宋珂
- 作品数：16 被引量：33H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金武汉市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- bFGF及Shh时序传递促进骨再生的实验研究被引量：8
- 2011年
- 骨再生的治疗应着重于模拟机体自然的骨修复过程。我们假设在骨再生治疗的早期阶段应用促血管生成因子联合促骨再生因子来模拟自然的骨再生过程能更好更快的促进成骨。首先我们利用腺相关病毒分别携带这两个关键因子,构建了rAAV2-tet-off-bFGF and rAAV2-Shh,前者还加入了四环素调控系统,能通过四环素的添加来控制bFGF的表达。将这两种病毒共感染骨髓间充质干细胞,通过实时定量RT-PCT检测诸如核心结合因子1、碱性磷酸酶及骨钙素等成骨相关的标志因子,同时应用Western blot检测转基因的蛋白表达变化。接着,将这些转基因细胞与β-磷酸三钙颗粒复合,植入到大鼠的标准颅骨缺损中(直径为8mm)。30只SD大鼠平均分为6组,每组5只大鼠。A组植入两种转基因细胞及材料复合物;B组植入rAAV2-tet-off-bFGF转基因细胞及材料复合物;C组植入rAAV2-Shh转基因细胞及材料复合物;D组植入rAAV2-EGFP转基因细胞及材料复合物;E组植入单纯的骨髓间充质干细胞及材料复合物;F组为空白组,不植入任何细胞及材料。术后后5天,除B组外,每日在其它组的动物饮水中添加四环素的衍生物---强力霉素来关闭A组中bFGF的表达,并消除其它对照组的组间差异。术后4周收集颅骨标本,行Micro CT扫描及骨组织形态学分析。结果分析中我们发现,双因子共感染的细胞内成骨相关因子有显著的升高趋势(p<0.05),Micro CT及骨组织切片看见双因子时序调控的治疗组有相当显著的新骨再生,其中新生骨的面积及血管密度显著高于其它对照组,有统计学意义(p<0.05)。因此,我们得出结论,在骨再生初期的治疗过程中引入促血管生成因子及促成骨生成因子的时序协同作用能模拟机体自身的骨再生过程,能显著促进及加快新骨再生。
- 宋珂饶念静陈美玲黄正江曹颖光
- 关键词：碱性成纤维生长因子骨髓间充质干细胞
- 腺相关病毒介导的骨形态发生蛋白7基因促种植体周骨缺损修复的实验研究被引量：3
- 2008年
- 目的观察载bmp7基因的腺相关病毒(rAAV-BMP7)复合Bio-Oss的基因治疗方法对种植体周骨缺损修复的影响。方法体外构建载bmp7基因的腺相关病毒,并与Bio-Oss复合。6只雄性新西兰大白兔双侧胫骨植入种植体,并制备直径8mm、深4mm的种植体周骨缺损,A组骨缺损区填入rAAV-BMP7/Bio-Oss复合物;B组仅填入Bio-Oss;C组不充填材料。术后4、8周分期处死动物,取样进行组织学观察和形态学分析。结果A、B组骨缺损处均有新骨形成,A组较B组新骨形成更早、新生骨量更多、骨成熟程度更高(P<0.05)。结论rAAV-BMP7复合Bio-Oss较单纯植入Bio-Oss能更快、更有效地促进种植体周围骨缺损形成新骨,新骨量大且成熟度高,并能形成理想的种植体-骨结合界面。
- 宋珂杜建明罗仁惠曹颖光
- 关键词：骨形态发生蛋白7基因治疗骨再生骨整合
- 载bFGF基因腺相关病毒与骨支架材料复合的电镜观察
- 2008年
- 目的:探讨载bFGF基因的腺相关病毒(rAAV2-bFGF)与不同骨支架材料的复合情况,为颅颌面骨基因治疗提供实验依据。方法:验证腺相关病毒是否携带目的基因。在真空情况下将载bFGF基因的腺相关病毒分别与聚D,L-乳酸/羟基磷灰石(PDLLA/HA)和无机牛骨(Bio-Oss)两种支架材料充分混匀,4℃过夜,在透射电镜和扫描电镜下观察载bFGF基因的腺相关病毒与支架材料的复合情况。结果:物理滴度为2.5×1011v.g./ml的rAAV2-bFGFPCR产物鉴定结果正确,能够满足进一步实验的要求。扫描电镜观察载bFGF基因的腺相关病毒在PDLLA/HA和Bio-Oss两种材料表面均有分布、黏附。透射电镜可见载bFGF基因的腺相关病毒渗透入PDLLA/HA及Bio-Oss两种材料中。结论:载bFGF基因的腺相关病毒在PDLLA/HA和Bio-Oss中均有黏附及渗透,研究PDLLA/HA和Bio-Oss材料的自身特点,综合分析认为PDLLA/HA和Bio-Oss均可作为下一步基因治疗中病毒载体的支架材料。
- 陈美玲罗仁惠宋珂曹颖光
- 关键词：重组腺相关病毒骨支架材料
- bFGF及Shh时序传递促进骨再生的实验研究
- 骨再生的治疗应着重于模拟机体自然的骨修复过程.我们假设在骨再生治疗的早期阶段应用促血管生成因子联合促骨再生因子来模拟自然的骨再生过程能更好更快的促进成骨.首先我们利用腺相关病毒分别携带这两个关键因子,构建了rAAV2-t...
- 宋珂饶念静陈美玲黄正江曹颖光
- 关键词：碱性成纤维生长因子HEDGEHOG骨髓间充质干细胞
- 四环素调控的介导bFGF重组腺相关病毒的构建及体外实验被引量：1
- 2015年
- 目的:制备携带碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的病毒载体,能被四环素调控表达。方法:构建重组质粒pAAV-S3-bFGF,生产重组病毒rAAV2-tet-off-bFGF,并感染小鼠颅骨前成骨细胞MC3T3-E1,实时定量PCR检测强力霉素(doxycycline,Dox)调控下rAAV2-tet-off-bFGF对MC3T3-E1中成骨相关因子的影响。结果:生产出高滴度及纯度的重组病毒rAAV2-tet-off-bFGF,能被Dox调控,感染MC3T3-E1后能促进胞内成骨相关因子的表达升高。结论:这种重组病毒rAAV2-tet-off-bFGF能在Dox调控下有效传递外源基因,为骨组织工程中的种子细胞提供基因传递载体。
- 宋珂陈美玲石琦青莹曹颖光
- 关键词：腺相关病毒基因传递
- 碱性成纤维细胞生长因子联合Sonic Hedgehog时序调控骨髓间充质干细胞的体外实验研究被引量：1
- 2015年
- 目的:体外观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)联合Sonic Hedgehog(Shh)的时序性基因传递对骨髓来源的间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)中成骨相关因子的影响。方法:将前期实验中构建的重组病毒rAAV2-tet-off-bFGF及rAAV2-Shh感染原代培养的BMSCs,其中前者可被四环素调控系统调控bFGF的表达。real-time RT-PCR及Western blot检测各成骨相关因子的表达变化。结果:双病毒感染BMSCs后可被四环素衍生物强力霉素(doxycycline,Dox)调控。细胞内成骨相关因子的mRNA及蛋白水平较对照组都有不同程度的升高,变化具有统计学差异。结论:短期bFGF的表达联合Shh的基因传递能极大程度提高BMSCs的增殖能力,增加胞内成骨相关因子的表达水平,促进BMSCs成骨分化。
- 宋珂陈美玲石琦青莹曹颖光
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子HEDGEHOG骨髓间充质干细胞基因传递
- Shh修饰骨髓间充质干细胞与不同骨移植材料复合的体外观察被引量：1
- 2011年
- 目的:研究两种不同骨移植材料对Shh基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSCs)生长和增殖活性的影响。方法:差异贴壁法培养大鼠MSCs,携带音狸因子(Shh)腺相关病毒2型(rAAV2-Shh)转导MSCs,然后与两种不同的骨移植材料—聚D,L-乳酸/羟基磷灰石(PDLLA/HA)和β-磷酸三钙(β-TCP)体外复合。MTT法检测MSCs的增殖活性和黏附能力。扫描电镜观察MSCs在骨移植材料上的生长情况。结果:β-TCP组黏附和增殖活性均强于PDLLA/HA组(P<0.05)。此结果在扫描电镜观察中得到同样的证实。结论:与PDLLA/HA比较,β-TCP具有更良好的生物相容性。
- 陈美玲宋珂黄梦琪黄正江曹颖光
- 关键词：骨髓间充质干细胞骨移植材料增殖
- 骨支架材料修复大鼠颅骨缺损的实验观察
- 2008年
- 目的:通过制备大鼠颅骨缺损实验模型,比较β-TCP和Bio-oss在骨组织内的成骨能力及生物降解性,为后续实验提供依据。方法:分别将两种材料植入大鼠颅骨缺损模型,术后4周和8周分批处死动物,硬组织切片,组织形态学观察和高清晰度彩色医学图象分析系统定量测量新生骨百分率和材料降解率,进行统计学分析。结果:Bio-oss组的新生骨百分率高于同期的β-TCP组,而β-TCP组材料降解率高于同期的Bio-Oss组。结论:Bio-Oss的成骨能力相对较强,而β-TCP在体内降解速度较快。
- 罗仁惠杜建明宋珂曹颖光
- 关键词：骨缺损骨支架材料骨再生生物降解性
- 多元化骨组织工程修复颌骨缺损的研究进展被引量：3
- 2010年
- 肿瘤、外伤、炎症或先天疾病造成的颌骨缺损增加了口腔修复治疗的难度,也影响了修复体的预后。随着骨组织工程在骨缺损修复中的广泛应用,颌骨缺损修复的基础研究日益增多,并逐渐联合多个学科,采用多元化的技术方法修复缺损区,本文就多元化骨组织工程在颌骨缺损方面的研究进展做一综述。
- 宋珂曹颖光
- 关键词：骨组织工程颌骨缺损基因传递
- 转化生长因子-β1基因治疗对种植体周骨质疏松的影响被引量：6
- 2007年
- 目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因治疗对种植体周围骨质疏松和骨缺损的影响。方法构建pCDNA3.1(+)-TGF-β1真核表达载体,转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并与聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)体外黏附。制备骨质疏松大鼠股骨植入钛种植体模型,将24只Wister大鼠随机分为实验组、对照组和空白对照组,实验组为在种植体周骨缺损处植入TGF-β1基因修饰BMSCs复合PLGA;对照组为BMSCs复合PLGA。术后第4和8周取标本行免疫组化和组织学分析,观察种植体周骨组织中TGF-β1的表达和组织学变化。结果术后第4周,实验组骨缺损区的TGF-β1表达较对照组和空白对照组明显;第8周实验组骨缺损区被新生骨充填,骨质较对照组和空白对照组明显改善。结论TGF-β1基因修饰BMSCs体内回植后,可在种植体周围骨组织内表达TGF-β1,并可以影响种植体周骨缺损的修复和骨质疏松状况。
- 曹颖光王戎宋珂熊宗强杜建明王华均
- 关键词：转化生长因子-Β1骨髓间充质干细胞基因治疗种植牙
