程刚锋
- 作品数：14 被引量：28H指数：4
- 供职机构：广州军区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金军队医学科研项目军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 2003年广州市登革1型病毒流行株的分离及NS2基因序列分析被引量：1
- 2004年
- 目的对广州市区2003年仲夏一批疑似登革病毒感染的患者进行确诊,并从基因水平分析流行株的可能来源。方法用免疫层析法(ICT)检测早期疑似患者的DV-IgM和IgG抗体;同时用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、细胞培养病毒分离分别进行病原的分离和鉴定;对所分离到的毒株进行基因克隆、测序,并与国际参考株及国内流行株相应的序列进行同源性分析,结合患者的流行病学资料推测本次流行株的可能来源。结果发病5d内患者DV-IgM抗体阳性率为56.5%(13/23),发病5～10d的患者DV-IgM抗体阳性率为66.7%(16/24);DV-IgG抗体无1例阳性。从18份发病5d内患者的血标本中分离病毒7份,经RT-PCR和基因测序检测证实为DV1感染;用RT-PCR检测30份早期患者血标本,患者的阳性率为83.3%(25/30)。基因序列分析表明,2003年流行株与登革1型病毒柬埔寨流行株及我国1997、1999年登革1型病毒流行株的同源性最高,分别为97%、97%、98%。所有患者在发病前两个月均在广州市区某大院内居住,无输血史、无外出史。结论2003年广州登革热流行为登革1型病毒感染所致,推测广东可能存在登革1型病毒的疫源地。
- 卢业成江振友陈万山任瑞文方美玉王少珍程刚锋田小东刘建伟尹炽标
- 关键词：登革病毒病毒分离逆转录-聚合酶链反应
- RT-PCR法快速鉴定几种甲病毒感染被引量：1
- 2005年
- 目的简单、快速地鉴定几种临床症状相似的甲病毒及黄病毒感染,并将它们加以简单的区分。方法从病毒培养细胞上清提取病毒总RNA,并用甲病毒特异性引物进行RT-PCR扩增,把扩增产物进行凝胶电泳。结果通过凝胶电泳,观察到甲病毒科的辛德毕斯病毒扩增片段大小为1420bp,孔肯雅病毒为1630bp,罗斯河病毒病为1650bp,而属于黄病毒的西尼罗病毒和登革病毒无条带出现。结论RT-PCR法可简单、快速地初步鉴定及区分这几株临床症状相似的病毒感染。
- 王军军洪文艳程刚锋
- 关键词：甲病毒RT-PCR
- 2003年广州市登革Ⅰ型病毒流行株的分离及NS2基因序列分析
- 登革热(Dengue fever,DF)和登革出血热(Dengue hemorrhagic fever,DHF)是由登革病毒(Dengue virus,DV)引起的虫媒传染病,可分为DV1~4个血清型.临床主要表现为高热...
- 卢业成陈万山任瑞文方美玉王少珍程刚锋田小东刘建伟尹炽标张复春
- 关键词：流行株登革出血热致病病原免疫层析试验
- 文献传递
- 微孔杂交快速检测黄热病及乙型脑炎病毒方法的建立被引量：6
- 2004年
- 任瑞文方美玉洪文艳刘建伟田小东程刚锋林立辉
- 关键词：乙脑病毒黄热病病毒流行性乙型脑炎病毒PCR-ELISA
- 广东流行的三株登革1型病毒包膜蛋白基因的序列测定与分析被引量：4
- 2005年
- 目的通过对广东省不同地区、不同流行期间分离的三株登革1型病毒(DV1)的结构蛋白E基因进行序列测定及分析,了解各流行株之间的遗传差异,追踪其可能的传染来源.方法应用RT-PCR技术扩增病毒的结构蛋白E基因,克隆到PMD18-T载体,转化JM109宿主菌,挑取阳性克隆进行鉴定及序列测定,应用计算机软件与国内外参考及流行株进行同源性分析,并绘制基因系统发生树.结果3株DV1病毒E基因序列长度均为1 485bp,编码495个氨基酸,核苷酸序列同源性在91%～98%之间,推测的氨基酸序列同源性在94%～99%之间.GD23/95与A88核苷酸(氨基酸)同源性为95%(98%),与其他株的同源性相对较低,2株属同一基因型;GD14/97和GD05/99与Cambodia共享序列非常接近,3株同属另一基因型.结论广东省1997、1999和1995年流行的登革热可能来自境外不同的疫源地.
- 田小东刘建伟方美玉蒋廉华任瑞文洪文艳程刚锋
- 关键词：登革病毒
- 三株登革1型病毒广东流行株包膜蛋白基因的序列测定与分析
- 登革热的病原为登革病毒(DV),属黄病毒科成员,有4个血清型,均可引起登革热(DF)、登革出血热(DHF)和登革休克综合症(DSS).其致病机理目前尚未明了.登革病毒的基因组为单股正链RNA,全长11KB,共编码三个结构...
- 田小东刘建伟方美玉蒋廉华任瑞文洪文艳程刚锋
- 关键词：登革病毒包膜蛋白基因分析
- 文献传递
- 广东省江门地区登革病毒分离株的鉴定及结构蛋白序列分析被引量：3
- 2003年
- 目的 对广东省江门地区 2 0 0 1年夏、秋季一批发热、出疹患者进行确诊 ,并从分子水平分析流行株的可能来源。方法 分别采用免疫荧光、细胞毒力、乳鼠毒力实验以及逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术进行病毒鉴定 ,并对其结构蛋白基因序列进行克隆、测序及同源性搜索。结果37份患者血清登革病毒 (DV)IgM抗体阳性率为 97% (36 37) ,IgG抗体阳性率为 59% (2 2 37) ,最高抗体滴度均可达 1∶640。所得病毒可致C6 36细胞病变 ,具有乳鼠神经毒力 ;其结构基因序列长度为2 32 5bp ,编码 774个氨基酸 ;与其他登革 2型病毒株TSV0 1、GD0 6 93、NGC、44、ThNH、0 4、GD0 8 98及S1进行比较 ,其核酸序列同源性 (% )分别为 98、96、94、94、92、92、92、91。结论 2 0 0 1年江门地区登革热流行为登革 2型病毒感染所致 。
- 任瑞文方美玉洪文燕黄宝明蒋廉华刘建伟田小东程刚锋
- 关键词：登革病毒病毒分离
- PCR-ELISA快速检测黄病毒的研究
- 黄病毒为虫媒传染病的病原之一,在国内常见的黄病毒为登革病毒1-4型和流行性乙型脑炎病毒,对人们的健康威胁很大。黄病毒的代表株为黄热病毒(Yellow Fever virus,YFDl7),可引起以发热、黄疸和出血为主要表...
- 任瑞文方美玉刘建伟洪文燕田小东程刚锋林立辉
- 关键词：黄热病毒登革病毒乙型脑炎病毒PCR-ELISA
- 文献传递
- 套式逆转录聚合酶链反应在黄热病毒快速检测中的应用被引量：8
- 2005年
- 目的建立灵敏、特异的套式逆转录聚合酶联反应(RTPCR)快速检测黄热病毒方法。方法参照黄热病毒标准株D17序列设计套式引物,并检索国际基因序列数据库初步验证其特异性,随后对镁离子、dNTP及引物浓度,PCR反应条件进行优化,建立稳定、特异的套式RTPCR快速检测黄热病毒方法,并以同属于黄病毒科的登革病毒1～4型、流行性乙型脑炎病毒为对照,验证其特异性。结果外引物扩增可获得404bp左右的特异性扩增片断,阴性对照毒株未见设计大小的扩增片断,但可见非特异性片断;内引物扩增可获得349bp左右片断,阴性对照无扩增条带。结论套式RTPCR可快速、灵敏、特异的检测黄热病毒。
- 任瑞文郝丽方美玉程刚锋洪文艳刘建伟田小东林立辉
- 关键词：黄热病毒套式RT-PCR逆转录聚合酶联反应流行性乙型脑炎病毒病毒方法标准株
- 3株登革病毒1型广东分离株NS1基因序列测定被引量：3
- 2003年
- 刘建伟田小东方美玉蒋廉华任瑞文洪文艳程刚锋
- 关键词：登革病毒流行病学基因序列分析
