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王令: 作品数：77 被引量：134H指数：6; 供职机构：陕西理工大学生物科学与工程学院更多>>; 发文基金：陕西省教育厅科研计划项目国家自然科学基金陕西省科技厅农业攻关项目更多>>; 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程医药卫生更多>>

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汉中黑稻黄烷酮3-羟化酶基因(F3H)的遗传变异分析: 2016年; 本实验通过PCR和测序拼接获得汉中地区8个黑稻品种黄烷酮3-羟化酶基因(F3H)编码区序列,在NCBI中用BLAST分析首次发现该基因位于水稻4号染色体。发现8种黑稻和普通籼稻F3H序列完全相同,与粳稻相比较,则存在4个突变位点,导致2个氨基酸突变。基于F3H序列信息的进化树表明黑稻与籼稻、粳稻、小麦、玉米的亲缘关系较近;遗传距离和同源性分析表明F3H基因较为保守,是一个古老的基因,可用于种属的鉴定分析。F3H蛋白理化性质分析发现,黑稻与其它禾本科植物存在一定差异,蛋白三维结构及相关位点预测发现粳稻和黑稻无明显差异,初步认为黑稻F3H序列变异可能与花青素的合成无关,需要在其表当量与花青苷和成合成与沉积的关系方面开展进一步研究。; 张涛尹亚军路宏朝王令; 关键词：黑稻

维生素D及其受体介导microRNA的抗癌作用机制研究进展被引量：2: 2020年; 维生素D受体(VDR)作为转录调控因子与活性维生素D(VD)结合形成VD/VDR复合物调控靶基因的转录。跟踪近年VD/VDR调控microRNA的表达,发挥抗肿瘤作用相关研究报道,总结了VD抗肿瘤的主要途径;分析不同癌细胞内VD/VDR调控特异microRNA表达差异,实现了抗肿瘤作用的信号通路;揭示了VD/VDR介导microRNA促进癌细胞凋亡、抑制癌细胞增殖和转移的抗癌分子机制。可以启发研究者开展相关研究,为研发抗肿瘤的VD类药物提供参考。; 张强郭苗苗张涛路宏朝王珊珊王令; 关键词：维生素D 维生素D受体 MICRORNA 转录调控

海栖热袍菌耐热葡聚糖内切酶EG12B基因的克隆表达及酶学特性分析: 2019年; 为了促进家畜对纤维素饲料的消化吸收,提高饲料利用率,改善畜产品品质,本研究基于海栖热袍菌(Thermotoga maritima)的基因组信息,通过筛选获得一段具有潜在耐热特性的葡聚糖内切酶基因(EG12B)序列。经删除预测信号肽和优化密码子偏好性,运用基因工程手段将成熟肽EG12B基因克隆至原核表达载体pET-28a中,成功构建了重组表达质粒pET28-EG12B。转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经重组菌发酵培养及IPTG诱导表达,实现了EG12B在大肠杆菌系统中的胞内高效表达,表达量约占全细胞总蛋白的36%。通过细胞超声破碎、镍离子亲和层析以及热处理分离纯化,获得了电泳纯重组酶EG12B。酶学特性分析表明,该重组酶的最适反应温度为90℃,最适反应pH为5.2,在70℃下保温1 h,酶活力基本维持不变。表明葡聚糖内切酶EG12B具有优越的耐热性和良好的热稳定性,为进一步作为饲料添加剂用于纤维素饲料关键技术的开发和畜产品品质的提升奠定了理论基础。; 王珊珊任艳艳张涛路宏朝王令; 关键词：海栖热袍菌葡聚糖内切酶克隆表达酶学特性

略阳乌鸡汤对D-半乳糖致衰老小鼠不同组织的保护作用被引量：1: 2022年; 目的:研究略阳乌鸡汤对D-半乳糖致衰老小鼠不同组织的抗氧化作用,为略阳乌鸡的深加工和产业化开发提供理论支撑。方法:通过分析略阳乌鸡汤中矿物质元素和氨基酸含量,评价略阳乌鸡汤的主要营养价值。采用腹腔注射D-半乳糖构建衰老小鼠模型,用略阳乌鸡汤对衰老模型小鼠进行灌胃干预,连续干预10周。记录小鼠生长状态及体重变化,检测血清、睾丸、肝脏以及肾脏中超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量。制备肝脏、肾脏、睾丸组织切片,通过HE染色观察组织病理学变化,通过SA-β-GAL染色分析不同处理组小鼠睾丸、肾脏和肝脏的衰老程度。结果:略阳乌鸡汤中未检出铅、砷、汞,钙、锌、硒含量分别为1040±2.59 mg/kg、3.25±0.65 mg/kg、8.72±0.53μg/kg;氨基酸总量1234 mg/100 g,其中必需氨基酸占25.5%,非必需氨基酸占74.5%,支链氨基酸占8.16%。与衰老模型组相比,略阳乌鸡汤干预组能显著(P<0.05)提高小鼠血清、睾丸、肝脏以及肾脏SOD活力、T-AOC、GSHPx活力,显著降低MDA含量(P<0.05)。HE染色和SA-β-GAL染色发现,略阳乌鸡汤能显著修复D-半乳糖对小鼠不同组织造成的损伤。结论:略阳乌鸡汤具有明显的抗氧化能力,可延缓衰老。; 刘茜赵浩名王令王珊珊路宏朝袁国强张涛; 关键词：延缓衰老抗氧化

锌指核酸酶技术在基因治疗中的应用研究进展被引量：1: 2011年; 锌指核酸酶技术是一种新兴的基因高效靶向修饰和调控技术,目前该技术已在人类疾病的基因治疗中得到应用,通过敲除致病基因使其丧失致病性或者通过修复突变基因使基因表达正常,实现了对多种人类疾病的基因治疗。基于提高锌指核酸酶效率、特异性和降低细胞毒性等方面的研究较少的现状,特就人工锌指核酸酶介导的基因敲除和基因同源重组修复等在人类疾病基因治疗方面的应用及存在问题进行了综述,并对相关研究的开展进行了展望。; 李战伟王令任刚王昕张智英; 关键词：基因治疗锌指核酸酶同源重组

基于SSA修复机制和特异性核酸酶活性检测的双荧光报告载体系统的开发及应用被引量：3: 2015年; 报告载体系统因构建快捷、改造简单、操作容易、经济有效,并且能通过介导筛选核酸酶阳性细胞富集基因组修饰的阳性细胞克隆,而成为特异性核酸酶活性检测的重要手段。基于非同源末端连接(Non-homologous end joining,NHEJ)修复机制的报告系统在引入DNA双链断裂(Double strand breaks,DSBs)后,经过优化最高也只有2/3的概率实现报告基因的修复;而单链退火(Single strand annealing,SSA)修复机制在引入DSBs后,理论上可以实现报告基因100%的修复,具有更高的灵敏度,有利于活性较低的特异性核酸酶活性的检测,为基因组修饰研究中特异性核酸酶活性的检测提供了有效的手段。本研究设计并构建了3套基于SSA修复机制的双荧光报告载体系统,并应用m RFP-e GFP系统检测了3对ZFNs的有效活性,其活性检测结果分别为8.9%、9.3%和5.0%,该研究为核酸酶活性的检测提供了有效的手段。; 韩芙蓉王令徐坤张智英王昕

重组铜绿假单胞菌外膜蛋白OprI的原核表达及多克隆抗体制备被引量：7: 2015年; [目的]构建铜绿假单胞菌外膜蛋白OprI原核载体,表达、纯化OprI蛋白,制备并鉴定小鼠多克隆抗体。[方法]通过分子克隆获得OprI蛋白的表达菌株;利用SDS-PAGE电泳切胶纯化、尿素梯度复性获得OprI蛋白,免疫小鼠制备OprI蛋白多克隆抗体;采用ELISA法检测抗体滴度;Western blotting检测抗血清特异性;DNAMAN与MEGA软件分析OprI蛋白系统进化关系。[结果]OprI重组载体双酶切、DNA测序鉴定结果,以及蛋白表达、纯化条带大小与预测一致。ELISA法获得OprI抗血清滴度达1:3200倍,Western blotting证实抗血清具有很好的特异性。OprI序列的系统发生分析发现不同细菌存在很高的同源性。[结论]成功克隆、表达与纯化OprI蛋白,制备并鉴定小鼠多克隆抗体。为OprI蛋白免疫学功能研究奠定基础。; 陈春琳刘祥王成富王令俱雄张涛吴三桥张晓娟; 关键词：多克隆抗体 WESTERN BLOTTING 系统发生分析

自噬对雄性哺乳动物生殖的影响被引量：2: 2023年; 自噬是细胞内蛋白质和细胞器降解与循环利用的一种分解代谢过程,参与细胞增殖与分化等各种生物学过程。大量研究表明,自噬与雄性生殖密切相关,特别是精子发生和睾酮分泌,但自噬对雄性生殖是保护还是损伤,以及相关的分子机制仍不清楚。梳理总结了自噬在精子生成和睾酮分泌过程中的作用,并分析了药物诱导自噬对雄性生殖的影响,为自噬相关疾病的治疗,特别是男性不育领域的研究提供了一定的借鉴与见解。; 薛振李盼杨玉菲宁波路宏朝王令马海东张涛; 关键词：自噬精子发生睾酮合成

一种初生奶山羊初乳灌服器: 本实用新型公开了一种初生奶山羊初乳灌服器，包括盛乳罐，所述盛乳罐的一端设置有开口，且所述盛乳罐中滑动设置有活塞板，所述活塞板的一侧侧壁上固定设置有推杆，所述推杆延伸出盛乳罐的开口设置，且所述推杆远离活塞板的一端固定设置有...; 马海东程佳王令王珊珊孙园园高琪; 文献传递

基于文献计量的肉制品微生物研究现状和热点分析: 2023年; 为了探究肉制品微生物的研究进展、热点和未来发展趋势,本文基于文献计量学方法,利用CiteSpace知识图谱分析工具,结合1980~2022年中国知网(CNKI)学术期刊数据库和1977~2022年Web of Science(WOS)核心合集数据库对肉制品微生物领域842篇中文文献和1530篇英文文献进行计量统计和可视化分析。从年度发文量,核心文献,核心发文国家、作者、机构以及期刊分布,关键词共现聚类等角度,阐述了该领域的研究现状和热点。结果显示,有关肉制品微生物的研究,国内外发文量均呈现波动上升的趋势且外文文献量增长更为显著,外文文献的被引频次远高于中文论文;发文国家主要以美国、西班牙、巴西和中国等为主力军;研究机构主要为高校和科研院所,如西班牙高等科研理事会(CSIC)、美国农业科学研究院(ARS)、江南大学等;全球研究热点主要集中于微生物对肉制品风味品质和理化性质的影响、微生物在肉制品生产过程中参与代谢的机理以及食品安全性等方面。本文通过综合分析,为我国科研人员从事相关研究和预测行业未来发展趋势提供参考和帮助。; 宁波王令路宏朝张涛; 关键词：CITESPACE 肉制品微生物文献计量分析

王令

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