李江南
- 作品数:14 被引量:15H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 应用化学合成siRNA抑制猪瘟病毒增殖的研究
- 本研究针对猪瘟病毒三个基因,设计6个RNA干扰靶点,2个针对Npro基因、1个针对NS2基因和3个针对NS3基因。首先由公司合成以上干扰靶点的siRNA分子,将化学合成的siRNA分子转染PK-15细胞单层6h,转染完成...
- 李江南郭换成涂长春
- 关键词:猪瘟病毒RNAI
- 文献传递
- 茎环法RT-qPCR定量检测细胞抗猪瘟病毒siRNA的
- RNAi(RNA interfererice)已成为特异抗病毒治疗研究的热点,但siRNA(small interfering RNA)的定量检测仍是评价RNAi抗病毒效果的瓶颈。为了检测抗CSFV特异siRNA分子(s...
- 刘帅李江南袁婷杨凡力逄大欣涂长春
- 文献传递
- 应用化学合成siRNA抑制猪瘟病毒增殖的研究
- 本研究针对猪瘟病毒三个基因,设计6个RNA干扰靶点,2个针对Npro基因、1个针对NS2基因和3个针对NS3基因。首先由公司合成以上干扰耙点的siRNA分子,将化学合成的siRNA分子转染PK-15细胞单层6 h,转染完...
- 李江南郭换成涂长春
- 关键词:猪瘟病毒RNAI
- 文献传递
- 细胞亲环蛋白A对猪瘟病毒复制与增殖的影响
- 细胞亲环蛋白A(cyPA)在多种病毒感染中起重要的调控作用。本实验室前期蛋白质组学研究发现,猪瘟病毒(csFv)感染后PK-15细胞的cyPA明显上调表达。为探讨cyPA在csFV复制与增殖中的作用,本研究首先采用环孢素...
- 戴雅娟李江南郭焕成冯烨任立群涂长春
- 关键词:猪瘟病毒病毒复制增殖
- 文献传递
- 细胞亲环蛋白A对猪瘟病毒增殖的影响被引量:2
- 2012年
- 细胞亲环蛋白A(CyPA)在多种病毒感染中起重要的调控作用。本实验室前期蛋白质组学研究表明,猪瘟病毒(CSFV)感染PK-15后细胞的CyPA明显上调表达。为研究CyPA在CSFV增殖中的作用,本研究首先采用环孢素A(CsA)处理PK-15细胞,特异性地抑制CyPA顺反异构酶活性,观察对CSFV的影响,在CsA处理后24 h、48 h、72 h收集细胞和细胞冻融上清,进行病毒基因组拷贝数和病毒滴度测定。结果表明CsA处理能够抑制CSFV在PK-15细胞中的增殖。同时,采用RNA干扰方法,下调PK-15细胞中CyPA的表达,结果也能够抑制CSFV在细胞中的增殖。本研究结果证明CyPA对CSFV在PK-15细胞中的增殖具有调控作用,对进一步阐明CSFV与宿主细胞蛋白的相互作用具有重要意义。
- 戴雅娟李江南郭焕成冯烨任立群涂长春
- 关键词:猪瘟病毒环孢素ARNA干扰
- 抑制猪瘟病毒复制感染的小干扰RNA及制备方法和应用
- 本发明公开了一种抑制猪瘟病毒复制感染的小干扰RNA及其编码序列,同时还公开了制备抗猪瘟病毒感染生物制剂的方法,应用RNA干扰法生产治疗CSFV感染的生物制剂,得到了高效、特异抑制猪瘟病毒的siRNA,适用于工业化生产。本...
- 涂长春李江南郭焕成
- 茎环法RT-qPCR定量检测细胞抗猪瘟病毒siRNA的表达被引量:3
- 2012年
- RNAi(RNA interference)已成为特异抗病毒治疗研究的热点,但siRNA(small interfering RNA)的定量检测仍是评价RNAi抗病毒效果的瓶颈。为了检测抗CSFV特异siRNA分子(siN1和siN2)在细胞中的表达水平,设计并以交叉组合方法筛选了具有较高特异性和灵敏度的siRNA特异茎环引物(SLP-N1-6和SLP-N2-8),成功地建立了最优的siN1和siN2的茎环法RT-qPCR检测方法。该方法表现出良好的特异性和较高的灵敏度,能检测出102至108个拷贝的siRNA,至少可达7个数量级的检测范围,平行性好(Rsq=0.999),扩增效率高(Eff.=98.2%)。茎环法RT-qPCR能准确地定量检测抗CSFV的PK-15细胞克隆的siN1/siN2表达水平,可结合常规的检测病毒水平的间接免疫荧光和TCID50等技术定量评价RNAi抗CSFV的有效性,为未来抗猪瘟转基因猪的抗病毒效果评价提供了先进的检测技术。
- 刘帅李江南袁婷杨凡力逄大欣涂长春
- 关键词:实时定量PCR
- 血红素加氧酶1对猪瘟病毒复制的影响被引量:1
- 2010年
- 本实验研究了猪血红素加氧酶1对猪瘟病毒(CSFV)在PK-15细胞中复制的影响,本研究应用siRNA干扰方法抑制PK-15细胞中血红素加氧酶1表达后再接种CSFV,细胞中CSFV基因组增殖与对照组相比显著下降;感染病毒细胞中和培养上清中CSFV滴度也显著降低。本实验首次报道了干扰细胞中HO-1表达对CSFV细胞中增殖的影响,提出了CSFV与血红素加氧酶1新的相互作用关系。
- 史子学杨知曲会李江南朱妍郭焕成涂长春
- 关键词:猪瘟病毒血红素加氧酶1
- 尼帕病毒融合蛋白、受体结合蛋白的表达及特异性抗血清制备
- 尼帕病毒囊膜功能融合蛋白F和受体结合蛋白G在病毒感染和诱导机体产生保护免疫中起着重要的作用.通过PCR扩增获得尼帕病毒F1和G基因片段,将F1和G基因克隆至原核表达载体和经改造过的杆状病毒表达载体.IPTG诱导大肠杆菌表...
- 刘勇军肖昌李江南向华王贵平宣华涂长春
- 关键词:尼帕病毒融合蛋白受体结合蛋白重组杆状病毒
- 文献传递
- 抑制猪瘟病毒复制感染的小干扰RNA及制备方法和应用
- 本发明公开了一种抑制猪瘟病毒复制感染的小干扰RNA及其编码序列,同时还公开了制备抗猪瘟病毒感染生物制剂的方法,应用RNA干扰法生产治疗CSFV感染的生物制剂,得到了高效、特异抑制猪瘟病毒的siRNA,适用于工业化生产。本...
- 涂长春李江南郭焕成
- 文献传递