梁振兴
- 作品数：9 被引量：20H指数：3
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金西京医院学科助推计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 褪黑素对过氧化氢诱导血管内皮细胞损伤的拮抗作用及其机制被引量：1
- 2013年
- 目的:研究不同浓度褪黑素(melatonin,MLT)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活力的影响,以及对过氧化氢(H2O2)诱导血管内皮细胞损伤的拮抗作用及机制。方法:分别用不同浓度(125、250、500μmol/L)的MLT处理体外培养的HUVECs 2 h、4 h和6 h后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的MLT对HUVECs存活率的影响。以300μmol/L的H2O2建立HUVECs损伤模型,用125、250、500μmol/L的MLT与H2O2(300μmol/L)共同处理HU-VECs 2 h、4 h和6 h后,分别用噻唑蓝(MTT)比色法测细胞的存活率、细胞黏附实验评价细胞黏附能力、酶活性测定法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量和细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活力。用Griess法测定细胞培养液中NO2-的浓度来反映HUVECs的一氧化氮(NO)释放量。结果:以不同浓度的MLT处理内皮细胞2 h、4 h和6 h后,内皮细胞的存活率无统计学差异。MLT能明显提高H2O2损伤的内皮细胞的存活率、黏附能力及细胞内SOD的活力(P<0.01),增加培养液中NO含量(P<0.01),降低内皮细胞LDH的释放(P<0.01)。以500μmol/L的MLT效果最明显。结论:不同浓度的MLT对HUVECs的存活率均无影响,提示MLT药物浓度的安全范围较大。MLT对H2O2诱导HUVECs损伤的拮抗作用可能与其抗氧化能力和促进内皮细胞合成NO有关。
- 梁振兴杨阳金振晓王宁易定华段维勋陈文生
- 关键词：褪黑素人脐静脉内皮细胞乳酸脱氢酶
- γ-分泌酶抑制剂对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用被引量：4
- 2013年
- 目的γ-分泌酶抑制剂(DAPT)是Notch信号通路特异性阻断剂,本实验将研究DAPT对SD大鼠离体心脏缺血再灌注损伤(I/RI)的影响,为探明Notch信号通路在心肌I/RI中的作用提供理论依据。方法采用离体大鼠心脏Langendorff逆行灌注模型,缺血50 min,再灌注60 min。实验分为4组,分别为正常对照组(Control)、I/RI组、DAPT(1μM)+I/RI组,DAPT(1μM)组。监测缺血前后血流动力学各项指标,包括:心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、左心室内压最大变化速率(+dp/dtmax)、冠脉流量(CF)、计算出心率压力指数(DP,LVDP×HR/1000);氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定各组心肌梗死(MI)的面积;专用试剂盒测定冠脉流出液(CF)中乳酸脱氢酶含量(LDH)。结果与Control组比较,I/R组缺血后各时间点的收缩及舒张功能均显著降低(P<0.01),MI面积显著增加(P<0.01),冠脉流出液中LDH含量显著升高(P<0.01);与I/RI组比较,DAPT+I/RI组可以加重上述指标进一步恶化(P<0.01);与Control组比较,DAPT各项指标无统计学差异(P>0.05)。结论DAPT有加重心肌缺血再灌注损伤的作用,Notch信号通路可能在心肌缺血再灌注损伤中发挥重要的调控作用。
- 杨阳段维勋王宁梁振兴姜鹏周建金振晓易定华
- 关键词：Γ-分泌酶抑制剂离体大鼠心脏缺血再灌注损伤心肌保护
- 姜黄素预处理拮抗离体心脏缺血再灌注损伤的作用
- 2012年
- 目的观察姜黄素(Cur)预处理对SD大鼠离体心脏缺血再灌注(IR)损伤是否具有拮抗作用,并研究凋亡相关通路在其中的作用。方法 SD大鼠32只随机分为4组,每组8只,即对照组(Control组)、缺血/再灌注组(IR组)、Cur预处理+IR组(Cur+IR组)、Cur处理组(Cur组)。采用大鼠离体心脏Langendoff逆行灌注模型,Cur预处理时间为5 min,浓度为1μmol/L,缺血45 min,再灌注60 min。分别于缺血前及再灌注后15 min、30 min、45 min和60 min,测定血流动力学各项指标,包括左心室发展压(LVDP)、左心室内压最大变化速率(+dp/dt max)、心率、冠状动脉流量、计算心率压力指数(DP,LVDP×HR/1000)。氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定各组心肌梗死面积,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)测定各组细胞凋亡率,Western blot检测各组抗凋亡相关蛋白Bcl-2和凋亡相关蛋白cytochrome c、Bax的表达。结果与Control组比较,cur组各项指标无统计学差异,再灌注后IR组各时间点血流动力学参数显著降低,心肌梗死面积显著增加,细胞凋亡率升高,Bcl-2表达下降,cytochrome c、Bax表达上升(P<0.01)。与IR组比较,再灌注时Cur+IR组血流动力学显著改善,心肌梗死的面积明显减少,细胞凋亡率降低,Bcl-2表达升高,cytochrome c、Bax表达降低(P<0.01)。结论 Cur预处理有拮抗心肌IR损伤作用,其作用可能与抗凋亡信号通路的活化有关。
- 杨阳王宁梁振兴李悦段维勋金振晓易定华
- 关键词：再灌注损伤姜黄素细胞凋亡信号通路
- Jagged1蛋白对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的作用
- 目的:研究提示Notch信号通路可能在心肌梗死后心肌保护中发挥调控作用,而Notch信号通路在心肌急性缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury,I/RI）中的研究尚无报道。本研究将观察Jag...
- 杨阳段维勋梁振兴王宁金振晓易定华
- 文献传递
- γ-分泌酶抑制剂对血管内皮细胞抗过氧化氢损伤的保护作用及其机制被引量：6
- 2013年
- 目的探讨Notch信号特异性阻断剂γ-分泌酶抑制剂DAPT对血管内皮细胞抗过氧化氢（H2O2）损伤的保护作用及机制。方法分别用不同浓度H2O2（100、200、400μmoL／L）处理体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）2、4、8h，噻唑蓝（MTT）比色法测定内皮细胞活力；Western blot法检测Notch信号通路受体Notchl、线粒体凋亡通路相关蛋白bax及抗凋亡蛋白B淋巴细胞／白血病-2（bcl-2）的表达。H2O2（300μmol／L）建立HUVECs损伤模型，不同浓度DAPT（40、20、10μmol／L）与H2O2共同处理HUVECs2、4、6h，分别检测细胞存活率、黏附能力、凋亡率；Western blot法检测过氧化氢和DAPT共处理的内皮细胞中Notchl、bcl-2和bax蛋白的表达。结果经不同浓度的H2O2（100、200、400μmol／L）处理内皮细胞2、4、6h后，内皮细胞的存活率明显降低（P〈0．01）；Notchl和bax的表达升高，抗凋亡蛋白bcl-2的表达降低。DAPT能明显提高H2O2损伤的内皮细胞存活率和黏附能力，降低凋亡率（P〈0．01）；经DAPT和H2O2共处理的内皮细胞与过氧化氢损伤组比较，Notchl和bax蛋白的表达显著降低，但是bcl-2蛋白的表达显著升高（P〈0．01），其中DAPT浓度为10μmol／L时效果最明显。结论低浓度DAPT对内皮细胞抗过氧化氢损伤有保护作用，可能与其抗氧化能力和抑制Notch信号通路有关。
- 杨阳梁振兴王宁段维勋金振晓易定华
- 关键词：人脐静脉内皮细胞Γ-分泌酶抑制剂NOTCH信号通路
- γ-分泌酶抑制剂对人脐静脉内皮细胞系增殖凋亡的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨Notch信号特异性阻断剂γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对正常人脐静脉内皮细胞系增殖凋亡的影响。方法分别用不同浓度DAPT(15、30、45、60μM/L)处理体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)12h、24h和48h,MTT法测定内皮细胞活力;粘附实验测定处理24h后细胞粘附率;TUNEL法检测处理24h后细胞凋亡率;Western法检测Notch信号通路受体Notch1的表达。结果 MTT检测显示DAPT显著抑制HUVECs存活(P<0.01),并呈浓度时间依赖性;粘附实验结果显示DAPT(24h)可以显著减弱HUVECs粘附能力(P<0.01);TUNEL检测显示DAPT(24h)可以显著增加HUVECs凋亡率(P<0.01);Westernblot结果显示DAPT使HUVECs中Notch1表达显著下降(P<0.01)。结论 DAPT可阻断Notch信号通路,抑制正常人脐静脉内皮细胞的增殖,促进细胞凋亡。
- 梁振兴杨阳李悦金振晓王宁易定华段维勋陈文生
- 关键词：人脐静脉内皮细胞DAPT增殖凋亡NOTCH信号通路
- γ-分泌酶抑制剂对姜黄素后处理心肌保护作用的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨Notch信号通路在姜黄素(Cur)后处理抗心肌缺血再灌注损伤(IR)中的作用。方法将40只SD大鼠随机分为对照组、IR组、Cur组、Cur+DAPT组、DAPT组各8只。各组均采用离体心脏Langendoff逆行灌注10 min致心肌缺血,停止灌注80 min后除对照组外其余各组均予KH液行再灌注至150 min。Cur组再灌注液中含1μM浓度的Cur,Cur+DAPT组含1μM浓度的Cur和0.5μM浓度的DAPT;DAPT组含0.5μM浓度的DAPT。监测各组缺血前及再灌注后血流动力学指标,包括心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、左心室内压最大变化速率(+dp/dtmax)、冠脉流量(CF);氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定心肌梗死(MI)面积;专用试剂盒测定冠脉流出液(CF)中乳酸脱氢酶水平(LDH);Western blot法检测心肌组织Notch1表达。结果与对照组比较,IR组再灌注后各时间点收缩及舒张功能均显著降低(P<0.01),MI面积显著增加(P<0.01),冠脉流出液LDH含量显著升高(P<0.01),Notch1表达下降(P<0.01);与IR组比较,Cur组上述指标显著改善(P<0.01),Notch1表达上升(P<0.01);与Cur组比较,Cur+DAPT组上述指标显著恶化,且Notch1表达下降(P<0.01);与IR组比较,DAPT组各项指标差异无统计学意义。结论 Cur后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与活化Notch信号通路有关。
- 王宁段维勋杨阳李悦梁振兴金振晓易定华俞世强
- 关键词：姜黄素后处理DAPTNOTCH信号通路
- Jagged1蛋白对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的作用被引量：3
- 2012年
- 目的研究Jagged1蛋白(Ja1)对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤(SI/RI)的作用,为探明Notch信号通路在心肌缺血再灌注损伤(I/RI)中的作用提供理论依据。方法实验分为5组,分别为正常对照组、SI/RI组、缺氧复氧+不同浓度Ja1组(5、10、20μM),四氮唑盐比色(MTT)法测定各组细胞存活率;缺口末端标记(TUNEL)法测定各组细胞凋亡率;专用试剂盒检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。结果与对照组相比,SI/RI组细胞活力明显下降(P<0.01),凋亡率明显上升(P<0.01),同时期培养液中SOD水平明显降低(P<0.01),MDA水平显著升高(P<0.01);不同浓度Ja1可以使上述指标明显改善(P<0.01),并呈浓度依赖性。结论 Ja1蛋白对SI/RI造成的心肌细胞损伤具有保护作用,作用机制与增强细胞抗凋亡、抗氧化以及减轻脂质过氧化物导致的细胞膜损伤有关,Notch信号通路可能在心肌缺血再灌注损伤中发挥重要的调控作用。
- 杨阳段维勋梁振兴王宁姜鹏金振晓易定华
- 关键词：新生大鼠心肌细胞心肌保护
- 酪氨酸激酶抑制剂AG490抗过氧化氢对血管内皮细胞的保护作用及其机制被引量：2
- 2014年
- 目的探讨酪氨酸激酶（JAK）抑制剂AG490对血管内皮细胞抗过氧化氢（H2O2）损伤的保护作用及其机制。方法分别用不同浓度H2O2（100、200、400μmol/L）处理体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）2、4、6h，噻唑蓝（MTT）法测定内皮细胞活力；H2O2（400μmol/L）建立HUVECs损伤模型，实验分4组：对照组、H：O：组、H：02＋AG490（20p,mol／L）组、AG490（20μmol/L）组。各组细胞处理4h，MTr法检测各组细胞存活率；原位末端转移酶标记（TUNEL）法测定各组细胞凋亡率；Westernblot法检测各组细胞中磷酸化酪氨酸蛋白激酶2（p-JAK2）、磷酸化信号传导与转录激活因子-3（p-STAT3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关x蛋白（bax）和B细胞淋巴瘤／白血病-2（bcl-2）的表达。结果经不同浓度的H，O：（100、200、400μmol/L）处理内皮细胞2、4、6h后，内皮细胞的存活率明显降低（P〈0．01）；AG490能明显提高H2O2损伤的内皮细胞存活率，降低细胞凋亡率（存活率H202组：0．637±0．030、H202＋AG20μmoL/I。组：0．847±0．030；凋亡率H202组：59．1044-1．572、H202＋AG20μmol/L组：36．454±1．403，P〈0．01）；经AG490和H202共处理的内皮细胞与H：O：损伤组比较，p-JAK2和p-STAT3的表达显著降低（P〈0．01）；凋亡相关蛋白bax的表达显著降低，但是抗凋亡蛋白bel-2的表达显著升高（P〈0．01）。结论AG490对内皮细胞抗过氧化氢损伤有保护作用，其抗氧化能力可能和抑制JAK2/STAT3信号通路及抗凋亡有关。
- 梁振兴杨阳金振晓易定华段维勋陈文生
- 关键词：脐静脉内皮细胞
