杨智洪
- 作品数：33 被引量：61H指数：4
- 供职机构：荣县中医医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 结缔组织生长因子小干扰RNA的构建及其干扰效果检测被引量：1
- 2008年
- 目的:构建结缔组织生长因子(CTGF)基因的小干扰RNA(siRNA),并检测其对CTGF基因表达的干扰效果。方法:根据CTGF基因序列,设计2条合理的CTGF-siRNA,并将其克隆到siRNA载体pSliencer2.1-U6 neo中,转化大肠杆菌DH5α,挑取阳性菌落进行酶切和测序鉴定;将构建成功的CTGF-siRNA重组质粒与带FLAG标签的CTGF表达载体共同转染人胚肾293T细胞,Western印迹检测siRNA的干扰效果。结果:构建了2个CTGF-siRNA重组质粒,2条siRNA都有干扰作用,其中一条的干扰效果可达75%以上。结论:构建的CTGF-siRNA可为进一步研究CTGF的功能提供参考。
- 李勤操郑喜邦王晓晖杨智洪姜艳超丁丽华李杰萍叶棋浓
- 关键词：结缔组织生长因子小干扰RNA
- 雌激素受体β共调节因子的研究进展被引量：2
- 2006年
- 雌激素受体(ER)包括α和β等2种,均为核受体。ERβ在乳腺癌预后和激素治疗耐受中有重要意义,其活性受与之相互作用的共调节因子的影响。这些共调节因子有的能与2种ER发生作用,有的只能特异地作用于其中一种。本文简要综述了与ERβ相互作用的共调节因子的相关研究进展。
- 杨智洪王晓辉韩聚强袁斌叶棋浓
- 关键词：雌激素受体Β相互作用
- 类泛素家族SUMO-1和UBC9的克隆、融合表达及纯化被引量：2
- 2008年
- 目的:克隆类泛素化家族SUMO-1和UBC9基因,表达并纯化二者与谷胱甘肽S-转移酶(GST)的融合蛋白。方法:用PCR方法从乳腺文库中扩增SUMO-1和UBC9的编码序列,分别将其以正确相位与pGEX-KG载体中的GST编码序列融合,得到重组质粒pGST-SUMO-1和pGST-UBC9,分别转化大肠杆菌DH5α,表达融合蛋白GST-SUMO-1和GST-UBC9;用谷胱甘肽-Sepharose4B亲和纯化融合蛋白;用Western印迹检测融合蛋白的表达及纯化。结果:分别构建了SUMO-1和UBC9的融合表达载体;Western印迹检测表明,GST-SUMO-1和GST-UBC9融合蛋白获得表达;纯化得到了融合蛋白。结论:克隆、表达并纯化了SUMO-1和UBC9与GST的融合蛋白。
- 韦玮丁丽华张浩杨智洪崔家骏周岩李勤操毛建平叶棋浓
- 关键词：SUMO-1UBC9克隆融合蛋白
- 运用新型的反向PCR策略高效构建基因的点突变体被引量：4
- 2011年
- 基因的点突变体在其结构和功能研究中发挥非常关键的作用,如何高效、经济地构建基因点突变体是许多分子生物学研究遇到的棘手问题.以PIAS3点突变体的构建为对象,设计了新型的以反向PCR为基础的点突变构建流程,获得的点突变体质粒经测序后均与预期相符,并在293T细胞内得到了正确表达.以上结果表明,该实验设计方案能够高效、方便地用于基因点突变体的构建,为进一步研究它们的分子功能打下了基础.
- 程龙韩白玉侯莎韩永健徐小洁蒋凯李法曾杨智洪窦京涛吕朝晖张浩叶棋浓
- 关键词：反向PCRPIAS3点突变
- 含p21启动子的荧光素酶报告基因的构建和活性测定被引量：3
- 2007年
- 目的:克隆p21基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,并检测其活性。方法:采用PCR技术从人乳腺癌细胞系MCF-7基因组中扩增出p21启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,确定所扩增的DNA序列,在293T细胞中检测其活性。结果:测序结果表明扩增的p21启动子序列正确,活性实验表明构建的报告基因具有启动子活性,雌激素受体(ER)α能以剂量依赖的方式升高p21报告基因的转录。结论:克隆了p21启动子,为ERα共调节子的功能研究提供了重要基础。
- 姜艳超丁丽华杨智洪胡建民李杰萍张浩袁斌李熔叶棋浓
- 关键词：荧光素酶报告基因转录活性
- pax2启动子的克隆及其在人胚胎肾293T细胞中的转录活性被引量：2
- 2007年
- 目的:克隆paired box2(pax2)基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,并检测其活性。方法:采用PCR技术从人乳腺癌细胞系MCF-7基因组中扩增出pax2启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,确定所扩增的DNA序列。将重组的报告基因瞬时转染人胚胎肾293T细胞,检测pax2启动子活性。结果:测序结果显示扩增的pax2启动子序列正确;活性实验表明构建的报告基因具有启动子活性,雌激素受体α(ERα)能以剂量依赖的方式升高pax2报告基因的转录。结论:克隆了pax2启动子,为ERα共调节子的功能研究提供了重要基础。
- 姜艳超丁丽华杨群辉胡建民曾敏杨智洪王晓辉李熔叶棋浓
- 关键词：荧光素酶报告基因转录活性
- ER对雌激素共调节因子NFAT3的转录调节
- ＜正＞目的:NFAT（Nuclear factor of activated T-cell）家族在人体生理和病理过程中发挥着重要的作用,但是对NFAT3的转录调节因子却知之甚少。通过本室前期的实验,我
- 秦玺王晓辉杨智洪丁丽华徐小洁程龙牛畅孙慧伟张浩叶棋浓
- 关键词：ER相互作用磷酸化转录活性
- 含p27启动子的荧光素酶报告基因的构建和活性测定被引量：1
- 2007年
- 目的:克隆p27基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,并检测其活性。方法:采用PCR技术从人乳腺癌细胞系MCF-7基因组中扩增出p27启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,确定所扩增的DNA序列,在293T细胞中检测其活性。结果:测序结果显示扩增的p27启动子序列正确,活性实验表明构建的报告基因具有启动子活性,雌激素受体(ER)α能以剂量依赖的方式升高p27报告基因的转录。结论:克隆了p27启动子,为ERα共调节子的功能研究提供了重要基础。
- 姜艳超丁丽华胡建民杨群辉曾敏杨智洪江泽飞李熔叶棋浓
- 关键词：荧光素酶报告基因转录活性
- 半乳糖凝集素-1的融合克隆及纯化被引量：4
- 2008年
- 目的:表达和纯化半乳糖凝集素-1融合蛋白。方法:用PCR方法从乳腺文库中扩增半乳糖凝集素-1编码序列,将其以正确相位与pGEX-KG载体中的GST编码序列融合,将重组质粒转化大肠杆菌DH5α后,用谷胱甘肽-Sepharose 4B纯化融合蛋白,并用Western印迹检测融合蛋白的表达。结果:构建得到半乳糖凝集素-1的融合蛋白表达载体;Western印迹检测表明,GST-半乳糖凝集素-1融合蛋白成功表达,并纯化得到融合蛋白。结论:克隆和表达了半乳糖凝集素-1基因,并得到纯化的融合蛋白。
- 王晓辉张浩杨智洪叶棋浓
- 关键词：克隆融合蛋白
- 雌激素信号通路调节蛋白的发现及其在肿瘤中的作用
- 叶棋浓程龙徐小洁丁丽华蔺静袁斌牛畅王晓辉严景华张浩秦玺李杰萍杨智洪蒋凯熊志红
- 肿瘤是威胁人类健康的重大疾病，雌激素信号通路的失调是导致乳腺癌、肝癌、肺癌等诸多恶性肿瘤发生发展的重要原因之一。雌激素通过结合雌激素受体（ER）发挥生理和病理功能。因此，阐明雌激素信号通路的调节机制，发现新的雌激素信号通...
- 关键词：
- 关键词：调节蛋白肿瘤治疗
