江雅丽
- 作品数：13 被引量：8H指数：2
- 供职机构：石河子大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BMEI1135基因缺失株的构建及其功能的初步研究
- 江雅丽王红红陈创夫王震李爽李志强张辉郭飞
- 新疆羊种布鲁氏菌分离株的鉴定与L7/L12蛋白的原核表达和生物信息学分析
- 2017年
- 【目的】分离并鉴定新疆羊种布鲁氏菌。原核表达该菌的L7/L12蛋白,检测该蛋白的反应原性及进行部分生物学分析。【方法】采用细菌划线培养、形态学观察、PCR检测以及生化试验进行布鲁氏菌分离鉴定。利用常规分子生物学方法表达并纯化羊种布鲁氏菌分离株的L7/L12蛋白,应用Western Blot分析融合蛋白的反应原性。使用生物信息学软件对该蛋白进行了生物信息学分析。【结果】分离鉴定确定该菌株为羊种布鲁氏菌。经过测序与酶切鉴定,正确构建了表达载体p ET-28a-L7/L12.SDS-PAGE试验显示纯化的L7/L12蛋白为单一条带;经过Western Blot检测,该融合蛋白具有良好的反应原性。生物信息学分析显示,该蛋白无跨膜区结构,不存在信号肽,二级结构α-螺旋为主并利用Phyre2服务器成功构建了该蛋白的三维模型。【结论】鉴定出该分离菌株,表达并纯化了该菌的L7/L12融合蛋白,Western Blot证明该蛋白具有良好的反应原性,为后续该蛋白的亚单位疫苗研究奠定了基础。
- 刘升江雅丽付强史慧君李爽孟露萍郭飞张辉陈创夫
- 关键词：羊种布鲁氏菌蛋白纯化反应原性
- 布鲁氏菌侵染巨噬细胞诱导自噬与MHCII关系的研究
- 研究目的：研究布鲁氏菌侵染巨噬细胞后引起自噬对MHCII 分子的影响以及可能的影响因素。材料方法：(1)布鲁氏菌16M(16M)分别侵染经IFN-γ处理的正常巨噬细胞和稳定过表达Atg5、Atg7 的巨噬细胞后,qRT-...
- 袁莎江雅丽王震郭飞陈创夫
- 牛种布鲁氏菌2308紫外诱变株毒力检测及其对昆明系小鼠的免疫效果研究
- 2016年
- 为了检测牛种布鲁氏菌2308紫外诱变株毒力和免疫效果,本实验以S19疫苗株为对照,用牛种布鲁氏菌基因缺失株紫外线照射组(2308△rwbk A、2308△romp25和2308△rery)和非照射组(2308△wbk A、2308△omp25和2308△ery)分别侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7,对小鼠巨噬细胞内的细菌进行计数评价毒力致弱情况;用牛种布鲁氏菌基因缺失株紫外照射组、非照射组以及S19疫苗株分别以1×107CFU/0.2 m L免疫4-6周龄昆明系小鼠,通过ELISA检测小鼠血清中布鲁氏菌Ig G抗体和IFN-γ细胞因子,同时分离脾脏,CFU计数布鲁氏菌胞内菌数量;用2308强毒株以3×108CFU/0.2 m L腹腔感染各组免疫10周后小鼠,脾脏CFU评价各受试组小鼠的免疫效果。结果表明:在细胞水平,紫外线照射后的布鲁氏菌基因突变株其CFU较紫外线非照射组有不同程度的下降,统计学分析无显著性差异(P>0.05),但均高于S19胞内菌CFU;与S19疫苗株相比,2308△rwbk A和2308△rery紫外线照射组与其对应的2株紫外线非照射组在不同检测阶段,其Ig G和IFN-γ含量水平相当,但2308△romp25紫外线照射菌株组在第6、8周,其Ig G和IFN-γ含量均高于2308△omp25紫外线非照射菌株组和S19免疫组,统计学分析有显著性差异(0.01
- 张欢江雅丽刘丹黄美玲王杰王远志张辉陈创夫
- 关键词：紫外线毒力保护力
- 布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BMEI1135基因缺失株的构建及鉴定被引量：2
- 2016年
- 为了初步探讨BMEI1135基因在布鲁氏菌感染过程中的作用,以16M为模板利用同源重组和抗性替换的方法,构建羊种布鲁氏菌16M(简称16M)BMEI1135基因缺失株(16M△BMEI1135)。将亲本株16M、疫苗株M5-90、缺失株16M△BMEI1135在相同起始浓度下震荡培养,观察其生长变化趋势;将各菌株置于强酸、强碱、高盐、热休克应激条件下,观察其生存率;侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7后,比较其在胞内的生存能力,并在不同时间点收集细胞提取RNA,通过qRT-PCR检测自噬相关基因的表达。研究结果显示:成功获得了布鲁氏菌BMEI1135基因缺失株且20代内未发生回复性突变现象。与亲本株相比,16M△BMEI1135在体外培养生长趋势与亲本株相似,只是细菌的浓度存在一定差异;突变株体在外界应激条件下生存能力低于亲本株;胞内CFU显示侵染4 h后缺失株胞内细菌数量明显下降(P<0.01);qRT-PCR检测到突变株的ULKI、Beclin1表达量均显著降低(P<0.01)。本实验的研究结果表明:布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白与16M的胞内生存介导的细胞自噬密切相关,该研究为16M胞内寄生机制的研究奠定了基础。
- 江雅丽王震陈创夫李爽李志强张辉郭飞
- 关键词：布鲁氏菌自噬相关基因
- 布鲁氏菌侵染巨噬细胞诱导自噬与MHCII关系的研究
- 研究目的:研究布鲁氏菌侵染巨噬细胞后引起自噬对MHCII分子的影响以及可能的影响因素。材料方法:(1)布鲁氏菌16M(16M)分别侵染经IFN-γ处理的正常巨噬细胞和稳定过表达Atg5、Atg7的巨噬细胞后,q RT-P...
- 袁莎江雅丽王震郭飞陈创夫
- 文献传递
- 布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BMEI1135基因缺失株的构建及其功能的初步研究
- <正>研究目的为了构建羊种布鲁氏菌16M(简称16M)BMEI1135基因缺失株(16MΔBMEI1135),初步探讨该基因与16M介导的自噬的关系。材料方法利用同源重组和抗性替换的方法,以卡那基因替换BMEI1135基...
- 江雅丽王红红陈创夫王震李爽李志强张辉郭飞
- 文献传递
- 布鲁氏菌rirA基因的表达与功能分析被引量：2
- 2015年
- [目的]构建布鲁氏菌rirA基因的原核表达载体并进行表达、鉴定。[方法]将rirA基因克隆至pET-28a载体,构建重组质粒pET-28a-rirA,并转化至E.coli BL21(DE3)中,IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE和Western blotting检测目的蛋白的表达及其反应原性,并对该蛋白进行生物信息学分析。[结果]PCR扩增出rir A基因全长为462 bp,编码153个氨基酸,SDS-PAGE分析表明获得了约19.8 k Da的融合蛋白,Western blotting结果显示该融合蛋白与羊抗布鲁氏菌阳性血清发生特异性反应,表明其具有良好的反应原性;生物信息学分析显示,该蛋白无跨膜区结构,不存在信号肽,二级结构以α-螺旋为主并利用Phyre2服务器成功构建了该蛋白的三维模型。[结论]成功构建了rirA基因的原核表达载体,所表达蛋白具有良好的反应原性。并且作为胞内蛋白参与布鲁氏菌铁代谢的转录调控。
- 江雅丽王震李爽王勇李天森郭飞张辉陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌原核表达反应原性
- E3泛素连接酶Nrdp1和SOCS-1对布鲁氏菌诱导细胞凋亡的影响
- 2016年
- 为了探讨E3泛素连接酶Nrdp1、SOCS-1基因在布鲁氏菌侵染巨噬细胞过程中对细胞凋亡的影响,构建Nrdp1、SOCS-1基因的干扰和过表达细胞模型(简称为pLL3.7-N1、pLL3.7-S1和pLEX-Nrdp1、pLEX-SOCS-1);羊种布鲁氏菌16M(简称16M)侵染正常细胞RAW264.7及pLL3.7-N1、pLEX-Nrdp1、pLL3.7-S1、pLEX-SOCS-1组细胞,qRT-PCR检测Bax、Bcl-2、TNF-α的mRNA表达量,并通过流式细胞仪术检测细胞凋亡率。结果显示,试验成功构建并筛选出干扰和过表达Nrdp1、SOCS-1效果最好的pLL3.7-N1、pLEX-Nrdp1、pLL3.7-S1、pLEXSOCS-1细胞模型;16M侵染各组细胞,与对照组相比,在不同的时间段pLL3.7-N1、pLL3.7-S1、pLEX-Nrdp1、pLEX-SOCS-1组细胞的Bcl-2和Bax的mRNA表达量差异显著(P<0.05);pLL3.7-S1组细胞的TNF-αmRNA显著降低(P<0.05),而pLEX-SOCS-1组显著升高(P<0.05);pLEX-Nrdp1、pLEX-SOCS-1组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),而pLL3.7-S1组显著降低(P<0.05)。研究结果表明,Nrdp1、SOCS-1基因与16M诱导的细胞凋亡密切相关,为16M胞内寄生机制的研究奠定了基础。
- 江雅丽陈创夫车召堂王震李爽张欢张辉郭飞
- 关键词：布鲁氏菌SOCS-1实时荧光定量PCR细胞凋亡
- 布鲁氏菌逃避溶酶体作用机制的初步研究
- 布鲁氏菌病(Brucellosis)是由感染人和动物的布鲁氏菌（Brucella）造成的对社会安全有严重危害的人畜共患病，特别是在经济较为落后的国家。布鲁氏菌是一类兼性胞内寄生菌，其能促进自噬发生和逃避溶酶体的融合，获得...
- 江雅丽
- 关键词：布鲁氏菌基因功能溶酶体
- 文献传递
