王治涛
- 作品数：5 被引量：30H指数：4
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- 麻疯树胚乳cDNA文库的构建与分析被引量：13
- 2007年
- 以等质量比的不同发育阶段的麻疯树（Jatropha curcas L．）胚乳为材料构建麻疯树胚乳cDNA文库．初级文库滴度为1．5×10^6 Pfu／mL，重组率为99．7％，插入片段大小为0．4～4kb，平均约1kb．全长基因的比例达到20％．推测的蛋白质序列种类主要包括贮存蛋白相关、转录表达调控相关、脂肪酸合成相关及信号传导相关等同源基因序列．编码功能基因的类型与分布情况同Joseph A White等构建的蓖麻胚乳cDNA文库基本一致，个别类型如贮存蛋白合成相关基因的比例相比较低，信号传导与转录引子相关基因的比例较高．
- 王治涛高帆张淑文秦晓波徐莺
- 关键词：麻疯树CDNA文库胚乳
- 水稻RSSG8基因启动子与GUS融合基因的构建及在烟草中的瞬间表达被引量：4
- 2004年
- 使用染色体步移(Genomewalking)法,从籼稻(Oryzasativasubsp indica)桂朝2号基因组中克隆到长度为471bp的水稻精细胞优势表达基因RSSG8的启动子片段R8PN,并进行了全序列测定和分析 该段序列中含有3个CAAT box,6个G box和多种植物顺式作用元件,但没有发现典型的TATA box,推测为一种特殊的启动子结构.为了鉴定RSSG8基因的基本启动子元件,将二条长度不同的5'端侧翼区缺失体(分别长471bp,260bp)定向插入载体pBI121中,取代原有的CaMV35S启动子,构了驱动报告基因GUS的植物表达载体pRGUS1,pRGUS2,通过农杆菌介导的瞬时表达法转化烟草叶片和花粉,快速鉴定启动子片段中起关键作用的区域.结果显示两个缺失片段都能启动GUS的表达,可以初步判定这两个片段具有启动子功能.
- 龚举成苟小平徐莺唐琳王乔王治涛陈放
- 关键词：启动子水稻GUS基因
- 麻疯树（Jatropha curcas L.）胚乳cDNA文库的构建及磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因克隆的研究
- 以等质量比的不同发育阶段的麻疯树/(Jatropha curcas L．/)胚乳为材料，提取纯化mRNA，使用Stratagene公司生产的cDNA Synthesis Kit、Gigapack Ⅲ Gold Packa...
- 王治涛
- 关键词：胚乳CDNA文库磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶麻疯树
- 文献传递
- 麻疯树胚乳类F-盒蛋白基因的克隆和载体构建被引量：5
- 2007年
- 通过随机测序从本实验室构建的麻疯树胚乳cDNA文库中获得了一条与多种植物、动物F-盒家族（F—box）序列相似的EST序列，并进一步克隆得到含有完整编码框的cDNA全长和基因组序列（Jc—Fbll）．Jc—FbllcDNA全长1672bp，开放阅读框为1224bp，编码的蛋白质含有407个氨基酸残基．Jc—Fbll推导的氨基酸序列与拟南芥、水稻中的同源F—box蛋白相似性分别为52％和75％；与人、斑马鱼、线虫等动物的F—box蛋白的相似性达到48％～56％．应用PfamSearch寻找功能结构域，发现其除了含有F-盒家族类结构域外，还有富含亮氨酸重复单位（1eucine—richrepeats，LRRs）．比对Jc—Fbll的基因组序列和cDNA序列，发现Jc—Fbll有两个长度分别为331bp和893bp的外显子和一个长362bp的插入序列，符合内含子的GT—AG法则，认为是Jc—Fbll的内含子．水稻、拟南芥基因组中的同源序列也出现了这种两个外显子、一个内含子的结构，且内含子位置较为保守．为了进一步研究麻疯树F—box蛋白的功能，构建了同时含有Jc—Fbll完整开放阅读框序列和绿色荧光蛋白标签的真核表达载体pBll21-Jc—Fbll—GFP，并经酶切鉴定构建成功．
- 高帆王治涛张淑文朱疏影吴迪张航徐莺陈放
- 关键词：麻疯树胚乳
- 从麻疯树胚乳中提取总RNA的快速方法被引量：11
- 2008年
- 以麻疯树胚乳为材料,建立了一种适合于提取富含油脂、蛋白及多酚、多糖等次生物质的植物总RNA的方法.其中,提取液Ⅰ在1.5%SDS和400mmol/LNaCl盐溶液条件下能快速有效破壁,酸酚/氯仿促进了细胞裂解以及油脂、蛋白的分离.而基于异硫氢酸胍法的提取液Ⅱ进一步强烈抑制RNase的活性,确保RNA不被降解,并以5mol/L高浓度NaCl溶液除去植物组织提取液中的多糖、多酚等次生物质,得到质量较好的总RNA样品.
- 林莎罗绍银林颖王治涛牛蓓秦小波李月琴徐莺陈放
- 关键词：RNA提取麻疯树胚乳
