徐瑞成
- 作品数：84 被引量：481H指数：12
- 供职机构：武警后勤学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 哇巴因对血管内皮细胞ECV304细胞凋亡及胞内游离钙离子和活性氧浓度的影响被引量：5
- 2010年
- 目的研究哇巴因(毒毛花苷G)对人脐静脉血管内皮细胞ECV304凋亡的诱导作用,并探讨其可能的作用机制。方法哇巴因0.01,0.05,0.1,0.5,1和10μmol·L-1与ECV304细胞作用24,48和72h,MTT法检测细胞存活率,Hoechst33342/碘化丙锭双荧光染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡百分率,激光共聚焦显微镜观察细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)和活性氧(ROS)浓度,逆转录PCR和Western印迹法检测胱天蛋白酶3mRNA和蛋白表达。结果哇巴因在0.01～10μmol·L-1浓度范围内与ECV304细胞分别作用24,48和72h,对细胞存活的抑制率明显增加,且呈浓度和时间依赖性,24,48和72h浓度-效应相关系数分别为0.984,0.994和0.997(P<0.05);哇巴因作用24,48和72h的IC50值分别为0.624,0.184和0.041μmol·L-1,时间-效应相关系数为0.974(P<0.05)。哇巴因0.1μmol·L-1与ECV304细胞作用24h,细胞凋亡百分率由正常对照组的(4.2±0.5)%升高到(26.0±3.2)%,作用48h,细胞凋亡率由(4.7±0.5)%升高到(36.5±5.3)%,差异有统计学意义(n=3,P<0.01);同时细胞出现染色质凝集。哇巴因0.01,0.1和0.5μmol·L-1分别与ECV304细胞作用12,24和36h,[Ca2+]i和ROS浓度呈浓度和时间依赖性增加,在哇巴因0.5μmol·L-1时[Ca2+]i和ROS浓度的时间-效应相关系数分别为0.912和0.924,作用36h时[Ca2+]i和ROS浓度的浓度-效应相关系数分别为0.889和0.907(P<0.05)。逆转录PCR和Western印迹法分析显示,哇巴因0.1和0.5μmol·L-1作用ECV304细胞24h后,胱天蛋白酶3mRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);哇巴因0.01,0.1和0.5μmol·L-1作用ECV304细胞24h,胱天蛋白酶3蛋白表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论哇巴因可诱导人脐静脉血管内皮细胞ECV304凋亡,其机制可能与增加[Ca2+]i和ROS浓度及胱天蛋白酶3表达有关。
- 陈小义徐忠伟王娜徐瑞成
- 关键词：哇巴因内皮细胞细胞凋亡活性氧
- 鲨鱼软骨制剂对三种细胞系的抑制效应被引量：5
- 2000年
- 目的 :研究鲨鱼软骨制剂 ( SCP)对人胃癌细胞 ( MGC80 -3 )、红白血病细胞( K562 )、人脐静脉血管内皮细胞 ( VEC3 4 0 )的生长抑制作用 ,探讨其抗癌作用机制。方法 :采用盐酸胍抽提、丙酮分级沉淀、烘干、微孔滤膜过滤等步骤从鲨鱼软骨粉中提取鲨鱼软骨制剂 ;采用 MTT法检测不同浓度 SCP对体外培养的 MGC80 -3细胞系、K562细胞系和 VEC3 4 0细胞系的生长抑制作用。结果 :SCP明显抑制 MGC80 -3、 K562和 VEC3 4 0三种细胞系的生长 ,其 IC50值分别为 1 mg/ml、 0 .75～ 1 .5mg/ml和 3 mg/ml。结论 :SCP能直接抑制肿瘤细胞生长 ,又能抑制血管内皮细胞的生长 。
- 陈莉陈小义徐瑞成王津英
- 关键词：鲨鱼软骨人胃癌细胞系血管内皮细胞系
- 3-溴丙酮酸对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用被引量：2
- 2009年
- 目的观察3-溴丙酮酸(3-BrPA)对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用。方法对经0.25mmol/L～8.00mmol/L3-BrPA溶液处理的SMMC-7721细胞,采用MTT法检测细胞增殖抑制情况,并在荧光显微镜和电镜下观察细胞内部结构的变化。结果3-BrPA对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用,其中在0.75mmol/L浓度下的抑制作用最强;经处理后的细胞,在荧光染色下显示坏死细胞增多,在电镜下显示细胞染色质分散,少量核染色质凝聚。结论3-BrPA对SMMC-7721肝癌细胞有抑制作用。
- 邹满意陆伟罗雁王凤梅钱绍诚徐瑞成
- 关键词：SMMC-7721肝癌细胞增生
- 维甲类X受体RXRα蛋白在结直肠癌组织中的表达及意义被引量：1
- 2011年
- 【目的】探讨RXRα基因蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。【方法】选取结直肠癌标本53例,良性腺瘤标本31例;以正常结直肠粘膜标本37例作为对照组,用免疫组织化学ABC法检测RXRα的表达变化。【结果】RXRα在正常粘膜、良性腺瘤和结直肠癌组阳性表达率分别为89.2%、70.9%和49.1%,与正常粘膜组和良性腺瘤组比较,结直肠癌组RXRα表达率下降,差异有显著性(P<0.05);RXRα蛋白表达与肿瘤分化程度无相关性(P<0.05),而与肿瘤淋巴结转移和临床病理分期密切相关(P<0.05)。【结论】结直肠癌组织中RXRα蛋白表达显著低于良性腺瘤和正常粘膜组织,提示RXRα蛋白在结直肠癌演变中具有重要意义。
- 周艳红徐瑞成
- 关键词：结直肠癌正常粘膜
- 四种检测细胞凋亡方法的比较被引量：11
- 2000年
- 目的 :比较 4种细胞凋亡检测方法的优缺点。方法 :以 bufalin诱导 HL60细胞凋亡为例 ,选择 4种方法即电镜 ( EM)、DNA电泳、原位缺口标记法 ( TUNEL)和流式细胞术 ( FCM)检测细胞凋亡 ,并对凋亡率进行了比较。结果 :EM和 DNA电泳技术是定性说明凋亡的可靠方法 ,而TUNEL和 FCM擅长于定量检测凋亡细胞 ,EM、TUNEL 和 FCM检测的凋亡率具有显著相关性。结论 :研究细胞凋亡时宜选用既特异、灵敏 。
- 徐瑞成陈小义陈莉
- 关键词：细胞凋亡
- 维甲酸对胃癌细胞生长抑制及凋亡的诱导作用被引量：16
- 2006年
- 目的:研究9-顺-维甲酸(9-cis-RA)对人胃低分化黏液腺癌细胞(MGC80-3)的作用。方法:MTT比色法观察9-cis-RA对MGC80-3细胞株的生长抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态变化,Hoechst33342/PI双荧光染色和DNA凝胶电泳技术分析细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期的改变。结果:9-cis-RA可抑制MGC80-3细胞生长,半数抑制浓度(IC50)为8·07×10-6mol/L;显微镜观察可见细胞凋亡特征性改变;10-5mol/L浓度的9-cis-RA药物作用后96h可明显诱导MGC80-3细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测到DNA梯带;流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型亚二倍体凋亡小峰,G0/G1期细胞百分率明显升高,由对照组的(61·5±2·2)%增加到(74·3±4·7)%,F=149·795,P=0·000;同时处于S期的细胞数减少,由对照组的(26·3±1·3)%减少到(17·2±1·4)%,F=143·936,P=0·000。细胞周期出现G1期阻滞。结论:9-cis-RA对MGC80-3细胞有明显的生长抑制和诱导凋亡作用。
- 周艳红徐瑞成呼文亮
- 关键词：比色法流式细胞术
- 哇巴因信号的传递及其对细胞生长和死亡的影响被引量：12
- 2005年
- 哇巴因(ouabain)是能抑制Na+,K+ ATPase活性的强心甾类物质,在Na+,K+ ATPaseα亚单位位于细胞膜外侧有 1个ouabain特异性结合位点,ouabain结合时,活化胞浆中具酪氨酸蛋白激酶活性的Src,形成Na+,K+ ATPase Src复合物,作为一个活化的“二元”受体,介导信号传递。oua bain对细胞生长和死亡起重要调节作用。ouabain介导细胞发生杂合性死亡,即同一细胞兼具细胞肿胀、细胞器溶解等坏死特征和核凝集、DNA裂解、caspase级联反应等凋亡特征,对于细胞死亡的认识具有重要意义。
- 徐瑞成张敏
- 关键词：哇巴因信号传递细胞生长细胞死亡
- 蟾蜍灵对人胃癌细胞系MGc-803的细胞毒作用被引量：47
- 2000年
- 蟾蜍灵(bufalin)是我国传统中药蟾酥中蟾毒的主要成分之 一，研究其抑癌作用及机制具有重要意义。采用台盼蓝染色法、噻唑蓝还原法和光镜观察bu falin对人低分化胃腺癌细胞系MGc-803的生长抑制作用。结果显示，0.01 μmol/L及以上 浓度bufalin对MGc-803细胞具有显著的抑制作用，IC50值约为0.1 μmol/L。bufal in抑制MGc-803生长的机制是致使细胞核染色质凝缩、碎裂，DNA损伤，胞浆RNA含量下降， 导致细胞死亡。
- 陈小义徐瑞成陈莉钱进
- 关键词：蟾蜍灵胃癌肿瘤细胞系MGC-803细胞毒作用中药制剂
- 蟾蜍灵对HL-60细胞的生长抑制及凋亡诱导作用被引量：48
- 2000年
- 目的 研究中药蟾酥有效成分蟾蜍灵 (bufalin)对人白血病细胞的作用及其机制。方法 应用MTT比色法观察蟾蜍灵对细胞的抑制作用 ,荧光显微镜和透射电镜观察细胞结构的改变 ,DNA凝胶电泳、原位缺口标记法和流式细胞术等分析细胞凋亡。结果 ①蟾蜍灵明显抑制HL 6 0细胞的生长 ,半数抑制浓度 (IC5 0 )约为 0 .0 2 5 μmol L ;②典型的细胞形态学改变、DNA片段化和亚G1 峰的检出等证实蟾蜍灵能诱导白血病细胞凋亡 ;③ 0 .0 10 μmol L蟾蜍灵作用 2 4h即可明显诱导白血病细胞凋亡 ,凋亡率呈剂量和时间依赖性 ;④经蟾蜍灵作用后 ,细胞阻滞于S期 ,继而凋亡 ;⑤蟾蜍灵诱导的细胞凋亡能被核酸内切酶抑制剂氯化锌抑制 ,而不受蛋白质合成抑制剂放线菌酮的影响。结论 蟾蜍灵对白血病细胞有极强的诱导凋亡作用 ,主要作用于S期细胞 ,该作用不受蛋白质合成抑制剂的影响。
- 徐瑞成陈小义陈莉钱进
- 关键词：白血病HL-60细胞细胞凋亡蟾蜍灵
- 哇巴因通过阻遏激光激酶信号途径抑制肝癌细胞生长机制探索被引量：2
- 2020年
- 目的观察钠钾ATP酶抑制剂哇巴因抑制肝癌HepG2细胞的增殖和分裂效果,并探讨其作用机制。方法不同浓度(0.1、1.0、10.0μmol/L)哇巴因作用HepG2细胞24 h,以HepG2细胞为对照组,通过细胞活力检测试剂盒(CCK-8法)检测哇巴因对HepG2细胞增殖的抑制作用,细胞免疫荧光共定位(ICC法)检测细胞染色体分离状态,Western印迹检测极光激酶A(AURKA)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、促分裂原活化蛋白激酶(ERK)、p-ERK蛋白表达。结果0.1、1、10μmol/L哇巴因作用细胞24 h后,细胞生长抑制率分别为(23.50±4.57)%、(49.80±5.32)%和(72.10±5.62)%,与对照组相比差异均有统计学意义,抑制效果呈现浓度依赖性(F=32.8,均P<0.05);细胞免疫荧光共定位显示,1μmol/L哇巴因作用细胞24 h后,染色体分离发生障碍。与对照组相比,加药组细胞纺锤体直径显著较低,差异有统计学意义(t=9.58,P<0.05)。Western印迹结果显示,1μmol/L哇巴因作用HepG2细胞24 h后,与对照组相比,AURKA、p-mTOR、p-ERK表达较低(F=16.26,8.32,33.59;P<0.05),哇巴因可阻抑肝癌细胞在裸鼠体内生长(F=370.20,P<0.05)。结论哇巴因通过阻遏激光激酶信号途径,诱发肝癌HepG2细胞染色体分裂障碍、抑制肝癌细胞生长。
- 付丽娜徐忠伟徐瑞成方涛王凤梅
- 关键词：哇巴因细胞分裂
