张淑文
- 作品数：7 被引量：57H指数：5
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技攻关计划四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 麻疯树胚乳愈伤组织诱导及其污染消除被引量：40
- 2006年
- 经过比较分析各种消毒方法,获得了较为理想的麻疯树(Jatrophacurcas)胚乳愈伤组织,并动态观察其类型、形态特征、增殖速率和形态发生能力,为麻疯树胚乳植株再生及愈伤组织和细胞培养生产药用成分奠定了基础.以麻疯树成熟胚乳为外植体进行愈伤组织的诱导,测试0.4mg/L的分裂素(BA、KT与TDZ)与2.0mg/L的生长素(IAA、IBA、NAA与2,4D)搭配组合的诱导效果.结果表明,对胚乳愈伤诱导效果而言,2.0mg/L的2,4D效果最好,NAA的效果次之,IBA又次之,IAA的效果最差.BA和KT诱导效果差异不显著,TDZ的添加可促进胚乳愈伤组织的诱导.选择适宜的消毒剂(种类、浓度)和消毒(处理)时间对胚乳外植体的接种成功具有至关重要的作用.在本试验所采取的灭菌方式中,用70%酒精处理30s,然后用10%NaClO处理25min,灭菌效果最佳,同时对胚乳外植体的生长影响最小.
- 侯佩张淑文杨琳徐莺唐琳王胜华谭慧敏陈放
- 关键词：麻疯树胚乳愈伤组织诱导消毒剂消毒时间
- 麻疯树苯丙氨酸解氨酶启动子的克隆和表达载体的构建被引量：7
- 2007年
- 苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)是苯丙烷类代谢途径的关键酶,催化苯丙氨酸转化为肉桂酸,促进黄酮、香豆素等次生代谢物的生成。本文根据已克隆的麻疯树苯丙氨酸解氨酶基因JcPAL的序列设计引物,通过DNA步移技术,克隆出长度为1334bp的JcPAL基因起始密码子上游序列。序列分析显示其不仅具备CAAT、TATA盒这些保守元件,而且包含多种胁迫诱导元件,特别是在序列中发现一些苯丙氨酸解氨酶特有的元件。为了鉴定JcPAL基因的启动子元件,分别将长度不同的5′端侧翼区缺失体定向插入载体pBI121中,取代原有的CaMV35S启动子,构建了4个驱动报告基因GUS的植物表达载体。
- 张淑文高帆秦小波徐莺陈放
- 关键词：苯丙氨酸解氨酶启动子麻疯树
- 麻疯树胚乳cDNA文库的构建与分析被引量：13
- 2007年
- 以等质量比的不同发育阶段的麻疯树（Jatropha curcas L．）胚乳为材料构建麻疯树胚乳cDNA文库．初级文库滴度为1．5×10^6 Pfu／mL，重组率为99．7％，插入片段大小为0．4～4kb，平均约1kb．全长基因的比例达到20％．推测的蛋白质序列种类主要包括贮存蛋白相关、转录表达调控相关、脂肪酸合成相关及信号传导相关等同源基因序列．编码功能基因的类型与分布情况同Joseph A White等构建的蓖麻胚乳cDNA文库基本一致，个别类型如贮存蛋白合成相关基因的比例相比较低，信号传导与转录引子相关基因的比例较高．
- 王治涛高帆张淑文秦晓波徐莺
- 关键词：麻疯树CDNA文库胚乳
- 麻疯树（Jatropha curcas L.）苯丙氨酸解氨酶基因的克隆及功能研究
- 苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia-lyase，PAL）是苯丙烷类代谢途径的关键酶，催化苯丙氨酸转化为肉桂酸，促进黄酮、香豆素等次生代谢物的生成。麻疯树的这些次生代谢物具有多种生物学活性，具有广阔...
- 张淑文
- 关键词：麻疯树苯丙氨酸解氨酶基因克隆原核表达乙烯利
- 文献传递
- 麻疯树苯丙氨酸解氨酶（Jatropha curcas L.phenylalanine ammonia-lyase）基因的克隆及功能研究
- 苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase，PAL)是苯丙烷类代谢途径的关键酶，催化苯丙氨酸转化为肉桂酸，促进黄酮、香豆素等次生代谢物的生成。麻疯树的这些次生代谢物具有多种生物学活性，具有广阔...
- 张淑文
- 关键词：麻疯树苯丙氨酸解氨酶基因克隆原核表达乙烯利
- 文献传递
- 麻疯树curcin启动子的分离及其在转基因烟草中的功能分析被引量：6
- 2008年
- 核糖体失活蛋白是一类可以使核糖体28S rRNA的保守α茎环结构域脱嘌呤的蛋白质。麻疯树毒蛋白(curcin)前体基因编码麻疯树胚乳I型核糖体失活蛋白。从麻疯树基因组中克隆得到其5'侧翼区0.6 kb长的片段,将该片段插入pBI121载体置换其中的CaMV 35S启动子并在相应的转基因烟草中检测报告基因GUS的表达情况。经过GUS活性检测分析发现,该0.6 kb长的片段能够启动报告基因在种子中的表达,并且其在种子不同发育阶段的表达活性存在差异。同时,GUS组织化学染色定位分析表明,在双子叶植物中该启动子片段是胚乳特异性表达的,它从心形胚时期开始持续地在烟草的胚乳中发挥启动活性。
- 秦小波高继海徐莺张金平邵彩霞林莎张淑文江璐玎李月琴陈放
- 关键词：CURCIN麻疯树启动子核糖体失活蛋白
- 麻疯树胚乳类F-盒蛋白基因的克隆和载体构建被引量：5
- 2007年
- 通过随机测序从本实验室构建的麻疯树胚乳cDNA文库中获得了一条与多种植物、动物F-盒家族（F—box）序列相似的EST序列，并进一步克隆得到含有完整编码框的cDNA全长和基因组序列（Jc—Fbll）．Jc—FbllcDNA全长1672bp，开放阅读框为1224bp，编码的蛋白质含有407个氨基酸残基．Jc—Fbll推导的氨基酸序列与拟南芥、水稻中的同源F—box蛋白相似性分别为52％和75％；与人、斑马鱼、线虫等动物的F—box蛋白的相似性达到48％～56％．应用PfamSearch寻找功能结构域，发现其除了含有F-盒家族类结构域外，还有富含亮氨酸重复单位（1eucine—richrepeats，LRRs）．比对Jc—Fbll的基因组序列和cDNA序列，发现Jc—Fbll有两个长度分别为331bp和893bp的外显子和一个长362bp的插入序列，符合内含子的GT—AG法则，认为是Jc—Fbll的内含子．水稻、拟南芥基因组中的同源序列也出现了这种两个外显子、一个内含子的结构，且内含子位置较为保守．为了进一步研究麻疯树F—box蛋白的功能，构建了同时含有Jc—Fbll完整开放阅读框序列和绿色荧光蛋白标签的真核表达载体pBll21-Jc—Fbll—GFP，并经酶切鉴定构建成功．
- 高帆王治涛张淑文朱疏影吴迪张航徐莺陈放
- 关键词：麻疯树胚乳
