吴清璇
- 作品数:14 被引量:26H指数:3
- 供职机构:第二军医大学更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 用ABC—ELISA检测血清γ—干扰素
- 1993年
- <正> 本实验应用重组人γ-干扰素(IFN-r)单克隆抗体,采用ABC—ELISA检测IFN-γ活性,报告如下.1 材料和方法1.1 γ-Hu-IFN-γ-McAb 抗体A_3中和效价为1×10~3中和单位/ml.蛋白浓度1mg/ml.
- 邓红吴修斌吴清璇杜平
- 关键词:干扰素血清ELISA
- 肝病患者γ-干扰素产量及白细胞介素-2的增强作用被引量:1
- 1996年
- 目的探索肝病患者淋巴细胞分泌γ-干扰素(IFNγ)的减少系内源性缺陷抑或其它辅助性刺激因子如介素-2(IL-2)的缺少.方法分离患者外周血单个核细胞(PBMCs),分别与植物血凝素(PHA)和 rIL-2或空白培养.用定量 ABC-ELISA 检测培养上清中的 IFNγ,并计数培养前后的细胞量.结果无论肝病患者或正常对照者的血清标本中均未能检到 IFNγ.在空白培养组(A 组),上清中 IFNγ含量分别是:CAH 5.03μg/L,CPH 6.02μg/L,HCC 4.91μg/L,以及对照组8.72μg/L,肝病者的 IFNγ产量显著低于对照组(P<0.01);PHA 刺激培养后淋巴细胞 IFNγ产量(B 组)分别为:CAH 17.12μg/L、CPH 14.54μg/L、HCC 17.63μg/L 及正常对照组22.71 μg/L;C 组,即重组 IL-2刺激后的 PBMCs,其 IFNγ产量均明显增加,但以对照组(60.67μg/L)显著高于 CAH(21.70μg/L)、CPH(24.00 μg/L 及 HCC(19.15μg/L).若将 C 组 IFNγ值与 A 组比较,则发现,正常对照组用 IL-2刺激后 IFNγ升高了近7倍,而各种肝病仅升高约4倍.同时还发现,PBMCs 扩增数不大于3倍.结论肝病包括肝癌患者 IFNγ产量下降以淋巴细胞的内源性缺陷为主,其它淋巴因子如 IL-2的缺少为辅.
- 陈士葆缪晓辉杜平吴清璇
- 关键词:肝疾病白细胞介素-2
- 重组人γ~2-干扰素对肝癌患者IgGFc段受体的调控研究
- 1991年
- 用重组人γ-干扰素(rIFNγ)处理肝癌病人外周血单个核细胞(PBMC),观察细胞膜表面IgG Fc段受体(FcγR)的表达情况。ABC-ELISA方法检测FcγR。结果显示,肝癌病人内源性IFNγ水平及FcγR基础水平均低下。rIFNγ处理后,肝癌患者PBMC FcγR表达明显增强,并与rIFNγ的剂量呈正相关。但对rIFNγ的增强效应显著低于正常对照组。推测,在肝癌病人,IFNγ的产生及FcγR的表达均有缺陷,外源性rIFNγ可通过增强FcγR表达发挥其免疫调节作用,是抗肿瘤机制之一。
- 缪晓辉陈士葆孔宪涛李石李亚利杜平吴清璇
- 关键词:Γ-干扰素FC受体
- 抗人α干扰素单克隆抗体SC_8的应用被引量:2
- 1992年
- 本文研究证实McAb SC(?)可用于人rIFN-al和rIFN-aA的纯化和测定。用于纯化可使活性回收大于100%,一步可纯化143~3,000倍。用间接ELISA检测这两种rIFN-a,其敏感性可到微克以下。如用rIFN-al抗原来检测McAb SC(?)可达毫微克水平,比中和法敏感。但McAbSC(?)单独用于亲和层析纯化两种自然IFN-a不合适,回收较低。
- 吴清璇刘沪丽杨果诗杜平
- 关键词:单克隆抗体干扰素
- 用单克隆抗体ELISA研究和分析霍乱弧菌抗原结果
- 1990年
- 本文用ELISA以12株单克隆抗体(McAb)对55株EI Tor弧菌和用遗传学方法突变的28株霍乱弧菌的菌体抗原进行了研究,同时与四种常规分型方法进行对比试验。用12株McAb可将55株El Tor弧菌分成11种抗原决定簇和18个McAb型,将遗传学方法的突变株分成9种抗原决定簇和10个McAb型。其中一株McAb2B_1H_1F_3能识别所有55株EI Tor弧菌和大部分突变株霍乱弧菌,表明有种的特异性;其余11株McAb与各型霍乱弧菌的抗原反应,均有差异,与这些菌株的反应百分比各不相同(21.0%~100%),表明可能存在着亚型和亚群。文中着重讨论了用McAb研究分析抗原的重要意义和McAb用于诊断的价值。
- 谢正旸吴挹芳许志锦蔡燕刚吴清璇胡珠玛马蓂戚中田社平
- 关键词:MOUSEMONOCLONALANTIBODYVIBRIOCHOLERAEDETERMINANT
- 应用ABC-ELISA法检测乙肝患者血清γ干扰素及其改变的免疫学意义被引量:1
- 1994年
- 本实验首次应用我国研制的γ-干扰素单克隆抗体建立了ABC-ELISA方法。用此方法检测了81例乙肝患者血清γ-干扰素(IFN-γ)的水平,与正常对照组比较发现乙肝患者体内的IFN-γ水平异常,可能导致机体免疫功能进一步失调。认为乙肝的慢性化、纤维化的病理改变与其异常水平的IFN-γ参与免疫调节有关。
- 邓红吴修斌吴清璇杜平
- 关键词:ELISA干扰素
- 肝癌组织特异性小鼠IL─3、TNF逆转录病毒载体的构建及在肝癌细胞中的表达被引量:6
- 1995年
- 从pSV23SMTNF和pSPMoIL─3质粒分别切下小鼠肿瘤坏死因子(mTNF)和小鼠白细胞介素3(mIL─3)cDNA,并切除mIL─3cDNA3'端ATTTATTTA不稳定序列,以两种细胞因子cDNA作为目的基因,分别克隆到逆转录病毒载体pMNSM多克隆位点,再于目的基因上游分别插入小鼠白蛋白启动子增强子序列(Albe/p),构建成功两种肝癌组织特异表达性细胞因子逆转录病毒载体,经磷酸钙共沉淀法导入包装细胞pA317中包装成重组病毒颗粒,并测转染率。经NIH/3T3细胞测定重组病毒Nec抗性感染率后,在8μg/mlPolybrene存在下感染肿瘤细胞,经400μg/ml活性G418选择后测转基因肿瘤细胞培养上清中表达相应细胞因子,证明mIL─2、mIL─3特异地在表达白蛋白的小鼠肝癌细胞中表达(P<0.001)。
- 曹广文杜平杨文国吴清璇戚中田孔宪涛
- 关键词:白细胞介素
- 人rIFN-γ的纯化及鉴定实验研究
- 1990年
- 本研究利用本室建株的A_3 杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体,对大肠菌表达的人rIFN-γ进行了纯化。宿主菌经 7MGuHCl 处理后,收获的抽提液经 40%饱和(NH_4)_2SO_4盐析,除去部分杂蛋白,纯度约提高了一倍、活性回收>100%。此溶液稀释70倍复性后直接通过McAb亲和层析纯化,纯度达到98%,比活6×10~6Iu/mgp。本文还对复性的影响因素进行了研究,证实溶液的离子强度及蛋白浓度对复性均有影响。
- 刘沪丽杜平吴清璇郭德本任志霞
- 关键词:IFN纯化干扰素
- 肝癌患者FcγR表达及rIFNγ对FcγR的调控
- 1992年
- ABC-ELISA方法测定了43例肝癌及8例肝良性占位性病变患者外周血单个核细胞(PBMC)FcγR,并对其中12例肝癌切除术后病人追踪测定。用rIFNγ刺激PBMC,观察FcγR表达量的变化。结果,肝癌组FcγR水平明显低于肝脏良性占位性病变和正常对照组,而后两组比较相差不显著。手术后病人FcγR表达水平提高。肝癌病人内源性IFNγ产生缺陷。外源性IFNγ刺激后FcγR表达显著增强,但仍低于正常对照组。上述结果提示:1.FcγR对鉴别肝脏良恶性占位性病变有参考价值;2.肝癌者FcγR水平低下可能与癌组织分泌某种抑制因子及内源性IFNγ产生低下有关;3.外源性IFNγ促进FcγR表达,是其抗肿瘤机制之一。
- 缪晓辉陈士葆孔宪涛李石杜平吴清璇
- 关键词:肝肿瘤免疫学
- 抗重组人γ干扰素单克隆抗体的纯化研究被引量:1
- 1989年
- 取本实验室制备的抗重组人γ干扰素单克隆抗体(rHu IFN-γ/McAb)A_3和B_3E_7粗制品(BALB/c小鼠腹腔分泌液),分别用饱和硫酸铵盐析法和葡萄球菌A蛋白(SPA)亲和层析法进行纯化。结果发现,虽两者都能部分纯化A_3和B_3E_7-McAb,但后者(SPA亲和层析法)的纯化效果比前者(硫酸铵盐析法)好。纯化后的产品经冷冻干燥后置低温贮存,其活性(抗体滴度)不受影响.
- 吴清璇杨果诗杜平
- 关键词:干扰素单克隆抗体