方蕾
- 作品数：21 被引量：66H指数：6
- 供职机构：扬州大学医学院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家科技重大专项江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 一种以虾原肌球蛋白为致敏原的Th2反应小鼠模型的建立
- 目的:采用虾原肌球蛋白为致敏原建立Th2反应小鼠模型.方法:虾原肌球蛋白腹腔注射小鼠6周诱导Th2反应,测定小鼠血清总IgE、sIgE和sIgG水平、脾淋巴细胞分泌Th1和Th2细胞因子的含量,以及血液中嗜碱性粒细胞的活...
- 高源方蕾侯睿费巧玲蔡润兰齐云
- 关键词：TH2反应嗜碱性粒细胞IGE
- miR-144/451在虾原肌球蛋白诱导的过敏性哮喘小鼠气道炎症中的作用研究
- 2022年
- 为探讨miR-144/451基因敲除对过敏性哮喘小鼠的影响,用虾原肌球蛋白诱导野生型小鼠和miR-144/451基因敲除鼠过敏性哮喘模型,研究miR-144/451基因对小鼠过敏性哮喘的影响。试验分为野生型小鼠对照组(WT-Ctl)、miR-144/451基因敲除小鼠对照组(KO-Ctl)、野生型小鼠哮喘组(WT-Asthma)和miR-144/451基因敲除小鼠哮喘组(KO-Asthma)。哮喘组以20μg虾原肌球蛋白腹腔注射致敏小鼠,每周1次,连续3周。激发采用滴鼻50μg虾原肌球蛋白,连续7 d,诱导小鼠过敏性哮喘模型。末次激发24 h后,小鼠称体重,取小鼠肺脏和脾脏,计算肺重/体重比值和脾重/体重比值;采用苏木素-伊红染色方法观察肺组织病理学变化;分离小鼠血浆,采用ELISA法检测血浆白介素4(interleukin,IL-4)和IgE含量;测定虾原肌球蛋白刺激的脾脏淋巴细胞分泌IL-4和IL-5含量;流式检测支气管肺泡灌洗液中CD4^(+)5^(+)CD4^(+)细胞百分比;qRT-PCR法检测脾脏中CD4^(+)细胞Myc、IL-4、IL-5 mRNA水平。结果表明:与野生型小鼠对照组以及miR-144/451基因敲除小鼠对照组相比,哮喘组虾原肌球蛋白均能诱导小鼠出现明显的肺组织嗜酸性粒细胞浸润和Th2细胞因子分泌增加。与野生型小鼠哮喘组相比,miR-144/451基因敲除鼠在诱导哮喘模型后,表现为脾重/体重比值增加,更高的血浆IL-4水平及虾原肌球蛋白刺激脾脏淋巴细胞分泌IL-4和IL-5含量。miR-144/451基因敲除鼠支气管肺泡灌洗液中CD4^(+)5^(+)CD4^(+)细胞百分比有升高的趋势,脾脏中CD4^(+)细胞的Myc和IL-4 mRNA水平增加。综上,miR-144/451基因敲除加重过敏性小鼠肺气道炎症。
- 周姝婷侯瑞涛凌玲高翔李秀茹何振鹏方蕾郁多男
- 关键词：过敏性哮喘MYC
- 脂多糖气管滴注和盲肠结扎穿孔法分别诱导急性肺损伤小鼠模型的比较研究被引量：3
- 2021年
- 为比较经气管给予脂多糖(LPS)和盲肠结扎穿孔(CLP)法诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠模型之间的差异,并为选择适当的动物模型提供依据,以2.5 mg·kg^(-1)LPS经气管滴注诱导ALI,或小鼠盲肠远端结扎并用针孔直径1.2 mm的针头贯穿盲肠造成穿孔的方式诱导ALI。ALI模型12 h后,小鼠称体重,取小鼠肺组织,测定肺重/体重比值;采用苏木素-伊红染色方法观察肺组织病理学变化;分离小鼠血清并采集支气管肺泡灌洗液,采用酶联免疫吸附法检测血清和支气管肺泡灌洗液中白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;计数支气管肺泡灌洗液总细胞数;制备细胞甩片,采用苏木素-伊红染色法观察细胞形态。结果表明:与正常组相比,LPS诱导的ALI组小鼠肺重/体重比值升高,形态学表现为肺水肿、肺间隔增厚,肺间质炎细胞浸润,可见中性粒细胞;支气管肺泡灌洗液细胞因子IL-6和TNF-α含量明显升高,支气管肺泡灌洗液中总细胞数增加,形态学观察显示以中性粒细胞为主;CLP组诱导的ALI小鼠肺重/体重比值升高,形态学主要表现为肺水肿、肺间隔增厚,肺泡壁毛细血管充血;血清和支气管肺泡灌洗液中IL-6和TNF-α升高,其中血清中细胞因子升高较为显著,支气管肺泡灌洗液中总细胞数目增加,形态学观察显示以巨噬细胞为主。2种方法均可建立感染诱导的急性肺损伤模型,但肺局部感染或全身感染诱导的ALI存在一定差异。
- 何振鹏祁婷徐双依侯瑞涛李秀茹王欣怡方蕾
- 关键词：急性肺损伤脂多糖中性粒细胞巨噬细胞
- 虾原肌球蛋白诱导小鼠过敏性哮喘气道重塑模型的研究被引量：2
- 2021年
- 以虾原肌球蛋白每周腹腔注射致敏小鼠1次,连续3周,再持续进行6周滴鼻激发诱导小鼠发生气道重塑。采用ELISA法检测血清总IgE水平,测定肺气道阻力,HE染色观察肺组织形态学变化,PAS染色观察气道上皮细胞黏液分泌状态,Masson三色法检测胶原纤维增生,免疫组织化学法检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白的表达,以探索建立一种以虾原肌球蛋白为致敏原诱导的小鼠气道重塑模型。结果表明:与对照组相比,血清总IgE水平明显升高,气道阻力升高,肺组织出现明显的结构性改变,表现为细支气管周炎症细胞浸润,气道壁增厚,黏液高分泌,肺间质和气道壁胶原沉积,细支气管平滑肌肥大(α-平滑肌肌动蛋白阳性面积增加)。结果说明虾原肌球蛋白成功诱导小鼠气道重塑。
- 严莹邓晋芳解心仪陈静茹张顺婷何振鹏方蕾
- 关键词：小鼠气道重塑哮喘过敏
- 虾原肌球蛋白或卵清蛋白诱导的小鼠过敏性哮喘肺上皮损伤的比较研究
- 2022年
- 为比较虾原肌球蛋白和卵清蛋白分别诱导的小鼠过敏性哮喘肺上皮损伤,以同等剂量的虾原肌球蛋白(虾原肌球蛋白、虾原肌球蛋白含佐剂)或卵清蛋白(卵清蛋白、卵清蛋白含佐剂)每周腹腔注射致敏小鼠1次,连续3周,再进行持续7 d的抗原滴鼻激发诱导小鼠过敏性哮喘模型。测定肺指数,采用天狼星红染色法观察肺组织嗜酸性粒细胞浸润情况;PAS染色法观察肺组织支气管黏膜上皮增生和分泌黏液情况;qRT-PCR法检测肺组织上皮源性相关因子Tslp和IL-25,以及上皮紧密连接蛋白Zo-1、Ocln和Cldn18的mRNA表达水平。结果表明:与对照组相比,虾原肌球蛋白组(虾原肌球蛋白、虾原肌球蛋白含佐剂)、卵清蛋白含佐剂组均能诱导出明显的肺指数升高,肺组织嗜酸性粒细胞浸润和支气管黏膜细胞高分泌,肺组织上皮源性相关因子Tslp和Il-25的mRNA水平上调,上皮屏障紧密连接蛋白Zo-1、Ocln和Cldn18表达下调,但卵清蛋白组未见明显改变。在含佐剂组,虾原肌球蛋白组与卵清蛋白组相比,其诱导的嗜酸性粒细胞炎症,肺组织Tslp和Il-25 mRNA水平上调和Zo-1 mRNA水平下调更明显。这一研究提示虾原肌球蛋白能诱导更强的小鼠过敏性哮喘肺上皮损伤。
- 徐双依杨馨童王欣怡李秀茹侯瑞涛高翔方蕾
- 关键词：小鼠哮喘卵清蛋白
- 虾原肌球蛋白及其IgE单克隆抗体建立I型过敏反应体内外模型被引量：4
- 2016年
- 目的利用虾原肌球蛋白及其Ig E单克隆抗体建立I型过敏反应体内外模型。方法采用等电点沉淀法制备刀额新对虾原肌球蛋白,利用杂交瘤技术制备抗虾原肌球蛋白Ig E单克隆抗体。建立虾原肌球蛋白攻击Ig E单抗致敏的RBL-2H3细胞模型,测定β-氨基己糖苷酶释放量。利用虾原肌球蛋白及其Ig E单抗建立被动全身过敏反应小鼠模型,监测抗原攻击后30 min内肛温的变化。结果 Ig E单抗致敏的RBL-2H3细胞在虾原肌球蛋白攻击后发生脱颗粒,β-氨基己糖苷酶释放量明显增加。虾原肌球蛋白及其Ig E单抗诱导了小鼠被动全身过敏反应,抗原攻击后小鼠肛温平均下降约1.44℃。结论虾原肌球蛋白及其Ig E单克隆抗体成功建立了I型过敏反应体内外模型。
- 方蕾侯睿费巧玲高源刘芬蔡润兰齐云
- 关键词：原肌球蛋白刀额新对虾免疫球蛋白ERBL-2H3细胞
- 一种以虾原肌球蛋白为致敏原的Th2反应小鼠模型的建立被引量：7
- 2017年
- 目的:采用虾原肌球蛋白为致敏原建立Th2反应小鼠模型。方法:虾原肌球蛋白腹腔注射小鼠6周诱导Th2反应,ELISA测定小鼠血清总IgE、sI gE和sI gG水平、脾淋巴细胞分泌Th1和Th2细胞因子的含量,采用流式细胞术检测血液中嗜碱性粒细胞的活化。结果:与对照组比较,致敏6周的小鼠血清总IgE、sI gE和sI gG(sI gG 1、sI gG 2a和sI gG 2b)均显著升高;脾淋巴细胞在抗原刺激后分泌Th2细胞因子(IL-4、IL-5、IL-10和IL-13)增加,而Th1细胞因子INF-γ则出现明显降低;血液中嗜碱性粒细胞表面标志物CD200R和CD41表达增强。结论:成功建立一种以虾原肌球蛋白为致敏原的Th2反应小鼠模型。
- 方蕾侯睿费巧玲高源蔡润兰齐云
- 关键词：TH2反应嗜碱性粒细胞IGE
- miR-144/451在呼吸系统疾病中的研究进展被引量：6
- 2020年
- 微RNAs(miRNAs)在正常细胞发育分化及多种疾病的发生、发展过程中起重要的调控作用。miR-144/451在红细胞中高表达,被认为是红系分化发育的重要调节因子,参与血液疾病(如β珠蛋白合成障碍性贫血)的发生、发展,还参与除红系疾病以外多种疾病,如肿瘤、心血管疾病、呼吸系统疾病等的发生发展。miR-144/451在肺组织中的异常表达与肺的炎症性疾病(如肺部急性感染、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化以及肺部肿瘤等重大呼吸系统疾病)病理进程密切相关,可能成为治疗这些疾病的新靶点。
- 颜月李桃方蕾
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病肺纤维化肺癌
- 虾原肌球蛋白诱导小鼠变应性鼻炎模型的建立被引量：1
- 2019年
- 取C57BL/6J小鼠20只,分为对照组和模型组,每组10只,模型组以虾原肌球蛋白为致敏原诱导小鼠变应性鼻炎,对照组给予等体积的佐剂,观察小鼠鼻黏膜组织形态学改变,检测血浆总IgE水平、外周血嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞百分比,以建立虾原肌球蛋白为变应原诱导的小鼠变应性鼻炎模型。结果表明:与对照组相比,虾原肌球蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎,鼻黏膜上皮细胞水肿、黏液分泌旺盛,黏膜固有层嗜酸性粒细胞和肥大细胞浸润,血浆总IgE升高,外周血嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞百分比增高。这一研究提示采用虾原肌球蛋白为致敏原成功诱导小鼠变应性鼻炎。
- 陈燕姚婕何志怡颜月严莹赵心悦方蕾
- 关键词：小鼠变应性鼻炎嗜酸性粒细胞肥大细胞
- 丹酚酸B对脑缺血再灌注损伤小鼠血管保护作用被引量：12
- 2016年
- 目的:探讨丹酚酸B对脑缺血再灌注损伤小鼠血管保护作用。方法:复制小鼠脑缺血再灌注模型,测定再灌注12 h后脑含水量和脑指数、血浆TXB2和6-keto-PGF1α含量,观察脑皮质病理学的改变及内皮P-选择素和ICAM-1的表达。结果:丹酚酸B可降低脑含水量和脑指数、血浆TXB2含量和TXB2/6-keto-PGF1α比值以及脑皮质血管内皮P-选择素和ICAM-1的表达,缓减了神经元水肿。结论:丹酚酸B对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制,可能与其维持血管活性物质TXB2/6-keto-PGF1α平衡及降低血管内皮细胞黏附分子的表达,从而改善损伤组织局部血管功能有关。
- 方蕾杨美娟蒋玉凤
- 关键词：丹酚酸B脑缺血再灌注P-选择素ICAM-1小鼠
