孙晓冬
- 作品数：6 被引量：22H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家攀登计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 中心体蛋白Cenexin在大鼠精子发生过程中的表达特征被引量：3
- 2002年
- 中心体蛋白Cenexin是成熟中心粒的唯一标志分子。为阐明中心粒在大鼠精子发生过程中的成熟以及功能,我们首先通过RT-PCR技术从大鼠睾丸组织中扩增出了Cenexin cDNA片段,原核表达重组蛋白后,用其免疫小鼠制备了高滴度的抗Cenexin的多克隆抗体,然后利用免疫荧光染色、Western Blot和半定量RT-PCR方法,研究了大鼠精子发生过程中Cenexin蛋白和基因的表达特征。结果显示Cenexin mRNA水平在精原细胞和精母细胞中较高,随后表达水平下降,而蛋白质分子在精原细胞到精子细胞中都定位于细胞的一个中心粒上,表示有成熟中心粒的存在,在长形精子细胞中该蛋白位于鞭毛的基体部。附睾的绝大多数成熟精子中Cenexin免疫染色消失。中心体蛋白Cenexin在精子变态期的表达变化可能与精子鞭毛形成的起始有关。
- 孙晓冬俞作仁马静葛晔华李赛薛社普韩代书
- 关键词：中心体蛋白精子发生
- 长白猪精原细胞的分离和纯化被引量：20
- 2002年
- 目的 分离和纯化猪的精原细胞 ,从而对与人类具有高同源性的猪的精子发生进行研究。 方法 酶消化法制备 2月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液 ,以 2 %～ 4 %牛血清白蛋白 (BSA)连续梯度作为分离介质 ,采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞。 结果 重力沉降法分离细胞后所获精原细胞纯度为 91% ,进一步经过贴壁培养纯化后 ,精原细胞纯度达到 94 2 %。 结论 该方法方便、快捷 ,分离效果好 ,能满足在分子水平研究精原细胞的需要。
- 俞作仁孙晓冬关纪奎薛社普韩代书
- 关键词：长白猪精原细胞纯化细胞分离生殖生物学
- 中心体蛋白Centrin家族在大鼠精子发生过程中的表达
- 2001年
- 孙晓冬俞作仁李赛马静葛晔华薛社普韩代书
- 关键词：中心体蛋白CENTRIN精子发生
- 大鼠中心体蛋白家族基因的克隆及其在睾丸中的表达特征被引量：1
- 2002年
- centrin是进化上高度保守的中心体蛋白家族,已从多种生物中克隆到其同源基因,但基因文库中尚无大鼠centrin序列的报道.采用RT-PCR从大鼠睾丸组织中克隆到centrin-1,-2和-3 cDNA片段,对其衍生的氨基酸序列进行同源性比较,结果显示,人、小鼠、大鼠中相应的centrin蛋白同源性很高.采用半定量RT-PCR技术研究了它们在大鼠精子发生过程中的表达特征.结果表明,centrin-1的表达具有睾丸组织和生精细胞特异性,并呈现出发育阶段相关的规律,它仅在减数分裂开始后转录,其mRNA水平在圆形精子细胞中达到高峰.centrin-2和centrin-3在睾丸精原细胞中有高表达,进入减数分裂后其mRNA水平迅速降低,同时在一些体细胞中也有表达.推测centrin-1可能在减数分裂或精子细胞变态分化过程中发挥作用,而centrin-2,-3可能与有丝分裂有关.
- 孙晓冬葛晔华马静俞作仁李赛薛社普韩代书
- 关键词：睾丸精子发生基因克隆基因表达
- 中心体蛋白Centrin在不育症病人精子中的异常表达被引量：1
- 2002年
- 为研究中心体蛋白Centrin与男性不育的关系,从而深入理解Centrin在精子发生过程中的功能,用抗Centrin多克隆抗体对10例正常人及18例男性不育症病人的成熟精子进行了免疫荧光染色.结果发现,在正常男性成熟精子中有两个明显的点状荧光阳性信号,位于鞭毛的基体部,分别为近端中心粒和远端中心粒;而一些不育病人精子中Centrin蛋白定位异常,染色信号呈弥散分布,未显示正常大小的近端和远端中心粒.这表明中心体蛋白异常可能与某些男性不育相关,这一表型有可能用作某些男性不育及精子异常的新标志.
- 孙晓冬马静葛晔华李赛俞作仁薛社普韩代书
- 关键词：CENTRIN男性不育症精子中心体蛋白
- 筛选生殖细胞特异表达基因的方法简介——利用遗传缺陷进行差示筛选
- 1997年
- 筛选生殖细胞特异表达基因的方法简介——利用遗传缺陷进行差示筛选孙晓冬张世馥（中国医学科学院协和医科大学基础医学研究所）精子发生过程中，伴随着形态、遗传性状的改变，有许多细胞特异性和阶段特异性基因的表达，而差示筛选是近几年发展起来的研究特异基因表达的有...
- 孙晓冬张世馥
- 关键词：生殖细胞特异表达基因减数分裂小鼠睾丸精母细胞基因片段
