张莹莹 作品数:6 被引量:33 H指数:4 供职机构: 东北农业大学 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 建筑科学 轻工技术与工程 更多>>
构建β-甘露聚糖酶的黑曲霉工程菌 被引量:4 2013年 目的:在黑曲霉CICC2462中表达经过改造的β-甘露聚糖酶基因(MAN)。方法:从黑曲霉CICC2462中扩增得到MAN(1 275bp),并针对黑曲霉CICC2462中高表达的糖化酶基因(glaA)位点,通过重叠延伸PCR将MAN基因片段与glaA的5’、3’同源臂进行拼接得到同源重组表达框GMG,将其定向插入表达载体pSZH-CYM中,构建黑曲霉表达载体pSZH-MAN,进而通过农杆菌介导法转化黑曲霉CICC2462。结果:经筛选获得4株重组菌株,并从中筛选出在glaA位点发生基因置换的同源重组菌株1株。对4株重组菌株的发酵液上清液进行酶活测定,结果表明MAN基因在黑曲霉中得到了分泌表达,静置培养8d后其分泌表达的β-甘露聚糖酶酶活最高可达12 467.2U/mL,而在出发菌株最高仅可达171.4U/mL,重组菌株是出发菌株的72倍。结论:此研究为简化β-甘露聚糖酶发酵生产工艺、提高产量提供了新的途径。 张莹莹 张会 李杰关键词:Β-甘露聚糖酶 黑曲霉 基因置换 农杆菌 同源重组 β-甘露聚糖酶基因和牛凝乳酶基因黑曲霉工程菌的构建 β-甘露聚糖酶(endo-1,4-β-D-mannanase;mannohydrolase;EC3.2.1.78)是一类半纤维素酶类,能够水解甘露聚糖中的β-1,4-D-甘露糖苷键,广泛存在与动植物和微生物中。β-甘露聚... 张莹莹关键词:甘露聚糖酶 黑曲霉 分泌表达 文献传递 食品级木聚糖酶黑曲霉工程菌的构建 被引量:19 2013年 从黑曲霉CICC2462中扩增得到木聚糖酶基因xynB的成熟肽编码序列(746 bp),并针对黑曲霉CICC2462中高表达的糖化酶基因位点,通过重叠延伸PCR将xynB基因片段与糖化酶基因的5'同源臂、3'同源臂进行拼接得到同源重组表达框GBG,将其定向插入表达载体pSZH-CYM中,构建黑曲霉表达载体pSZH-xynB。将载体pSZH-xynB通过冻融法转化农杆菌AGL1,通过农杆菌介导法转化黑曲霉CICC2462菌丝体。经潮霉素筛选和PCR鉴定获得47株重组菌株,并从其中12株中筛选出在糖化酶基因位点发生基因置换的同源重组菌株9株。而后通过连续传代、筛选和PCR检测,获得消除潮霉素基因的纯合的同源重组菌株,获得符合食品级生产要求的工程菌。对工程菌进行发酵培养、酶活性检测和SDS-PAGE分析,表明在糖化酶摇瓶发酵条件下,工程菌培养液上清的木聚糖酶活性高达4 495.8975 U·mL-1。研究结果为生产低木糖苷酶活性的内切木聚糖酶提供新途径,为利用黑曲霉表达系统安全高效地生产其他酶制剂和重组蛋白提供参考。 李杰 张会 张莹莹 双宝 王多佳 赵宁 李勇 赫福霞关键词:木聚糖酶 黑曲霉 同源重组 根癌农杆菌 普惠金融视角下黑龙江省金融扶贫的问题研究 贫困作为世界难题一直以来受到各方关注,十九大报告指出,十八大以来的五年,我国农村贫困发生率由10.2%降至4%以下,六千多万人口实现稳定脱贫。良好的脱贫效果源于扶贫战略由“输血式”向“造血式”的转变,金融资本不断流向“三... 张莹莹关键词:普惠金融 扶贫工作 政府职能 文献传递 园艺疗法对养老机构高龄老年人血压及幸福感的影响 被引量:7 2020年 [目的]探究园艺疗法对养老机构高龄老年人血压及幸福感的影响.[方法]随机将60名养老机构高龄老年人分为对照组30人和试验组30人(因身体原因,试验组持续参与者28人),试验组参与8周的园艺疗法活动,对照组不参与园艺疗法活动,试验实施前后每周采用血压仪测定收缩压、舒张压及脉搏等生理指标,并在实施前1周、第4周及第8周进行总体幸福感量表(General Well Being Schedule,GWB)评估.[结果]重复测量方差分析结果显示:两组收缩压组间比较,差异有统计学意义(P<0. 05),且随着干预时间延长,试验组收缩压降至正常水平,而对照组无显著变化(P>0. 05);两组总体幸福感评分组间比较,差异有统计学意义(P<0. 05);与对照组比较,试验组总体幸福感评分随干预时间延长而提高(P<0. 05).[结论]园艺疗法能够有效改善养老机构高龄老年人的血压水平,提升老年人的幸福感,是一种适合高龄老年人的活动方式. 王崑 张莹莹 张晓飞 张璐关键词:高龄老年人 血压 总体幸福感 园艺疗法 养老机构 哈尔滨市老年人居环境的园艺疗法应用设计研究 十八届五中全会提出建设“健康中国”的国家战略,但目前我国的养老模式还不能满足老年人居环境的健康需求,养老问题的供给矛盾突出。如何解决我国养老资源不均衡,营造适合各类型老年人居住的室内外环境是一个巨大的挑战。本文以哈尔滨市... 张莹莹关键词:园艺疗法 老年人 居住环境 优化设计