周兰柱
- 作品数：31 被引量：75H指数：4
- 供职机构：蚌埠医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 脱氢姜酮通过调控miR-223-3p抑制喉癌细胞Hep-2增殖、迁移及血管形成
- 2023年
- 目的探讨脱氢姜酮(DZG)对喉癌细胞Hep-2增殖、迁移及血管形成的影响及其相关机制。方法分别以不同浓度的DZG(0,75,150,300μmol/L)处理Hep-2细胞24 h,MTT法、Transwell、Western blot法、实时荧光定量PCR(RT-PCR)分别检测Hep-2细胞的存活率、迁移能力、迁移蛋白波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和血管形成蛋白血管内皮生长因子(VEGF)以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)相对表达水平和miR-223-3p mRNA相对表达量。将Hep-2细胞分别分为:①空白对照组(control组)、模拟物阴性对照组(miR-NC)、miR-223-3p组(转染miR-223-3p);②空白对照组(si-control组)、阴性对照组(si-NC)及miR-223-3p小干涉RNA组(si-miR-223-3p)。MTT法检测细胞增殖抑制能力,Transwell检测细胞迁移能力,Western blot检测细胞VGEF、MMP-2、Vimentin、N-cadherin蛋白相对表达量。结果0,75,150,300μmol/L的DZG培养Hep-2细胞,MTT结果显示,24 h细胞存活率随DZG浓度增加而下降(P<0.05);Transwell结果显示,细胞迁移能力随DZG浓度增加而下降(P<0.05);Western blot结果显示,VGEF、MMP-2、Vimentin、N-cadherin蛋白相对表达量随DZG浓度增加而降低(P<0.05);RT-PCR结果显示,miR-223-3p mRNA相对表达量随DZG浓度增加而增加(P<0.05)。将Hep-2细胞进行转染后,RT-PCR结果表明,miR-223-3p组Hep-2细胞miR-223-3p相对表达量较miR-NC组和control组明显升高,si-miR-223-3p组Hep-2细胞miR-223-3p相对表达量较si-NC组和si-control组明显降低(P<0.05)。MTT法结果显示,miR-223-3p组细胞存活率较miR-NC组明显降低(P<0.05)。不加DZG单独使用正常培养基培养验证miR-223-3p对Hep-2细胞存活率时发现,miR-223-3p组细胞存活率较miR-NC组和control组细胞明显下降,si-miR-223-3p组细胞存活率较si-NC组和si-control组明显升高(P<0.05);Transwell结果显示,miR-223-3p组细胞迁移率较miR-NC组和control组明显降低,si-miR-223-3p组细胞迁移率较si-NC组和si-control组明显升高(P<0.05)。Western blot结果�
- 吴俊王文忠吴娟于宁静孙哲周兰柱
- 关键词：喉癌增殖迁移血管形成
- PRMT1通过促进RRM2表达抑制鼻咽癌细胞凋亡
- 2022年
- 目的探讨PRMT1能否通过促进RRM2抑制鼻咽癌细胞凋亡。方法免疫组化和Western blot共同检测鼻咽癌和癌旁组织中PRMT1及RRM2的相对表达量;以人正常鼻黏膜上皮细胞系(HNEpC)作为对照,Western blot实验检测不同鼻咽癌细胞系中PRMT1和RRM2蛋白的相对表达量;对CNE-2细胞中PRMT1分别进行过表达和下调,过表达实验设阴性对照组(oe NC:CNE-2细胞中转染pcDNA3.1质粒)、过表达PRMT1组(oe PRMT1:CNE-2细胞中转染pcDNA3.1 PRMT1质粒)、下调实验设阴性对照组(si-NC:CNE-2细胞中转染NC无关序列)及PRMT1小干涉RNA组(si-PRMT1:CNE-2细胞中转染PRMT1小干涉RNA),对CNE-2细胞中RRM2分别进行过表达和下调,过表达实验设阴性对照组(oe NC:CNE-2细胞中转染pcDNA3.1质粒)、过表达RRM2组(oe RRM2:CNE-2细胞中转染pcDNA3.1 RRM2质粒)、下调实验设阴性对照组(si-NC:CNE-2细胞中转染NC无关序列)及RRM2小干涉RNA组(si-RRM2:CNE-2细胞中转染RRM2小干涉RNA)。Western blot验证PRMT1和RRM2的表达关系;AnnexinV-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡;活性氧试剂盒检测细胞活性氧。结果与癌旁组织和HNEpC细胞相比,鼻咽癌组织和CNE-2细胞中的PRMT1和RRM2相对表达量均显著增加(P<0.05);Western blot证明PRMT1可促进RRM2表达,过表达PRMT1或RRM2,CNE-2细胞活性氧产生量与凋亡率均降低(P<0.05),下调PRMT1或RRM2表达,CNE-2细胞活性氧产生量与凋亡率凋亡率均增加(P<0.05)。Western blot显示,过表达PRMT1或RRM2表达,Cleaved caspase-3和Cleaved caspase-8蛋白表达减少(P<0.05),下调PRMT1或RRM2表达,Cleaved caspase-3和Cleaved caspase-8蛋白表达增加(P<0.05);当同时下调PRMT1和过表达RRM2表达,与单独下调PRMT1组比,CNE-2细胞活性氧产生量与凋亡率均显著降低(P<0.05),Cleaved caspase-3和Cleaved caspase-8蛋白表达均减少(P均<0.05)。结论PRMT1通过促进RRM2表达影响CNE-2细胞凋亡。
- 周兰柱吴俊张明洁赵报马士崟
- 关键词：鼻咽癌凋亡
- miR-141-3p通过促进波形蛋白表达增强CNE-2人鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移被引量：2
- 2023年
- 目的探讨微小RNA 141-3p(miR-141-3p)能否通过调节波形蛋白(vimentin)促进CNE-2人鼻咽癌(NPC)细胞的迁移。方法实时定量PCR检测NPC组织和癌旁组织miR-141-3p表达,免疫组织化学染色法和Western blot法检测vimentin的表达水平。采用实时定量PCR和Western blot法分别筛选5-8F、CNE-2、HNE1人NPC细胞中miR-141-3p相对表达量最高的细胞株,实时定量PCR和Western blot法共同验证miR-141-3p与vimentin表达关系;采用小干涉RNA(si-miR-141-3p)下调CNE-2细胞miR-141-3p、噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率、Transwell^(TM)小室法检测细胞侵袭和迁移、Western blot法检测vimentin表达量。结果与癌旁组织相比,NPC组织中miR-141-3p和vimentin表达量均显著增加,与NP69细胞相比,miR-141-3p和vimentin在CNE-2细胞中表达均显著增加;下调CNE-2细胞中miR-141-3p后,细胞侵袭和迁移能力均下降,细胞增殖能力显著降低,vimentin蛋白表达量显著降低。结论miR-141-3p能够通过促进vimentin表达增强CNE-2细胞的增殖和迁移。
- 孙哲周兰柱吴俊王文忠
- 关键词：鼻咽癌VIMENTIN细胞侵袭
- PRMT1对喉癌细胞增殖、迁移的影响及其机制被引量：1
- 2022年
- 目的探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)调控核糖核苷酸还原酶亚单位M2(RRM2)对喉癌细胞Hep-2增殖、迁移的影响及其机制。方法收集蚌埠医学院第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科收治的确诊为喉癌的8例患者的病理标本及癌旁正常组织。使用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测喉癌和癌旁组织中PRMT1 mRNA、RRM2 mRNA相对表达量。Western blot实验检测喉癌和癌旁组织中PRMT1、RRM2蛋白相对表达量。通过对Hep-2细胞不同处理分为3组:si-PRMT1组(PRMT1小干涉RNA下调PRMT1)、si-NC组(无关序列转染)和control组(不进行处理)。噻唑兰(MTT)法检测各组细胞增殖。RT-PCR检测各组Hep-2细胞中PRMT1、RRM2 mRNA、vimentin mRNA和E-cadherin mRNA相对表达量。Transwell检测各组Hep-2细胞侵袭和迁移能力。Western blot检测各组Hep-2细胞PRMT1、RRM2蛋白、侵袭和迁移相关蛋白(vimentin、E-cadherin)相对表达量。结果喉癌组织中的PRMT1和RRM2 mRNA和蛋白较癌旁组织均显著增加(P<0.05)。MTT结果显示,与control组和si-NC组比较,si-PRMT1组细胞存活率明显下降(P<0.05)。RT-PCR结果显示,与control组和si-NC组比较,si-PRMT1组PRMT1 mRNA、RRM2 mRNA、vimentin mRNA和E-cadherin mRNA相对表达量明显下降(P<0.05)。Transwell结果显示,与control组和si-NC组比较,si-PRMT1组细胞侵袭率、迁移率明显降低(P<0.05);Western blot结果显示,与control组和si-NC组比较,si-PRMT1组PRMT1、RRM2、vimentin和E-cadherin蛋白相对表达量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论PRMT1可增强喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能与调控RRM2相对表达量有关。
- 周兰柱孙哲吴俊王文忠
- 关键词：喉癌增殖迁移
- 舌瓣一期修复喉癌及喉咽癌术后咽部缺损被引量：1
- 2012年
- 目的探讨舌瓣一期修复晚期喉癌及喉咽癌术后咽部缺损的疗效。方法 2006年6月-2011年3月,收治20例喉咽癌及喉癌患者。男19例,女1例;年龄47～78岁,平均62.8岁。喉癌12例,喉咽癌8例;均为鳞状细胞癌。病程1～8.5个月,平均3.9个月。根据国际抗癌联盟(UICC,1987)分期标准,Ⅲ期12例,Ⅳ期8例。肿块切除后遗留缺损范围为5 cm×2 cm～4 cm×4 cm;16例采用全舌根舌瓣修复,4例采用横形舌根舌瓣修复;舌瓣切取范围为5 cm×2 cm～4 cm×4 cm。术后行正规放、化疗。结果术后舌瓣均成活。18例切口Ⅰ期愈合;2例出现切口皮下积液,经处理后延迟愈合。患者均获随访,随访时间12～63个月,平均36.7个月。患者均恢复正常进食,舌功能正常。随访期间共死亡12例患者,1例局部复发患者带瘤姑息存活;按直接法计算3年生存率为69.2%(9/13)。结论舌瓣一期修复喉癌及喉咽癌术后咽部缺损具有切取简便、血供丰富、易成活的特点,可获得较好疗效。
- 韩跃峰陈德尚李慧张明洁马士崟周兰柱
- 关键词：舌瓣喉癌喉咽癌缺损修复
- 两种下鼻甲手术方式的术后比较被引量：2
- 2011年
- 目的探讨下鼻甲黏-骨膜下切除术和下鼻甲部分切除术在术后并发症和术后鼻腔功能恢复情况以及远期疗效的比较。方法选择64例慢性肥厚性鼻炎患者随机分为两组,行下鼻甲部分切除术32例,行下鼻甲黏-骨膜下切除术32例(病例来自于蚌埠医学院第一附属医院耳鼻喉-头颈外科2004年1月-2011年4月),比较两者术后并发症和鼻腔功能恢复以及远期疗效的情况。结果术后以及远期疗效的比较两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论下鼻甲黏-骨膜下切除术疗效优于下鼻甲部分切除术,对下鼻甲功能影响不大并且能很好的保护鼻黏膜,是治疗慢性肥厚性鼻炎较好的治疗方法。
- 黄方名王文忠周兰柱
- 关键词：肥厚性鼻炎下鼻甲鼻甲切除术
- 下调三结构域蛋白59(TRIM59)阻断NF-κB信号通路抑制人鼻咽癌细胞的侵袭和迁移被引量：4
- 2022年
- 目的探讨三结构域蛋白59(TRIM59)能否通过调控核因子κB(NF-κB)信号通路影响鼻咽癌细胞生物学行为。方法通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库预测TRIM59在鼻咽癌和癌旁组织的表达情况;反转录PCR和Western blot法分别检测鼻咽癌和癌旁组织中TRIM59 mRNA和蛋白相对表达量;以人正常鼻黏膜上皮细胞(HNEpC)为对照,采用反转录PCR和Western blot法分别检测HNE1和CNE-2Z鼻咽癌细胞TRIM59 mRNA和蛋白相对表达量;采用小干涉RNA技术下调HNE1细胞TRIM59水平,设置对照组、小干涉RNA阴性对照(si-NC)组、TRIM59小干涉RNA(si-TRIM59)组。噻唑蓝(MTT)法检测各转染组细胞增殖抑制率,TranswellTM小室检测各转染组细胞侵袭和迁移能力,Western blot法检测NF-κB、磷酸化的NF-κB(p-NF-κB)、波形蛋白(vimentin)、存活蛋白(survivin)的蛋白表达,ELISA法检测培养细胞上清液白细胞介素6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果TRIM59在鼻咽癌组织表达异常增高;与HNEpC细胞相比,TRIM59在HNE1相对表达量显著增加;下调HNE1细胞中TRIM59表达后,显著抑制细胞存活以及细胞的侵袭和迁移;下调TRIM59表达后,HNE1细胞NF-κB、vimentin、survivin mRNA以及p-NF-κB、vimentin、survivin蛋白表达均受到抑制,IL-6、IL-8、TNF-α含量显著降低。结论下调TRIM59能够抑制HNE1细胞NF-κB信号通路和肿瘤炎症相关因子进而抑制细胞侵袭和迁移。
- 王文忠周兰柱孙哲吴俊赵报崔忆旋
- 关键词：鼻咽癌细胞侵袭
- 颈部坏死性筋膜炎的临床特点及处理策略被引量：8
- 2019年
- 目的:总结颈部坏死性筋膜炎的临床特点及处理,为该类疾病的诊治提供参考。方法:回顾性分析61例颈部坏死性筋膜炎患者的临床资料。61例患者均尽早行彻底手术清创,并积极予以广谱抗生素治疗。结果:14例出现并发症,2例死亡。59例最终治愈,随访至今(至少3个月)无复发或死亡,3例出现声嘶。结论:颈部坏死性筋膜炎发病后应尽早行彻底的手术清创并积极抗感染、控制合并疾病以及全身支持治疗。
- 周兰柱周恩晖刘素茹易红良
- 关键词：坏死性筋膜炎清创术
- PBL教学法在耳鼻咽喉头颈外科理论教学中的初步实践被引量：7
- 2010年
- 目的探索以问题为基础(PBL)教学方法在我国耳鼻咽喉头颈外科学教学中的适用情况。方法在医学影像专业本科的《耳鼻咽喉头颈外科学》理论教学中,开展PBL教学法实践。在教师辅导下,学生"以问题为基础"对教学内容进行课前预习,阅读有关期刊、参考资料和课前小组讨论,课堂集中讨论学习,课后对PBL教学法应用及优缺点进行评价。结果学生对PBL课的兴趣浓厚,参与积极性非常高,这种教学方法与传统教学法比较在激发学习兴趣、培养临床思维能力、增强理论理解能力、提高查阅文献兴趣、提高分析能力、改善归纳能力方面占优(P<0.05)。但是在促进记忆、提高学习效率方面和传统教学法相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PBL教学法可以应用于我国耳鼻咽喉头颈外科学的理论教学,值得推广应用。
- 韩跃峰马士崟张明洁陈德尚周兰柱
- 关键词：耳鼻咽喉头颈外科学理论教学
- 高位咽旁间隙良性肿瘤的手术治疗被引量：9
- 2018年
- 目的:探讨高位咽旁间隙良性肿瘤的手术方法选择。方法:对9例涉及颅底、颅内的高位咽旁间隙良性肿瘤完整的临床资料进行回顾性分析。其中神经鞘瘤6例,多形性腺瘤2例,血管瘤1例。患者均行高分辨CT和MRI检查,部分病例行DSA检查,4例达鼻咽顶部,3例涉及颅底骨质,2例侵入颅内。9例均单纯手术治疗,高清鼻内镜及导航系统辅助,部分患者使用低温等离子刀,手术入路:颈侧入路3例(辅助下颌角裂开2例),口内入路3例,经鼻入路2例,颈腮腺入路1例。结果:8例患者完全切除肿瘤,1例部分肿瘤残留;出血500ml以上2例,1例出现伸舌偏斜及脑脊液漏;无死亡病例;无伤口感染;所有患者均密切随访,无肿瘤复发。结论:高位咽旁间隙良性肿瘤位置深在,常涉及颅底、颅内,与颅底重要神经血管及脑膜关系紧密,应根据患者的不同情况及影像学资料选用适宜的手术入路,彻底切除肿瘤并保留或重建重要的血管神经功能,避免发生并发症是手术的要点。
- 王晓敏李慧陈德尚陆兆屹张明洁周兰柱韩跃峰王文忠马士崟
- 关键词：咽旁间隙肿瘤颅底肿瘤外科手术
