梅寒芳
- 作品数：51 被引量：116H指数：6
- 供职机构：广东药科大学基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 关于建设生物化学开放式实验室的探讨被引量：1
- 2008年
- 通过对传统实验教学存在问题的分析,提出建设开放式实验室的设想,并提出了开放式实验室建设的一些实施方案,包括实验室开放的模式和实验内容的设计,并对建设开放式实验室的意义进行阐述。
- 杨泽民罗少洪陈耕夫梅寒芳
- 关键词：生物化学实验教学
- H_2O_2对PC12细胞par-4和NF-κBP65基因表达的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨 H2 O2 对 PC12细胞前列腺细胞应答凋亡蛋白 - 4 ( prostate apoptosis response- 4 ,par- 4 )和核转录因子 - κBP6 5 ( NF- κBP6 5 )基因表达的影响。方法 用不同终浓度 H2 O2 ( 0～ 4 0 0 nm ol/ L)处理 PC12细胞 8h,或终浓度 2 0 0 nm ol/ L H2 O2 处理 PC12细胞不同时间 ( 0～ 8h) ,采用 RT- PCR检测 par- 4、NF- κBP6 5 m RNA表达变化 ,Western blot检测 Par- 4和 NF-κBP6 5蛋白表达的变化。结果 随 H2 O2 浓度从 10 0～ 4 0 0 nmol/ L增加 ,par- 4、NF-κBP6 5 m RNA表达和 Par- 4、NF-κBP6 5蛋白表达水平逐渐增加 ;2 0 0 nm ol/ L H2 O2 作用 PC12细胞 0～ 8h,par- 4 m RNA表达和 Par- 4蛋白表达 ,在 2～ 8h随时间延长表达增加 ;在 0～ 8h NF- κB P6 5 m RNA表达和 NF- κBP6 5蛋白表达无明显变化。结论 H2 O2 可时间、剂量依赖性的增加 par- 4 m RNA表达和 Par- 4蛋白表达 ;H2 O2 可剂量依赖性的增加NF-κBP6 5 m RNA表达和 NF-κBP6 5蛋白表达 ;NF-κBP6 5 m RNA表达和 NF-κBP6
- 曲喜英梅寒芳祝其锋
- 关键词：H2O2PC12细胞PAR-4NF-ΚBP65核转录因子-KB
- 贝类GⅠ型扎幌样病毒荧光定量PCR检测
- 2009年
- 目的建立贝类中GⅠ型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法。方法通过用聚乙二醇6000（PEG6000）对贝类中扎幌样病毒进行浓缩,用序列比对软件设计出针对GⅠ型扎幌样病毒保守序列的通用引物与探针,建立GⅠ型扎幌样病毒荧光定量PCR检测方法。结果浓度为10^6-10^4,10^3,10^2-10^1拷贝/μL的GⅠ扎幌样病毒检出率分别为3/3,1/3,0/3,因此,常规逆转聚合酶链反应（RT-PCR）最低检出限为10^3拷贝/μL。此荧光定量PCR方法对贝类中GⅠ型扎幌样病毒检测高度特异,最低检出限可达10^2拷贝/μL,比常规RT-PCR的低1个数量级,即灵敏度高10倍,线性范围为10^2-10^6拷贝/μL,标准曲线的相关系数为0.998 8。结论本研究建立了GⅠ型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法,可用于贝类中GⅠ型扎幌样病毒污染状况及其突发事件的快速定量检测。
- 曾爱华梅寒芳杨小蓉金小宝朱家勇
- 关键词：贝类荧光定量PCR
- Aβ_(25-35)诱导PC12细胞周期紊乱及对P53和Cyclin D1基因表达的影响被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨Aβ25-35诱导体外去血清培养的PC12细胞周期变化及对P53和Cyclin D1基因表达的影响。方法:PC12细胞同步于G0期,采用终浓度为0-45μmol/L或浓度为25μmol/L Aβ25-35处理PC12细胞,用MTT比色法分析细胞存活率;流式细胞仪检测分析细胞周期的改变;RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测P53和Cyclin D1基因的变化。结果:随着Aβ25-35剂量的增加,PC12细胞存活率降低(P<0.01);流式细胞仪分析表明去血清培养24 h可使约90%PC12细胞停滞于G0/G1期,25μmol/L Aβ25-35诱导组8,16,24 h与对照组比较,S期百分率明显增加(P<0.01),16 h后细胞凋亡率明显增加(P<0.01),可见明显的亚二倍体峰(Ap峰);P53 mR-NA表达和P53蛋白表达降低、Cyclin D1 mRNA表达和Cyclin D1蛋白表达增高。结论:Aβ25-35降低去血清培养的PC12细胞存活率,诱导同步化于G0/G1的PC12细胞重新进入细胞周期,并阻滞于S期,同时出现凋亡,可能与下调P53的表达,上调Cyclin D1的表达有关。
- 谢朝阳梅寒芳祝其锋
- 关键词：AΒ25-35细胞周期P53CYCLIN
- 蟛蜞菊乙醇提取物促进黑色素生成及其机理的初步研究被引量：1
- 2012年
- 目的观察中药蟛蜞菊乙醇提取物促进黑色素生成的作用,并初步探讨其作用机理。方法 MTT法、L-Dopa氧化法、NaOH裂解法探讨不同浓度蟛蜞菊乙醇提取物作用于小鼠恶性黑色素瘤细胞(B16)72 h后,对细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素含量的影响。RT-PCR检测药物作用前后酪氨酸酶、小眼相关转录因子(MITF)等基因表达的影响。结果与对照组比较,蟛蜞菊乙醇提取物能促进B16细胞的增殖,促进酪氨酸酶活性增加和黑色素生成增多;可剂量依赖性上调酪氨酸酶和MITF的mRNA表达。结论蟛蜞菊乙醇提取物可促进B16细胞黑色素生成,其机制可能是通过促进B16细胞增殖、增强酪氨酸酶和MITF的基因表达来实现。
- 梅寒芳林密朱家勇
- 关键词：蟛蜞菊黑色素酪氨酸酶
- β-淀粉样肽(25-35)对PC12细胞bax和bcl-2基因表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:观察β-淀粉样肽25-35(β-amyloid peptide 25-35,Aβ25-35)诱导PC12细胞凋亡和对bax及bcl-2基因表达的影响。方法:采用MTT法检测PC12细胞的存活率;DNA电泳法观察细胞凋亡时特异性梯状条带;Hochest33258-PI荧光染色观察细胞核形态学改变;RT-PCR检测bax和bcl-2基因mRNA表达变化,Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达变化。结果:随着Aβ25-35浓度的增加,PC12细胞存活率逐渐降低;DNA电泳呈凋亡特异性梯状条带;荧光染色可见细胞核碎裂、核固缩等凋亡特征;bax mRNA及Bax蛋白表达增加,bcl-2 mRNA及Bcl-2蛋白表达降低。结论:在Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡过程中,Bax和Bcl-2可能起重要作用。
- 梅寒芳孟金兰谢朝阳祝其锋
- 关键词：AΒ25-35PC12细胞BAXBCL-2
- 原花青素对PC12细胞氧化应激损伤保护作用的细胞周期调控机制被引量：3
- 2014年
- 目的观察原花青素对过氧化氢诱导体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞氧化损伤及细胞周期阻滞的保护作用,并探讨细胞周期调控基因c-Abl和plk1在其中的作用。方法采用MTT法观察不同浓度原花青素对100μmol/L过氧化氢诱导6 h的PC12细胞增殖率的影响。采用流式细胞仪检测原花青素对诱导的PC12细胞周期分布的影响,Western blot检测不同浓度原花青素对诱导的PC12细胞c-Abl和plk1基因蛋白表达水平的影响。结果与对照组比较,过氧化氢显著降低PC12细胞增殖率(P<0.01)、显著增高PC12细胞S期分布比例(P<0.01)、显著诱导c-Abl和plk1基因蛋白水平表达增强(P<0.01)。与过氧化氢诱导组比较,原花青素剂量依赖性提高PC12细胞的增殖率(P<0.01)、缓解过氧化氢诱导的细胞周期S期阻滞(P<0.01)、降低c-Abl和plk1基因蛋白水平的表达(P<0.01)。结论原花青素对过氧化氢诱导的PC12细胞氧化损伤具有保护作用,其机制可能是通过缓解过氧化氢诱导的细胞周期S期阻滞、降低细胞周期调控相关基因c-Abl和plk1的蛋白表达水平来实现的。
- 梅寒芳李荷朱家勇
- 关键词：原花青素过氧化氢PC12细胞
- rhIL-10对脂多糖攻击小鼠血及肝IL-6和TNF-α含量的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:研究重组人白细胞介素-10(rhIL-10)对脂多糖(LPS)诱导的血、肝IL-6和TNF-α炎症介质含量变化的影响。方法:小鼠腹腔注射LPS建立炎症模型,并同时静脉注射不同剂量的rhIL-10,ELISA法测定12h、24h、48h和72h肝组织和血清IL-6和TNF-α的含量。结果:注射rhIL-10后12h,肝组织和血清IL-6、TNF-α水平开始下调,24-48h抑制作用最明显(P<0.05),72h后抑制作用减弱,且呈剂量效应关系。结论:利用基因工程技术制备的重组人白细胞介素10(rhIL-10)显著下调肝组织和血清IL-6和TNF-α的水平。
- 杨红罗少洪梅寒芳李春梅
- 关键词：白细胞介素10白细胞介素6肿瘤坏死因子
- β-淀粉样肽（25-35）对PC12细胞par-4和bcl-2基因表达的影响被引量：1
- 2005年
- 目的：观察β-amyloid peptide25—35（Aβ25-35）对PC12细胞par-4和bcl-2基因表达的影响。方法：采用终浓度分别为0，5，10，201μmol／L的Aβ25-35处理PC12细胞24h，用MTT比色法分析细胞存活率；Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变；RT—PCR检测par-4和bcl-2基因mRNA表达变化；Western blot检测Par-4和Bcl-2蛋白表达变化。结果随着Aβ25-35剂量的增加，PC12细胞存活率降低，凋亡明显增加，且par-4基因表达增加，bcl-2基因表达降低。结论：Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡可能与上调Par-4表达和下调Bcl-2表达有关。
- 梅寒芳曲喜英祝其锋
- 关键词：BCL-2基因表达PC12细胞凋亡Β-淀粉样肽(25-35)PAR-4AΒ25-35BCL-2表达
- 姜黄素影响Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞周期变化与细胞凋亡的可能机制
- 2005年
- 目的：探讨姜黄素（Curcumin，Cur）对Aβ25—35诱导体外去血清培养PC12细胞周期异常与细胞凋亡的可能影响机制。方法种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期，每次实验分对照组（0）、诱导组和保护组；流式细胞仪检测分析细胞周期的改变与凋亡的时间关系；通过RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测cyclin D1、cdk4、pRb、E2F1、bax等基因表达水平的变化。结果：（1）去血清培养24h．PC12细胞大约90％同步于G0／G1期；（2）25μmoL／L Aβ25-35处理8、16h。
- 谢朝阳梅寒芳祝其锋
- 关键词：AΒ25-35去血清培养细胞凋亡姜黄素细胞周期异常
