季守平
- 作品数：101 被引量：183H指数：8
- 供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- DNA甲基化与肿瘤
- 1993年
- 在肿瘤细胞中,DNA甲基化状况的改变与基因的异常表达、基因突变、基因缺失重排和基因组印迹等遗传效应有关;这些遗传效应可能是癌基因激活和肿瘤抑制基因失活的诱因;因此,DNA的异常甲基化可能与肿瘤的发生和发展都有关系。这为研究突变和癌变的分子机理提供了新思路。
- 季守平章扬培
- 关键词：DNA甲基化肿瘤
- 人工血小板PLGA-PEG-RGD在制备静脉用全身性纳米止血药中的应用
- 本发明公开了一种用于预防和治疗全身性出血，包括创伤失血、脏器内出血、深部出血及手术出血的静脉用纳米止血药PLGA-PEG-RGD及其制备工艺。实验证明，本发明的PLGA-PEG纳米颗粒负载RGD三肽的人工血小板PLGA-...
- 檀英霞万一千宫锋季守平李素波王磊磊高红伟宋锦文张士坤王颖丽鲍国强
- 文献传递
- 重组人α-半乳糖苷酶A在巴氏毕赤酵母中的表达及鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的:克隆人α-半乳糖苷酶A(α-GalA)cDNA,并在毕赤酵母中表达重组的人α-GalA。方法:利用RT-PCR方法从人肝癌细胞中克隆人α-半乳糖苷酶A cDNA并构建到可用甲醇诱导的分泌型巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαA中。将重组质粒导入毕赤酵母并用Ze ion抗生素筛选转化细胞。在甲醇诱导后,利用SDS-PAGE、W estern印迹及酶活测定方法在酵母上清中鉴定重组的人α-GalA。结果:获得人-αGalA cDNA,构建酵母表达质粒pHGCZɑA,将重组表达载体导入到酵母细胞,并在上清中检测到人α-GalA蛋白。结论:获得了人α-GalA cDNA及具有生物活性的重组人α-GalA,为临床应用于法布莱氏病的治疗奠定了基础。。
- 徐莉娟高红伟季守平宫锋章扬培
- 关键词：毕赤酵母
- 血型转变被引量：6
- 2000年
- α_半乳糖苷酶是实现B→O血型转变、制备通用型血的关键工具酶。本文报道利用反转录PCR方法从中国海南兴隆咖啡豆中克隆α_半乳糖苷酶cDNA ,插入嗜甲基酵母 pichapastoris表达载体 pPIC9K中 ,转化P .pas torisGS1 1 5 ,筛选高表达重组菌株。经甲醇诱导表达 7d后 ,发酵液总蛋白分泌量约 1 .2mg/mL ,SDS_PAGE呈现约41kD特异表达带 ,与专一性底物对_硝基_苯基_α_D_吡喃半乳糖苷反应证明 ,表达产物具有α_半乳糖苷酶活性 ,最高达到 1 8U/mL。初步实验表明 ,表达的α_半乳糖苷可酶解B型红细胞 ,成功实现B→O血型转变。本文同时综述了国外有关使用mPEG遮蔽红胞表面抗原、制备通用型血液研究的进展 ,以及我们在此领域的研究工作。
- 章扬培杨军季守平宫锋任会明刘泽澎
- 关键词：血型转变Α-半乳糖苷酶甲氧基聚乙二醇
- 脑胶质瘤SHG-44细胞MGMT基因甲基化状态及其与细胞对烷化剂药物耐药性关系的研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨人脑胶质瘤SHG-44细胞O(6)-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化状态与其蛋白表达以及细胞对烷化剂药物耐药性的相关性。方法取处于对数生长期的人脑胶质瘤SHG-44和U251细胞,分别加入5-氮-2’脱氧胞苷(5-Aza-CdR)培养6d后收集细胞,同时以未加5-Aza-CdR的正常培养细胞作为对照。提取细胞基因组DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测MGMT基因的甲基化状态,并利用蛋白质印迹方法检测MGMT蛋白的表达。将收集的细胞分为3组,分别加入浓度为125、100、75、50、25、15、10μg/ml的尼莫司汀(ACNU)和50、25、15、10、5、2.5、1μg/ml的替莫唑胺(TMZ)以及等量的完全培养液(阴性对照),采用噻唑蓝(MTT)法分别检测细胞对烷化剂药物的敏感性,以细胞存活50%时所对应的药物浓度(IC50值)作为衡量细胞对药物敏感性的指标,实验重复3次。结果正常培养的SHG-44细胞MGMT基因启动子呈甲基化状态,MGMT蛋白表达缺失,对ACNU和TMZ的IC50值分别为30、11μg/ml,表现为对烷化剂药物敏感;用5-Aza-CdR处理后,SHG-44细胞MGMT基因启动子成功脱甲基化,MGMT蛋白恢复表达,其对ACNU和TMZ的IC50值分别升高了2.5和3.1倍(均P<0.05),对烷化剂药物的敏感性发生逆转。而正常培养和5-Aza-CdR处理的U251细胞MGMT基因启动子均呈未甲基化状态,都能表达MGMT蛋白,并且均表现为对ACNU和TMZ烷化剂药物耐药。结论MGMT基因甲基化状态能稳定地反映细胞诱导MGMT蛋白表达的能力,并有可能成为预测肿瘤组织对烷化剂化疗药物敏感性的分子标记。
- 郑长青季守平宫锋常宏宇王颖丽高红伟李素波檀英霞章扬培
- 关键词：甲基化
- 一种清除非人类动物皮肤异种抗原的方法及低免疫原性非人类动物皮肤的制备方法
- 本发明公开了一种低免疫原性非人类动物皮肤及其制备方法与应用，是经重组α-半乳糖苷酶酶解处理后细胞表面的异种抗原α-半乳糖(α-Gal)被清除的非人类动物皮肤。本发明的非人类动物皮肤具有低免疫原性的特点，主要原因是异种抗原...
- 宫锋季守平高红伟李素波檀英霞鲍国强王颖丽
- 文献传递
- 血型改造研究
- 本项研究是以酶解和化学材料甲氧基聚乙二醇(mPEG)对红细胞血型进行改造,以期得到不具有免疫原性的“通用型”红细胞。主要包括五部分内容：(1)利用自制的基因工程α-半乳糖苷酶，将人类B型红细胞改遣成为O型红细胞。这一部分...
- 鲍国强宫锋季守平檀英霞高红伟李素波章扬培
- 关键词：红细胞血型Α-半乳糖苷酶血液资源
- 文献传递
- 一种将A型、B型或AB型人红细胞体外转变为O型的方法及其专用试剂与试剂盒
- 本发明公开了一种将A型、B型和AB型人红细胞体外转变为O型（A→O、B→O、AB→O）的方法及其专用试剂与试剂盒。其中酶解缓冲液是质量百分浓度为5％的葡萄糖溶液，洗涤缓冲液是生理盐水或PBS。本发明用商品化的产品5％葡萄...
- 宫锋高红伟季守平李素波檀英霞张雪鲍国强王颖丽
- 文献传递
- 类泛素蛋白FAT10对人肾上皮细胞α-烯醇酶共价修饰的初步研究被引量：1
- 2017年
- 目的:构建带Flag标签的α-烯醇酶(ENO1)基因以及带Myc标签的人白细胞抗原F相关转录物10(FAT10)基因的真核表达质粒载体,鉴定ENO1和FAT10在人肾上皮细胞株HEK293中的表达,检测类泛素蛋白FAT10是否共价修饰ENO1。方法:以人宫颈癌细胞系He La的c DNA为模板进行PCR,得到eno1目的片段,与分别经EcoRⅤ和SalⅠ酶切的pFlag-CMV载体连接得到重组质粒pFlag-CMV-eno1并进行鉴定测序;以人脑组织c DNA文库为模板进行PCR,得到fat10目的片段,与分别经Eco RⅠ和XhoⅠ酶切的p CMV-Myc载体连接得到重组质粒p CMV-Myc-fat10并进行鉴定并测序。将重组质粒用脂质体法转染HEK293细胞,用Western印迹检测ENO1和FAT10蛋白的表达。将重组质粒共转染HEK293细胞,用免疫共沉淀检测FAT10对ENO1的修饰情况。结果:重组克隆载体内的eno1和fat10序列与Gen Bank报告的序列完全一致;转染HEK293细胞后,ENO1和FAT10蛋白过表达;FAT10能够共价修饰ENO1。结论:类泛素蛋白FAT10共价修饰ENO1,为肿瘤的发生、发展及迁移的研究提供了新的研究思路。
- 陈圳川冷泠季守平
- 关键词：共价修饰
- 溶酶体贮积症的研究进展被引量：1
- 2012年
- 溶酶体贮积症是一种罕见的遗传缺陷疾病,溶酶体内未酶解的大分子累积,最终导致细胞功能障碍和临床异常情况。许多溶酶体底物在细胞结构和功能上都有关键的作用,因此溶酶体功能失常的影响非常广泛,如神经受累、间质受累、网状内皮组织受累及胎儿水肿。治疗方法主要有骨髓移植、酶替代疗法、底物减少治疗、基因治疗和分子伴侣治疗。利用转基因及其他一些前沿技术,将有可能彻底根除这些长期困扰人类的溶酶体贮积症。
- 让文亮季守平
- 关键词：溶酶体贮积症酶替代疗法基因治疗
