曹广煜
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市卫生局医学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生电子电信更多>>
- 丹参酮ⅡA增效大鼠骨髓源性内皮祖细胞VEGF、SDF-1表达被引量：12
- 2012年
- 目的:研究在丹参酮ⅡA的辅助下,骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)VEGF与SDF-1表达是否能增强,从而促进细胞归巢。方法:Percoll密度梯度离心法分离SD大鼠骨髓单个核细胞,血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子((EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导培养,并进行形态学、免疫学(免疫细胞化学染色)、功能学(Dil-acLDL与FITC-UEA-1双荧光染色)鉴定。将鉴定为EPCs的细胞分为单纯EPCs组(对照组)、EPCs+丹参酮ⅡA组(加药组)。细胞培养第9d,Western blot与实时荧光定量PCR检测各组VEGF、SDF-1基因与蛋白表达。结果:EPCs+丹参酮IIA组VEGF、SDF-1基因与蛋白表达均高于EPCs组(p均<0.05)。结论:丹参酮ⅡA可上调大鼠骨髓源性内皮祖细胞VEGF及SDF-1表达,从而可能在缺血环境中更好促进EPCs归巢,更有效促进血管修复与再生。
- 杨彦陈庆伟曹广煜李桂琼
- 关键词：骨髓内皮祖细胞归巢血管新生
- HbA1c与冠状动脉病变程度的相关性研究
- 王鹏曹广煜杨彦张亚梅肖雷陈庆伟李兴升吴志勤李桂琼柯大智邓玮王丽莫显刚
- 关键词：糖化血红蛋白冠心病冠脉狭窄程度经皮冠状动脉介入
- Ghrelin对骨髓源性内皮祖细胞迁移能力的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨ghrelin对体外培养的内皮祖细胞（EPCs）迁移能力的影响及相关的信号转导途径。方法密度梯度离心法获取大鼠骨髓单个核细胞层,接种至纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7～10d后观察细胞形态学改变,以免疫组织化学染色法检测Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白（Dil-acLDL）,FITC标记的荆豆凝集素l（FITC-UEA-1）,以及CD34、CD133、人血管性血友病因子（vWF）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）特异的酪氨酸激酶受体（Flk-1）,鉴定细胞种类后传代培养。采用不同浓度（10-9～10-6mol/L）的ghrelin干预EPCs后,通过Transwell小室迁移实验检测EPCs迁移能力的变化。用不同浓度（10-9～10-6mol/L）的ghrelin干预EPCs 15min或10-7mol/L的ghrelin干预0～60min,Western blotting检测蛋白激酶B（Akt）及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）及其磷酸化状态的表达;分别用磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）的特异性抑制剂LY294002和eNOS的特异性抑制剂L-NAME预处理EPCs,检测ghrelin对EPCs迁移及Akt、eNOS及其磷酸化蛋白表达的变化。结果新分离24h内的EPCs近似圆形,培养第4~7天转化为梭形贴壁细胞,培养至第9天后梭形细胞呈条索样排列生长。Dil-acLDL和FITC-UEA-1双染色阳性,CD34、CD133、vWF和flk-1免疫组织化学染色均呈阳性反应。分别用10-9～10-6mol/L的ghrelin干预内皮祖细胞,发现10-8、10-7mol/L的ghrelin可明显促进内皮祖细胞的迁移（P〈0.001）,而更高浓度（10-6mol/L）的ghrelin则可显著抑制EPCs的迁移（P〈0.05）。Ghrelin呈时间和剂量依赖性地促进EPCs表达磷酸化Akt和eNOS;PI3K特异性抑制剂LY294002能明显抑制ghrelin诱导的Akt、eNOS的磷酸化表达（P〈0.05）;eNOS的特异性抑制剂L-NAME能明显抑制ghrelin诱导的eNOS磷酸化表达（P〈0.05）,但对Akt的磷酸化表达无影响。LY294002和L-NAME均能显著抑制ghrelin诱导的内皮祖细胞迁移（P〈0.05）。结论 Ghrelin可通过激活PI3K
- 王丽陈庆伟李桂琼杨彦曹广煜李兴升
- 关键词：GHRELIN内皮干细胞细胞运动
- 双特异性抗体制备及装配内皮祖细胞可行性研究
- 2013年
- 目的:通过化学偶联法制备抗肌凝蛋白轻链/CD34双特异性抗体(BsAb),并装配在内皮祖细胞(EPCs)表面。方法:分离和培养大鼠骨髓来源EPCs。通过化学偶联法构建BsAb以及FITC标记的BsAb。分别将10ng、25ng、50ng和100ng的FITC标记的BsAb与1×106个EPCs混合,在荧光显微镜及流式细胞仪下观察抗体与细胞的结合情况,以筛选出抗体装配的最佳浓度。使用上述实验所筛选出的条件,装配BsAb和EPCs备用。结果:通过化学偶联法成功制备抗肌凝蛋白轻链/CD34双特异性抗体(BsAb),并能够装配在内皮祖细胞(EPCs)表面。BsAb在EPCs表面装配的最佳浓度为50ng/106细胞。结论:BsAb构建成功,并在EPCs表面成功装配BsAb。
- 李桂琼陈庆伟杨彦曹广煜
- 关键词：双特异性抗体内皮祖细胞
- HbA_1c与冠状动脉病变程度的相关性研究被引量：4
- 2011年
- 目的探讨HbA_1c水平与冠状动脉病变程度的相关性及临床意义。方法对临床疑诊或诊断为冠心病(CHD)而行冠状动脉造影的541例患者进行HbA_1c测定分组,评价HbA_1c水平与CHD、冠脉狭窄程度(Gensini积分法)、冠脉狭窄支数及接受PCI治疗等的相关性。结果随HbA_1c水平升高,CHD患病率显著上升(P<0.01),Spearman等级相关分析显示,HbA_1c与CHD、病变支数、Gensini积分和接受PCI治疗显著相关(r=0.211,P<0.01;r=0.213,P<0.01;r=0.233,P<0.01;r=0.137,P<0.01)。Logistic多元逐步回归分析结果显示,HbA_1c为CHD的独立危险因素(OR=1.436,95%CI为1.128～1.828,P<0.01)。结论 HbA_1c与冠脉病变程度呈正相关,长期升高可能促进CHD的发生。
- 王鹏陈庆伟李兴升吴志勤李桂琼柯大智邓玮王丽莫显刚曹广煜杨彦张亚梅肖雷
- 关键词：糖化血红蛋白冠心病经皮冠状动脉介入
- 大鼠骨髓与外周血来源内皮祖细胞生物学特性比较被引量：5
- 2013年
- 背景:内皮祖细胞不仅参与胚胎血管生成,也参与出生后血管发生和血管内膜损伤后修复,对治疗缺血性疾病意义重大,但目前对内皮祖细胞的分离、培养、鉴定还存在争议。目的:体外分离、培养大鼠骨髓与外周血来源的内皮祖细胞,并比较其生物学特性。方法:密度梯度离心法分离SD大鼠骨髓和外周血单个核细胞,接种于纤维连接蛋白铺被的培养瓶中贴壁培养,用加入血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子及表皮生长因子的完全培养基诱导培养,对获得的贴壁细胞进行细胞形态学,免疫细胞化学染色,流式细胞仪,透射电镜,以及Dil-acLDL、FITC-UEA-1双荧光染色法检测。结果与结论:骨髓来源的内皮祖细胞数量多,集落状生长,增殖能力强;外周血来源的内皮祖细胞数量较少,散在生长,消化后能贴壁但不能传代。两种不同来源的内皮祖细胞免疫细胞化学检测贴壁细胞CD133、CD34、Flk-1、Ⅷ因子在不同时段呈阳性表达;激光共聚焦显微镜观察,Dil-acLDL、FITC-UEA-1均为双染。透射电镜检查外周血来源的内皮祖细胞发现W-P小体。提示大鼠骨髓和外周血均能分离培养出内皮祖细胞,但前者是早期内皮祖细胞,后者为晚期内皮祖细胞,两者生物学特性各不相同。
- 曹广煜陈庆伟李兴升杨彦李桂琼
- 关键词：干细胞内皮祖细胞外周血免疫细胞化学染色晚期内皮祖细胞生物学特性
- 川芎嗪联合超声微泡介导内皮祖细胞移植治疗大鼠心肌梗死的研究
- 第一部分内皮祖细胞的分离、培养、鉴定 目的：体外分离、培养、鉴定大鼠骨髓来源的内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cells，EPCs)，并诱导分化成为成熟血管内皮细胞。 方法：无菌分离大鼠四肢...
- 曹广煜
- 关键词：川芎嗪超声微泡心肌梗死免疫组织化学法
- Ghrelin对骨髓源性内皮祖细胞迁徙能力的影响
- 王丽陈庆伟李桂琼杨彦曹广煜李兴升
- 关键词：GHRELIN内皮干细胞细胞运动
