胡月
- 作品数:3 被引量:4H指数:1
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 马动脉炎病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立
- 2014年
- 为建立马动脉炎病毒(EAV)的快速检测方法,本实验以EAV N蛋白单克隆抗体(MAb)2B9为捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的EAV N蛋白MAb 2B3(HRP-2B3)为检测抗体,建立EAV双抗体夹心ELISA检测方法。结果显示,该方法的最佳工作条件为:MAb 2B9的包被浓度为2μg/mL,HRP-2B3的工作浓度为2μg/mL,以OD450nm≥0.124为阳性判定标准。该方法对马传染性贫血病毒、马疱疹病毒I型和IV型、马流感病毒等均无交叉反应,特异性好;最低检出限为病毒标准品200倍稀释(103.2TCID50),敏感性高。3次重复试验建立的标准曲线的相关系数(R2)均大于0.997。本实验建立的EAV双抗体夹心ELISA方法具有特异性好、敏感性高等优点,适于EAV的快速检测。
- 胡月戚亭赵世华关平原王晓钧
- 关键词:马动脉炎病毒双抗体夹心ELISA单克隆抗体
- 马病毒性动脉炎被引量:1
- 2013年
- 马病毒性动脉炎(Equineviral Arteritis,EVA)又称马传染性动脉炎,是一种由马病毒性动脉炎病毒(Equine Arteritis Virus,EAV)引起的、在马属动物之间传播的急性接触性传染病。1957年,美国Doll等人首次从流产的马胎儿中分离出病毒(Bucyrus株),并将该病毒命名为马动脉炎病毒(Equine Arteritis Virus,EAV)。
- 胡月戚亭王晓钧
- 关键词:病毒性动脉炎急性接触性传染病马动脉炎病毒马属动物传染性
- 马动脉炎病毒Eva Green荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量:3
- 2014年
- 为建立马动脉炎病毒(EAV)的快速检测方法,本研究设计了一对针对EAV Bucyrus株ORF7基因序列的特异性引物,建立了检测EAV的Eva Green荧光定量RT-PCR(q RT-PCR)方法。结果表明,该方法在102拷贝/μL^107拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;最低检出量为101.5TCID50/m L病毒,敏感性为常规RT-PCR的100倍,与其他马常见病毒无交叉反应;组内及组间重复性试验的变异系数均小于2%,具有较好的重复性。此外,采用该方法测定了EAV Bucyrus株及其拯救病毒ic EAV感染RK-13细胞后的复制动态,并与TCID50方法进行了比较。结果显示ic EAV与其亲本病毒接种RK-13细胞后,0 h测定病毒TCID50及拷贝数分别为103.33TCID50/m L(104.65拷贝/2μL)和103.50TCID50/m L(104.70拷贝/2μL);60 h时,细胞病变达到100%,ic EAV及其亲本病毒的TCID50及拷贝数分别为105.67TCID50/m L(107.0拷贝/2μL)和105.57TCID50/m L(106.98拷贝/2μL),两株病毒在RK-13细胞内的复制效率相似。本研究建立的Eva Green q RT-PCR方法可以为细胞培养物中EAV的检测提供有效的技术手段。
- 胡月戚亭胡哲关平原王晓钧
- 关键词:马动脉炎病毒QRT-PCREVA病毒含量