGC-7901细胞和γδT细胞增殖的影响及γδT细胞对SGC-7901细胞杀伤能力;流式细胞术分析4,6-二取代吡咯并嘧啶对SGC-7901细胞凋亡的影响,Western blot检测4,6-二取代吡咯并嘧啶对Bcl-2、p-STAT3和p-ERK1/2表达的影响。结果 0~8.0μmol·L^(-1)4,6-二取代吡咯并嘧啶能抑制人胃癌SGC-7901细胞的生长并诱导其凋亡,抑制Bcl-2的表达,促进p-ERK1/2和p-STAT3的表达。而在γδT细胞中,4,6-二取代吡咯并嘧啶在0~4.0μmol·L^(-1)时能促进其增殖和对SGC-7901细胞的体外杀伤活性,促进Bcl-2的表达,抑制pERK1/2和p-STAT3的表达。结论一定浓度的4,6-二取代吡咯并嘧啶能抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖并诱导其凋亡,同时能促进γδT细胞增殖和对SGC-7901细胞的杀伤活性,其机制可能与4,6-二取代吡咯并嘧啶激活Wnt信号传导通路及其对p-ERK1/2、Bcl-2和p-STAT3表达的影响有关。
- 陈永强郑璐刘军权吕小婷孙蕾清徐晶周忠海陈复兴
- 关键词：ΓΔT细胞SGC-7901细胞增殖
- 人外周血γδT细胞CD107a的表达变化与细胞毒活性的关系被引量：9
- 2011年
- 目的：探讨人外周血γδT细胞体外诱导过程中CD107a的表达变化及其与γδT细胞细胞毒活性的关系。方法：分离健康人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）,加入含有IL-2和异戊烯焦磷酸（isopentenyl pyro-phosphate,IPP）的培养基,体外诱导γδT细胞。分别在第7、10、14天以流式细胞仪对培养的γδT细胞进行鉴定,并同时检测其CD107a、穿孔素和颗粒酶B的表达。CCK-8试剂盒检测γδT细胞对胰腺癌细胞SW-1990的杀伤效应。采用SPSS13.0软件进行spearman相关分析。结果：在培养的第7、10、14天,γδTCR阳性细胞分别为（60.31±3.84）%、（66.45±4.25）%、（70.99±4.66）%。CD107a、穿孔素和颗粒酶B的表达在γδT细胞培养第710天达到峰值后呈下降趋势,第7天与第0天相比差异有统计学意义[（80.66±4.42）%、（70.11±3.34）%、（94.26±4.25）%vs（69.02±5.04）%、（62.31±4.66）%、（53.62±3.69）%,P〈0.05]。培养第7天、第10天的γδT细胞对SW-1990细胞杀伤率显著高于第14天的γδT细胞[（58.86±5.12）%、（61.53±4.69）%vs（40.31±4.83）%,P〈0.05]。γδT细胞CD107a表达与穿孔素、颗粒酶B、其对SW-1990细胞杀伤效应显著相关（r=0.853,r=0.785,r=0.839,均P〈0.01）。结论：人外周血γδT细胞CD107a的表达与其抗肿瘤能力正相关,可能是γδT细胞细胞毒活性的一个标志。
- 周忠海陈复兴吕小婷张娟孙蕾清张磊黄菲
- 关键词：ΓΔT细胞细胞毒作用穿孔素颗粒酶B
- 汉黄芩素诱导肝癌HepG2细胞凋亡的实验研究被引量：4
- 2021年
- 目的研究汉黄芩素对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。方法常规培养HepG2细胞。MTT法检测汉黄芩素对HepG2细胞增殖的影响。流式细胞术检测经汉黄芩素处理后HepG2细胞周期、凋亡及活细胞内Caspase-3的表达。免疫印迹法检测Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达。结果汉黄芩素6.25~50μg·mL^(-1)浓度能明显抑制HepG2细胞增殖,促进凋亡及活细胞内Caspase-3活性的表达,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。汉黄芩素能改变HepG2细胞周期,使S期比例逐渐减少。汉黄芩素能显著抑制Bcl-2和Caspase-3蛋白表达量。结论汉黄芩素能抑制HepG2细胞增殖,改变细胞周期,促进凋亡,其凋亡机制可能与改变Caspase-3和Bcl-2表达有关。
- 周燏孙蕾清吕小婷杨阳朱斌周忠海
- 关键词：汉黄芩素HEPG2细胞凋亡
