王震
- 作品数：131 被引量：154H指数：7
- 供职机构：石河子大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划高层次人才科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 牛轮状病毒NSP4基因的克隆及生物信息学分析
- 研究目的:从牛轮状病毒中获得NSP4基因并对其进行生物信息学分析,为今后对牛轮状病毒NSP4进行生物学功能的研究、建立该病毒的诊断方法以及研制疫苗预防和控制牛轮状病毒引起的疾病提供理论依据。材料与方法:大肠杆菌DH5a和...
- 刘庆庆陆亚东王震陈创夫
- 文献传递
- 布鲁氏菌胞内存活机制与巨噬细胞极化关系研究进展被引量：11
- 2018年
- 布鲁氏菌(Brucella)是一种兼性胞内寄生致病菌,虽无典型的毒力因子却有很强的致病力,且常导致慢性持续感染。布鲁氏菌病被列入世界上严重的人兽共患病之一,直接对畜牧业造成重大经济损失,严重威胁人类健康和公共卫生安全。布鲁氏菌感染的靶细胞主要是巨噬细胞,其发展了更高的策略逃逸宿主免疫细胞的杀伤,甚至在细胞内大量繁殖,削弱巨噬细胞的功能,使巨噬细胞的杀伤作用和抗原递呈功能部分丧失,从而能在宿主细胞内长期持续性感染。文章围绕布鲁氏菌胞内存活机制进行探讨,分析了不同极化类型的巨噬细胞在布鲁氏菌感染过程中的调控作用,以及相关炎症通路对机体炎症发展的作用;揭示了布鲁氏菌胞内生存不仅可适应持续感染期间不同的免疫微环境,也可适应感染期间靶细胞营养物质利用率的差异;证实了在慢性感染的过程中免疫逃避和与宿主细胞代谢的相互作用起关键作用;解释了NF-κB通路是调节M1/M2型巨噬细胞亚型平衡状态的关键因素。布鲁氏菌在宿主细胞中持续感染是国内外学者所面临的巨大难题,其免疫逃逸机制和致病机制仍需进一步研究。
- 易继海王月丽王震陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌
- 单增李斯特菌IspD蛋白生物信息学分析及表达纯化
- 2023年
- 【目的】对单增李斯特菌IspD蛋白的潜在生物学功能进行预测分析,并表达纯化IspD蛋白,为后续IspD蛋白的研究提供理论支撑。【方法】从NCBI中获得单增李斯特菌IspD的编码序列(基因ID:986270)和氨基酸序列(登录号:NP_464611.1),运用生物信息学软件对IspD蛋白编码序列进行开放阅读框分析,对氨基酸序列进行基本特性、空间结构、抗原表位、修饰化位点、蛋白互作及相似性等预测分析。对IspD蛋白编码序列进行密码子优化并合成,采用无缝克隆法构建重组质粒pET-32a-IspD并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,将测序和双酶切验证正确的阳性克隆经IPTG低温过夜诱导表达,采用镍柱亲和层析法纯化得到IspD融合蛋白,利用SDS-PAGE和Western blotting验证IspD融合蛋白表达、纯化及反应原性。【结果】IspD蛋白编码基因为lmo1086,全长711 bp,共有4个开放阅读框,其中ORF1为最长的开放阅读框,可编码236个氨基酸。氨基酸序列分析显示,IspD蛋白无跨膜结构域、信号肽,是一种亲水性蛋白,亚细胞定位于细胞质中,为2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸胞苷酰基转移酶。α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲参与了IspD蛋白二级结构的组成,三级结构模型预测与二级结构特点相符。IspD蛋白具有多个T、B细胞抗原表位、固定无序结构域、磷酸化、糖基化、甲基化及乙酰化修饰位点。蛋白互作分析显示,IspD蛋白与DXR、IspF、ipk等多个蛋白存在相互作用,IspD与其相互作用最强的DXR蛋白之间通过氢键、盐桥等实现连接和相互作用。试验成功构建了表达菌株pET-32a-IspD,SDS-PAGE结果显示,在上清中高表达IspD融合蛋白;Western blotting验证显示,纯化的IspD融合蛋白具有反应原性。【结论】IspD蛋白具有成为候选诊断、疫苗研发和药物靶点等的潜在价值。试验表达纯化得到IspD融合蛋白,可为后续IspD蛋白具体功能的研究提供理论依
- 史超张伟张伟张梦琦何欣赵明彦周霞周霞张辉
- 关键词：单增李斯特菌生物信息学纯化
- 环介导等温扩增引物组及其应用
- 本发明属于细菌检测技术领域，具体涉及一种环介导等温扩增引物组及其应用，该环介导等温扩增引物组用于检测布鲁氏菌。该环介导等温扩增引物组包括如SEQIDNO.1所示的F3引物、如SEQIDNO.2所示的B3引物、如SEQID...
- 陈创夫王震王勇程科健李爽
- 布鲁氏菌糖基转移酶对细胞炎症反应的影响
- 研究目的研究布鲁氏菌糖基转移酶(WboA)在诱发胚胎滋养层细胞炎症反应中的作用。研究表明WboA蛋白具有细胞毒作用,布鲁氏菌的致炎作用与脂多糖O链相关,为进一步阐明布鲁氏菌感染宿主细。胞的发病机制奠定了基础。材料方法以羊...
- 张豫张辉张艳孟茹王震陈瑞花张俊波鲁芝子陈创夫
- 一种停乳链球菌的LAMP引物组、试剂盒以及检测方法
- 本发明涉及微生物技术检测领域，具体涉及一种停乳链球菌的LAMP引物组、试剂盒以及检测方法。本发明提供的引物组是的以停乳链球菌gapC基因为靶基因设计环介导等温扩增引物，利用LAMP技术实现停乳链球菌的快速鉴定检测。同时本...
- 张辉王震
- E3泛素连接酶Nrdp1对布鲁氏菌胞内生存以及布鲁氏菌所引起的细胞凋亡的影响
- 研究目的:以布鲁氏菌宿主细胞小鼠巨噬细胞E3泛素连接酶Nrdp1研究对象,构建干扰和过表达Nrdp1基因的小鼠巨噬细胞转染模型;羊种布鲁氏菌16M侵染小鼠巨噬细胞,探究其对布鲁氏菌胞内生存和布鲁氏菌诱导的巨噬细胞凋亡的影...
- 车召堂李爽王震李天森张辉陈创夫
- 文献传递
- E3泛素连接酶SOCS-1对布鲁氏菌胞内生存以及布鲁氏菌所引起的细胞凋亡的影响
- 研究目的:布鲁氏菌病(简称布病)是由布鲁氏菌引起的全球性人畜共患传染病,每年感染者超过50万,在发展中国家尤为显著。布鲁氏菌是兼性胞内寄生革兰氏阴性菌,其侵袭力强、感染途径广,人感染后易造成波浪热、关节炎、心内膜炎,目前...
- 车召堂易继海王震李天森王远志张辉陈创夫
- 文献传递
- 禽白血病病毒p27基因的原核表达及生物信息学分析被引量：1
- 2019年
- 为了进一步研究禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)p27蛋白的结构与功能,并获得具有反应原性的重组蛋白p27,试验通过PCR技术克隆p27基因,构建克隆载体pMD19-T-p27,并应用生物信息学软件对获得的p27基因序列进行分析,构建重组表达载体pET-28a-p27,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达,通过SDS-PAGE和Western-blot对获得的重组蛋白p27进行分析。结果表明:通过PCR技术克隆获得ALV p27基因,并成功构建了克隆载体pMD19-T-p27;生物信息学分析发现,p27蛋白由239个氨基酸组成,分子式为C(1140)H(1853)N(323)O(339)S6,理论等电点为6.23,无信号肽和跨膜区,含有8个丝氨酸磷酸化位点和13个苏氨酸磷酸化位点,无糖基化位点,共有9个抗原表位,二级结构和三级结构中以α-螺旋为主;成功构建了重组表达载体pET-28a-p27,并在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中高效表达;诱导6小时时蛋白质表达量最大,分子质量约为27 ku,且以可溶性为主;重组蛋白p27具有较好的反应原性和特异性。说明试验获得了具有反应原性的重组蛋白p27,为建立禽白血病快速诊断方法和新型疫苗的研发提供了理论基础。
- 徐明国杨宁宁刘志科张桂枝吴鹏易继海吴文星王震陈创夫
- 关键词：禽白血病P27基因反应原性抗原表位生物信息学分析
- 布鲁氏菌感染对小鼠巨噬细胞铁蛋白和转铁蛋白表达的影响
- 铁不仅是宿主生长繁殖不可或缺的基本元素,也是绝大多数微生物必备的营养元素[1]。因此,铁已成宿主-病原体相互作用的关键决定因素,影响并调控多种胞内菌的生存和复制。已有研究表明,胞内游离铁的隔离或限制是许多许多生物的主要防...
- 孙天浩王震陈创夫
- 文献传递
