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不同储藏时间笔架茶生物碱成分分析被引量：2: 2010年; 本实验以三种储藏时间不同的笔架茶1#、2#和3#茶为原料,用热回流法和有机溶剂萃取法联用的方法提取其生物碱,分析了热回流时间(A)和料液比(B)对三种茶生物碱提取率的影响。用M arqu is等五种试剂对提取的生物碱进行鉴定分析,并用HPLC分析生物碱主要成分的含量。结果表明:笔架茶中生物碱的含量随储藏时间的延长而降低。A和B对储藏时间不同的三种笔架茶生物碱提取率的影响各不相同。沉淀及显色反应鉴定显示提取生物碱的主要成分为咖啡因,HPLC定量分析表明3#新茶生物碱中咖啡因含量最高(94.33%),1#陈茶咖啡因含量最低(75.76%)。; 吴海强王晓娟艾梅刘志刚贺震旦; 关键词：生物碱咖啡因 HPLC

笔架茶色素的提取、鉴定及稳定性研究被引量：1: 2010年; 提取笔架茶色素并对其进行鉴定和稳定性分析。以清远笔架茶为原料,用加热和有机溶剂萃取法制取茶色素,分析提取时间(A)、料液比(B)对笔架茶色素提取率(α)的影响,采用三氯化铁试剂等方法对其进行鉴定,并分析酸碱、光和加热等外界因素对笔架茶色素稳定性的影响。A和B对笔架茶色素提取率的影响各不相同,优化提取条件为A1∶30,B30min,α为4.966%,鉴定结果表明笔架茶色素主要成分为多酚类衍生物和黄酮类化合物,该类茶色素在酸性条件下对光和热的稳定性较高。笔架茶色素主要成分为茶黄素和茶红素,在酸性条件下稳定性较高,为笔架茶资源的进一步研究及开发提供理论支持。; 王晓娟吴海强李静刘志刚; 关键词：色素

甜荞麦16KD过敏原基因的克隆及其原核表达载体的构建: 目的克隆甜荞麦16KD过敏原基因及其原核表达载体的构建。方法RT-PCR克隆甜荞麦16KD过敏原蛋白的全长基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增甜荞麦16KD过敏原基因的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接...; 王晓娟邬玉兰刘志刚; 文献传递

pH值和酶作用对鲩鱼过敏原免疫学活性的影响研究被引量：1: 2010年; 目的研究pH值、胃蛋白酶和胰蛋白酶作用对鲩鱼过敏原免疫学活性的影响。方法采用不同Coca's液提取制备鲩鱼总蛋白,以鲩鱼过敏患者阳性血清为一抗用Western Blotting方法分析pH值、胃蛋白酶和胰蛋白酶以及多因素多重作用对鲩鱼过敏原免疫学特性的影响。结果HCl溶液、胃蛋白酶溶液、胰蛋白酶溶液以及多种因素的多重作用对鲩鱼蛋白均有不同程度的降解作用,且均可以显著降低鲩鱼过敏原的免疫学活性,但一些蛋白具有很高的稳定性,如M_r为35 000和23 000的蛋白。受制备过程的影响,鲩鱼蛋白中出现新的阳性过敏原条带,如M_r为27 000和20 000的阳性过敏原条带(pH 1.0 HCl溶液)。结论鲩鱼含有稳定性较高的潜在过敏原,该类潜在过敏原对热、酸、酶解等作用均有很强的耐受性。; 吴海强徐飞龙王晓娟刘志刚; 关键词：鲩鱼 PH值胃蛋白酶免疫学特性

Ca2＋离子对榛子过敏原Cor h 1二级结构和抗原活性影响研究被引量：3: 2012年; 目的:研究Ca2+离子对非CaBPs蛋白类过敏原二级结构和抗原活性的影响。方法:以重组榛子主要过敏原Cor h 1为研究对象,用圆二色谱(CD)研究了系列浓度的Ca2+和EDTA各自存在情况下,不同蛋白浓度溶液中rCor h 1二级结构的变化及规律,并以榛子过敏患者血清为一抗,用ELISA实验分析了Ca2+和EDTA对rCor h 1抗原活性的影响。结果:在高浓度rCor h 1溶液中Ca2+的加入可以引起椭圆率的增加,而在低浓度的rCor h 1溶液中则引起椭圆率的降低;EDTA在高浓度和低浓度的rCor h 1溶液中均能引起rCor h 1二级结构相对含量的降低;椭圆率增加(或降低)的幅度与Ca2+、EDTA终浓度成正比。ELISA实验表明Ca2+和EDTA都能显著降低rCor h 1的抗原活性。结论:Ca2+离子可以显著影响rCor h 1的二级结构,降低其抗原活性,为非CaBPs蛋白类低致敏原的研究奠定了较好的前期研究基础。; 吴海强王晓娟邬玉兰张昉刘志刚; 关键词：榛子 H 圆二色谱抗原活性

甜荞麦16kDa过敏原基因的克隆及其原核表达载体的构建: 2012年; 目的对甜荞麦(common buckwheat)过敏原的分子生物学开展研究。方法通过RT-PCR克隆甜荞麦16kDa过敏原蛋白的全长基因,并根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增甜荞麦16kDa过敏原基因的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接,构建原核表达载体。结果本研究成功克隆了甜荞麦16kDa过敏原蛋白的基因,且构建了其原核表达载体。该基因含有长度为450bp的开放阅读框,编码149个氨基酸,在GenBank数据库中的登录号为EU883600,同源性分析发现其与数据库中已知的荞麦过敏原基因有高度的同源性。结论本研究为甜荞麦16kDa过敏原蛋白的重组表达和临床过敏性疾病的诊断奠定了基础。; 刘晓宇王晓娟吴海强杨波刘志刚; 关键词：甜荞麦克隆原核表达载体

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王晓娟