王芳
- 作品数：24 被引量：21H指数：3
- 供职机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中国水产科学研究院基本科研业务费专项基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程农业科学更多>>
- 海洋细菌新型低温碱性蛋白酶MP晶体
- 本发明涉及一种海洋细菌新型低温碱性蛋白酶MP晶体，其特征在于该低温碱性蛋白酶MP晶体为斜状晶体，是胞外酶，分子量49320Da，PI＝8.5，最适催化温度30℃，最适PH9.5，EDTA抑制酶活性，含463个氨基酸；整体...
- 孙谧郝建华王伟王芳朱重昊
- 文献传递
- 产酯酶B1海洋枯草芽孢杆菌C5发酵条件优化被引量：4
- 2012年
- 为提高芽孢杆菌C5产酯酶B1的能力,采用响应面法对其发酵条件进行优化.首先通过单因素实验筛选氮源、碳源、接种量、起始发酵pH、装液量、发酵温度和转速这7个因素,当酶活达到最高值时,各单因素的值分别为氮源玉米浆30 mL/L,碳源麦芽糖35 g/L,接种量4%(φ),起始pH 7.0,装液量15 mL,培养温度36℃,转速在实验室现有条件下最高选择220 r/min;再通过Plackett-Burman(PB)设计法,评价了这7个因素对酯酶B1产量影响的大小,确定氮源玉米浆的浓度、发酵起始pH和发酵温度为酯酶产生的3个主要影响因素;利用中心组合设计(CCD)及SAS软件分析获得了主要因素的最优条件,即玉米浆浓度28.70 mL/L,起始发酵pH为7.10,发酵温度为35.8℃.预测最高酶活力为139.18U/mL,实验最终酶活达到138.40 U/mL,与原发酵条件相比提高了228.15%.其实验值与预测值基本相符,说明预测模型可应用于酯酶发酵条件的优化.
- 包兴艳郝建华陈世建王芳王伟孙谧
- 关键词：酯酶PLACKETT-BURMAN响应面法甲基对硫磷
- 抹香鲸Mb及突变体H64D/V68I Mb在降解磺胺类化合物中的应用
- 本发明涉及抹香鲸Mb及突变体H64D/V68IMb在降解磺胺类化合物中的应用，属于生物技术领域，所述H64D/V68IMb的核苷酸序列为：SEQ ID NO.1，野生型抹香鲸Mb的核苷酸序列为：SEQ ID NO.2。野...
- 徐甲坤张伟康王芳
- 脱乙酰酶及其编码基因、重组质粒、重组菌与应用
- 本发明涉及一种脱乙酰酶及其编码基因、重组质粒、重组菌与应用，属于酶工程领域，所述几丁质脱乙酰酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码所述的几丁质脱乙酰酶的编码基因如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供一种含有...
- 徐甲坤王旭彤王芳谭佳豪邹华英
- 南极磷虾贮藏过程中导致其品质劣化的优势菌群确定方法
- 本发明提供一种南极磷虾贮藏过程中导致其品质劣化的优势菌群确定方法，属于食品领域。所述方法使用高通量测序法从不同温度贮藏条件下分析南极磷虾中微生物多样性，确定导致其品质劣化的优势菌群。为南极磷虾相关的食品加工条件提供参考依...
- 王芳徐甲坤陈怡炫惠彦行
- 海洋细菌新型低温碱性蛋白酶MP
- 本发明涉及海洋细菌新型低温碱性蛋白酶MP，通过现代克隆技术PCR、DNA Shuffing、RAISE等方法克隆产自海洋细菌新型低温碱性蛋白酶的基因序列，其N端有17个氨基酸的信号肽序列，中间有保守的Zn<Sup>2+<...
- 孙谧王芳郝建华王伟刘均忠
- 过氧化氢酶高产菌株CE-2-A的发酵条件优化被引量：2
- 2010年
- 为了提高气单胞菌属菌株CE-2-A的过氧化氢酶产量,对其发酵条件进行优化。首先运用了单因子试验筛选出了发酵培养基的麦芽糖含量、牛肉膏含量、CaCl2和MgCl2含量,在此基础上采用Plackett-Burman设计法,对8种影响产酶的因素进行评价。试验结果表明,牛肉膏含量、起始pH、摇瓶装液量对菌株产过氧化氢酶的活力具有显著的影响。通过Box-Behnken试验考察了牛肉膏含量、起始pH、摇瓶装液量这3个主要因素对菌株所产过氧化氢酶活力的影响。发酵条件优化结果为装液量42.6ml、牛肉膏含量3.69g/L、起始pH9.1,采用优化后发酵培养条件进行摇瓶发酵培养,过氧化氢酶的酶活力达到2532.5U/ml,与优化前酶活力(1849.7U/ml)相比提高了36.9%。
- 张增祥王伟王芳孙谧
- 关键词：气单胞菌过氧化氢酶发酵条件
- 基于肌红蛋白构筑新型生物催化剂被引量：1
- 2017年
- 利用计算机模拟与基因工程相结合的方法,对抹香鲸肌红蛋白活性中心疏水空穴进行设计,重点研究了肌红蛋白活性部位68、107位置的氨基酸(大小、疏水性)对肌红蛋白催化性能的影响。设计、制备、表达并纯化了H64D/I107V、H64D/I107A和H64D/I107G三种变体,测试了不同变体对吲哚羟基化反应的催化性能,并通过计算机模拟阐明肌红蛋白活性部位构筑与其催化性能之间的联系。研究表明:H64D/I107V、H64D/I107A和H64D/I107G三种变体均能催化吲哚的羟基化反应,kcat分别为10.6、9.2和25.2min^(-1);证明了107位置氨基酸的空间位阻效应和68位置氨基酸的疏水性能够显著影响底物在蛋白活性部位的空间构象,进而影响肌红蛋白的催化性能。研究结果为基于肌红蛋白新型生物催化剂的开发提供了新的实验依据与理论基础。
- 张芳芳徐甲坤王芳郭辉梁兴国
- 关键词：生物催化剂肌红蛋白基因突变计算机模拟
- 一种新型海洋微生物低温碱性蛋白酶脱色方法
- 本发明涉及一种新型海洋微生物低温蛋白酶脱色方法,包括：D352阴离子交换树脂的处理,低温碱性蛋白酶MP的制备,低温碱性蛋白酶MP脱色步骤。该D352阴离子交换树脂脱色率为85%-93%；能较好地保留蛋白酶的酶活，酶活保留...
- 王芳孙谧徐甲坤刘均忠
- 文献传递
- 低温蛋白酶MP发酵液离子交换树脂的脱色被引量：1
- 2014年
- 低温蛋白酶MP发酵液中的色素沉积影响了其在产品中的应用,该文研究了利用离子交换树脂对其进行脱色。实验结果表明,阴离子树脂D352既能有效地脱色,又能保持较高的蛋白酶酶活;D352树脂脱色的最适pH值为6-7,最适温度为30℃,最有效的流速为6 BV/mL;D352树脂在吸附色素的同时也能吸附发酵液中大量杂蛋白分子,蛋白脱除率为45.2%;D352树脂在连续使用6次之后仍具有较强的脱色能力。
- 王芳徐甲坤刘均忠孙谧
- 关键词：蛋白酶发酵液离子交换树脂脱色
