- 靶向AKT的RNA干扰调控人乳腺癌细胞生长的体外研究被引量：1
- 2009年
- 采用Oligofectamine转染靶向AKT的siRNA至人乳腺癌细胞系MCF-7,利用real-timePCR检测AKT的表达水平;MTT及流式细胞术分析转染后细胞的生物学特征变化;免疫荧光染色及Western印迹方法观察IA型PI3K/AKT通路主要成员的表达变化。Real-time PCR结果表明转染靶向AKT的siRNA组可以有效敲低AKT的表达水平;MTT结果显示AKT siRNA治疗组细胞增殖率显著降低;流式细胞术结果显示AKT siRNA转染组细胞在G_0/G_1期阻滞,凋亡比例明显高于空白对照组与空载体治疗组;免疫荧光和Western印迹结果均表明转染AKT siRNA组细胞AKT、pAKT、Ki67、Bcl-2几个重要癌蛋白的表达水平均有明显的下调。以上结果表明运用AKT siRNA转染人乳腺癌细胞系MCF-7细胞后,可抑制其肿瘤细胞的增殖并诱导凋亡,因此AKT可以作为人乳腺癌基因治疗的候选靶点。
- 梅玫任玉周旋祁艳斌赵川申潇咏姚智
- 关键词：AKTRNA干扰乳腺癌基因治疗
- 反义miR-221/222上调p27^(kip1)对MCF-7乳腺癌细胞系的放射增敏作用被引量：4
- 2009年
- 目的探讨敲低miR-221/222表达上调p27kip1对MCF-7人乳腺癌细胞系放射敏感性的影响。方法经生物信息学分析查询miR-221/222成熟体序列和它们与p27kip1的关系。脂质体共转染反义寡聚核苷酸(反义miR-221/222)后,用Northern blot法检测转染后MCF-7细胞miR-221、miR-222表达水平;将实验细胞分为6组:对照组、对照照射组、无义序列组、无义序列照射组、反义miR-221/222共转染组和反义miR-221/222共转染照射组。用MTT法检测细胞增殖及放射协同作用,流式细胞仪分析细胞周期,克隆形成实验检测细胞增殖,Western blot分析p27kip1蛋白的表达变化。数据间的方差分析采用F检验;两两比较采用LSD-t检验。结果经生物信息学分析显示miR-221/222成熟体序列的种子序列几乎一致,p27kip1是miR-221/222的靶基因。Northern blot显示反义miR-221/222共转染组miR-221、miR-222的表达水平明显下降(miR-221:P=0.000;miR-222:P=0.000)。对照组及无义序列组之间miR-221、miR-222表达水平的差异无统计学意义(miR-221:P=0.371;miR-222:P=0.284)。MTT结果显示转染后第4天共转染组肿瘤细胞生长抑制效果最好,细胞增殖率明显低于对照组和无义序列组(P=0.000),但与放射治疗无协同作用(P=0.091)。流式细胞术检测可见共转染组细胞周期存在G0/G1期阻滞(P=0.000)。经放射治疗后,可明显降低S期比例(P=0.002)。克隆形成实验表明反义miR-221/222可增加MCF-7细胞的放射敏感性。Western blot显示反义miR-221/222共转染组的p27kip1蛋白表达明显上调(P=0.000)。结论反义miR-221/222通过上调p27kip1蛋白表达可以增加MCF-7人乳腺癌细胞系放射敏感性。
- 梅玫任玉周旋祁艳斌王鸿梅张灏申潇咏赵川苏征姚智
- 关键词：MIR-221MIR-222
- 肽核酸在杜兴肌肉萎缩症治疗中的应用研究
- 杜兴肌肉萎缩症(Duchenne Muscular Dystrophy-DMD)是一种X染色体连锁遗传的肌肉退行性遗传病,由抗肌萎缩蛋白dystrophin基因发生突变引起dystrophin蛋白缺失所致,目前临床尚无有...
- 申潇咏
- 关键词：肽核酸抗肌萎缩蛋白反义寡核苷酸
- 文献传递
- 大鼠急性内囊出血所致的空肠肠系膜微循环血流动力学变化的解析
- 目的：1.建立大鼠内囊出血模型，并利用微循环方法进一步验证内囊出血模型。2.观察内囊出血前后大鼠肠系膜微循环的血流动力学变化，为探讨脑出血后应激性溃疡发病机理提供微循环方面的依据，从血流动力学角度对应激性溃疡的机制进行更...
- 申潇咏
- 关键词：内囊出血微循环障碍血流动力学
- 文献传递
